周磊
- 作品数：12 被引量：18H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市基础研究重大（重点）项目上海申康医院发展中心市级医院临床管理优化项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 激活视黄醇类X受体抑制轻度氧化低密度脂蛋白诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264．7增殖
- 2008年
- 目的探讨激活视黄醇类X受体（RXR）对轻度氧化低密度脂蛋白（LoxLDL）诱导巨噬细胞增殖的影响及其作用机制。方法饥饿处理后的小鼠巨噬细胞系RAW264．7经LoxLDL（20μg／m1）刺激24h诱导细胞增殖，干预组同时给予不同浓度的RXR特异性激动剂顺式维甲酸9（9-cisRA），四甲基偶氮唑蓝方法检测细胞活力，脱氧尿嘧啶核苷免疫组化方法检测细胞DNA合成，流式细胞仪PI单染法检测细胞凋亡，Western印迹方法检测Nur77和RARβ蛋白表达。结果LoxLDL诱导24h后，细胞活力和DNA合成（A值）分别升高0．79±0．12和1．81±0．31，RXR的特异性配体9-cisRA能够显著抑制LoxLDL的作用，在10^-8mol／L和10^-7mol／L浓度分别使细胞活力下降到0．43±0．10和0．26±0．07（P〈0．05），DNA合成升高为1．14±0．43和0．72±0．06（P〈0．05），且对细胞凋亡没有影响。Western印迹检测表明，孤儿核受体Nur77蛋白表达在LoxLDL刺激后显著升高5倍以上，9-cisRA显著下调Nur77表达，同时上调下游靶基因RARβ蛋白表达。结论激活核受体RXR能够显著抑制LoxLDL刺激引起的巨噬细胞增殖，其机制可能与调控RXR／Nur77异源二聚体及其下游靶基因RARβ有关。
- 沈玲红何奔柴大军卜军周磊胡刘华曾锦章王力王彬尧
- 关键词：冠状动脉硬化巨噬细胞
- 9-顺式维甲酸抑制佛波酯诱导人单核细胞系THP-1向巨噬细胞分化被引量：1
- 2008年
- 目的探讨视黄醇类X受体特异性激动剂9-顺式维甲酸对佛波酯诱导人单核细胞系THP-1向巨噬细胞分化的影响。方法体外培养人单核细胞系THP-1,经佛波酯诱导分化为巨噬细胞,同时给予9-顺式维甲酸对佛波酯诱导分化进行干预,通过相差显微镜观察细胞形态,MTT比色法检测细胞贴壁率,流式细胞仪检测与单核/巨噬细胞分化有关的细胞表面标志物CD11b和CD36的表达。结果9-顺式维甲酸干预后梭形、分支状细胞明显减少,与佛波酯单独作用组相比细胞贴壁率减少50%(P<0.01),细胞表面标志物CD11b和CD36分别减少50%和28%(P<0.01)。结论视黄醇类X受体特异性激动剂9-顺式维甲酸可明显抑制佛波酯诱导人单核细胞系THP-1向巨噬细胞分化。
- 周磊何奔沈玲红曾锦章胡刘华卜军王力
- 关键词：内科学单核细胞细胞分化
- 孤儿核受体Nur77抑制小鼠巨噬细胞脂质沉积被引量：2
- 2008年
- 目的探讨孤儿核受体Nur77对巨噬细胞脂质沉积的影响及其机制。方法建立稳定表达绿色荧光蛋白（GFP）和GFP-Nur77质粒cDNA的小鼠巨噬细胞RAW264．7单克隆细胞系，40μg/ml氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）刺激24h后，用油红O染色定性观察细胞内脂质沉积，液相色谱-质谱联用法定量检测细胞内胆固醇酯，用荧光实时定量PCR（RT-PCR）检测CD36和腺苷三磷酸结合盒转运体A1（ABCA1）mRNA水平的变化，用流式细胞仪检测CD36蛋白表达，Westernblot方法检测ABCA1蛋白表达。结果Nur77能够显著减少ox-LDL诱导引起的巨噬细胞内脂质沉积。ox-LDL诱导前，GFP-RAW264．7组和GFP-Nur77-RAW264．7组细胞内总胆固醇含量分别为（38．66±0．13）μg／mg蛋白和（36．25±0．48）μg／mg蛋白，细胞内胆固醇酯含量为（18．85±0．03）μg／mg蛋白和（17．79±0．86）μg/mg蛋白。ox—LDL诱导24h后，GFP-RAW264．7组和GFP-Nur77-RAW264．7组细胞内总胆固醇含量分别为（68．98±1．68）μg／mg蛋白和（50．94±1．63）μg/mg蛋白，细胞内胆固醇酯含量为（35．92±2．28）μg/mg蛋白和（24．81±2．92）μg／mg蛋白。同时伴随CD36的mRNA及蛋白表达下降和ABCA1的mRNA及蛋白表达上调。结论孤儿核受体Nur77通过减少脂质摄取和增加脂质排出而减轻巨噬细胞内脂质沉积，这可能是其抗动脉粥样硬化的重要机制之一。
- 胡刘华何奔沈玲红周磊卜军江立生邵琴王力曾锦章
- 关键词：动脉粥样硬化巨噬细胞
- 少见的起源于左右冠窦交界处室性早搏的心电图特点和导管消融治疗探讨被引量：1
- 2013年
- 目的探讨左右冠窦交界处起源室性期前收缩(室性早搏)的心电图特点及其导管消融治疗。方法应用三维标测系统对两例左心室流出道室性早搏患者进行心内电生理检查和导管消融。结果电生理检查示两例室性早搏均起源于左右冠窦交界处。体表心电图特点为胸前导联移行较早(V3导联之前),V1导联为降支带切迹的QS型、V1-V3导联之一呈qrS型,或无特征性形态。导管贴靠于左右冠窦之间,或贴靠于两窦交界的左冠窦侧,两例室性早搏均获得完全消除。结论起源于左右冠窦交界处室性早搏的体表心电图有特征性表现,也可无特征性形态;采用适当的导管贴靠方法可以成功消融。
- 臧敏华周磊马建伟王新华何奔
- 关键词：室性期前收缩导管消融心电图
- 氧化型低密度脂蛋白诱导小鼠巨噬细胞系RAW264．7向树突样细胞形态分化
- 2007年
- 目的:探讨氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)能否诱导成熟的巨噬细胞转化为树突状细胞。方法:小鼠巨噬细胞系RAW264．7经oxLDL干预后,相差显微镜动态观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞表面标志物。结果:oxLDL诱导48h后RAW264．7细胞发生树突样细胞形态改变,并表达与树突状细胞免疫成熟和激活有关的细胞表面标志物,CD40、CD86、CD83、MHC ClassⅡ和CD1d分别上调约70％、90％、88％、76％和67％。oxLDL的作用具有剂量依赖性和时间依赖性,在10μg／ml浓度下诱导48 h最佳。结论:oxLDL能够诱导成熟的巨噬细胞分化为树突状细胞,可能加剧动脉粥样硬化炎症和免疫反应。
- 沈玲红王彬尧何奔曾锦章周磊胡刘华卜军王力
- 关键词：氧化型低密度脂蛋白巨噬细胞树突状细胞
- 激活视黄醇类X受体对氧化型低密度脂蛋白诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7向树突样细胞分化的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨激活核受体视黄醇类 X 受体(RXR)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞向树突状细胞分化的影响及其机制。方法小鼠巨噬细胞系 RAW264.7经 ox-LDL 诱导48 h 后分化为树突样细胞,相差显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞表面标志物,CM-H2DCFDA 荧光探针测定细胞内活性氧浓度。结果 ox-LDL 诱导48 h 后,表达与树突状细胞免疫成熟和激活有关的细胞表面标志物 CD40、CD86、CD83、MHC Class Ⅱ和 CD1d 的 RAW264.7细胞比例明显升高,同时给予天然型 RXR 特异性配体9-cisRA(10^(-7)mol/L)上述比例分别下降约47%、43%、48%、32%和17%,同时给予合成型 RXR 特异性配体 SR11237(10^(-6)mol/L)上述比例分别下降约38%、38%、46%、36%和32%,并且均表现剂量依赖性。相差显微镜观察发现树突样细胞形态改变也得到部分抑制。ox-LDL 引起细胞内活性氧浓度显著升高[平均荧光强度(MFI)38.24±4.20比4.46±0.39,P<0.05],同时给予9-cisRA(10^(-7)mol/L)或 SR11237(10^(-6)moVL)MFI 分别降低到12.60±1.52和17.89±1.91,较 ox-LDL 单独处理组差异有统计学意义(P<0.05)。结论激活核受体 RXR 能够部分抑制 ox-LDL 诱导巨噬细胞向树突状细胞分化,其机制可能与减轻细胞氧化应激损伤有关。
- 沈玲红何奔王彬尧曾锦章柴大军周磊胡刘华卜军王力
- 关键词：动脉硬化脂蛋白类LDL树突细胞
- 激活视黄醇类X受体对氧化型低密度脂蛋白诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7凋亡的影响
- 2008年
- 目的探讨激活视黄醇类X受体对氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡的影响及其机制。方法小鼠巨噬细胞系RAW264.7经氧化型低密度脂蛋白处理24h诱导凋亡,同时观察给予视黄醇类X受体特异性配体9-cisRA或SR11237对氧化型低密度脂蛋白诱导凋亡的干预作用,MTT法检测细胞活力,流式细胞仪PI单染法和DAPI染色检测细胞凋亡,CM-H2DCFDA荧光探针测定细胞内活性氧浓度。结果RAW264.7细胞经氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)处理24h后细胞活力较对照组下降约60,细胞凋亡百分率较对照组升高约75,10-8mol/L和10-7mol/L9-cisRA及10-7mol/LSR11237能够显著抑制氧化型低密度脂蛋白诱导引起的细胞活力下降和凋亡(P<0.05)。给予氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)4h后细胞内活性氧水平显著升高约17倍以上,如联合给予9-cisRA(10-7mol/L)或SR11237(10-6mol/L),平均荧光强度分别下降约52和28,较氧化型低密度脂蛋白单独处理组有显著性差异(P<0.05)。结论激活视黄醇类X受体能够抑制氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡,其机制可能与减轻细胞氧化应激损伤有关。
- 沈玲红何奔周磊胡刘华卜军邵琴王力曾锦章王彬尧
- 关键词：内科学氧化型低密度脂蛋白巨噬细胞动脉粥样硬化
- 激动维甲类X受体抑制过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡被引量：4
- 2008年
- 目的探讨维甲类X受体（retinoid X receptor，RXR）激动剂9-顺式维甲酸（9-cis retinoid acid，c-RA）对过氧化氢（hydrogen peroxide，H2O2）诱导的体外培养大鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法以培养的新生Sprague-Oawley（SD）大鼠心肌细胞为实验对象，随机分为三组：正常对照组（N组）、100μmol／L H2O2刺激组（H组）和100nmol／L c-RA干预组（H＋R组）。应用MTF法检测细胞活力，以Hoechst 33258荧光染色观察凋亡细胞，流式法检测细胞凋亡比率，JC-1荧光染色法检测细胞线粒体膜电位（△Ψm）变化，CM-H2DCFDA荧光探针测定细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平。所有计量资料以均数±标准差（-↑x±s）表示，采用单因素方差分析，Dunnett-t检验，以P〈0．05为差异具有统计学意义。结果c-RA明显增强H2O2刺激后的心肌细胞活力，减少凋亡比例，稳定线粒体膜电位，减轻细胞活性氧产生。结论RXR受体激动剂c-RA能够部分抑制H2O2诱导的心肌细胞凋亡，其机制可能与减轻细胞氧化应激损伤有关。
- 单培仁袁安彩王利民沈玲红柴大军周磊卜军何奔
- 关键词：心肌细胞凋亡氧化应激
- 9-顺式维甲酸抑制PMA诱导人单核细胞系THP-1表达MMP-9被引量：2
- 2007年
- 目的探讨视黄醛X受体(retinoid X receptors,RXRs)特异性激动剂9-顺式维甲酸(9-cisRA)对佛波酯(PMA)诱导人单核细胞系THP-1基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及活性的影响。方法体外培养THP-1细胞,PMA诱导分化为巨噬细胞,采用9-cisRA对不同浓度PMA组进行干预,应用Realtime-PCR、Westerblotting测定THP-1细胞MMP-9的基因和蛋白水平表达水平,通过Gelatin Zymography法检测MMP-9的酶活性。结果9-cisRA(100nmol/L)对不同浓度PMA组(10、20和40 nmol/L)干预24 h,9-cisRA可明显抑制THP-1细胞MMP-9转录水平,MMP-9的mRNA抑制率分别28%、60%、88%(P<0.01)。MMP-9蛋白水平及酶活性也呈显著下降。结论RXRs特异性激动剂9-cisRA可显著抑制PMA诱导THP-1的MMP-9转录和蛋白水平表达及其酶活性。
- 周磊曾锦章沈玲红王力胡刘华何奔
- 关键词：9-顺式维甲酸基质金属蛋白酶-9动脉粥样硬化
- 9-顺式维甲酸部分抑制脂多糖诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7向树突样细胞分化被引量：1
- 2007年
- 目的探讨激活视黄醇类X受体对脂多糖诱导巨噬细胞向树突状细胞分化的影响及其机制。方法小鼠巨噬细胞系RAW264.7经脂多糖诱导48h后分化为树突样细胞,观察同时给予视黄醇类X受体激动剂9-顺式维甲酸对脂多糖诱导分化的干预作用并检测细胞内活性氧的生成,相差显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测与树突状细胞免疫成熟和激活有关的细胞表面标志物(CD40、CD86和CD83),CM-H2DCFDA荧光探针测定细胞内活性氧浓度。结果9-顺式维甲酸部分抑制脂多糖诱导出现的树突样细胞形态改变,使被脂多糖诱导上调的细胞表面标志物CD40、CD86和CD83分别下降约50%、40%和38%,作用表现剂量依赖性;脂多糖引起细胞内活性氧浓度显著升高(平均荧光强度98.9±9.6比12.3±1.8,P<0.05),9-顺式维甲酸在10-8mol/L和10-7mol/L剂量水平分别降低平均荧光强度到69.4±5.8和37.0±4.2,较脂多糖单独处理组差异有显著性(P<0.05)。结论激活视黄醇类X受体能够部分抑制脂多糖诱导巨噬细胞向树突状细胞分化,其机制可能与减轻细胞氧化应激损伤有关。
- 沈玲红王彬尧何奔曾锦章周磊胡刘华王力卜军
- 关键词：内科学脂多糖巨噬细胞树突状细胞
