孔倩倩
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：上海中医药大学附属普陀医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 人外周血单个核细胞miR-UL112水平在HCMV感染中的诊断价值研究
- 2014年
- 目的探讨单个核细胞中人巨细胞病毒(HCMV)微小RNA(miR)-UL112-3p、miR-UL112-5p水平对HCMV潜伏和激发感染的诊断价值。方法选取非肿瘤患者92例[其中HCMV特异性CD8+T淋巴细胞高水平组(简称CD8+细胞高水平组)57例、HCMV特异性CD8+T淋巴细胞低水平组(简称CD8+细胞低水平组)35例]、肿瘤化疗患者30例,提取外周血单个核细胞,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(PCR)检测HCMV DNA、miR-UL112-3p及miR-UL112-5p水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-UL112-3p和miR-UL112-5p水平对HCMV潜伏感染的诊断价值。结果肿瘤化疗组HCMV DNA、miR-UL112-3p及miR-UL112-5p水平明显高于非肿瘤组(P<0.05)。非肿瘤组中CD8+细胞高水平组HCMV DNA、miR-UL112-3p及miR-UL112-5p水平明显高于CD8+细胞低水平组(P均<0.01);以CD8+细胞低水平组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p水平为标准,CD8+细胞高水平组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p阳性率分别为59.65%、64.91%。分别以1.09、1.52作为miRUL112-3p和miR-UL112-5p诊断HCMV较高水平潜伏感染状态的Cut-off值,敏感性分别为59.65%、64.91%,特异性分别为97.1%、97.1%。以非肿瘤组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p水平的x珋+s(即5.24、6.63)作为诊断HCMV激发感染的标准,肿瘤化疗组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p阳性率分别为50.00%、73.33%。结论 miRUL112-3p及miR-UL112-5p对HCMV潜伏和激发感染可能有一定的诊断价值。
- 吴蓉孔倩倩吕志异许健倪振华相芬芬康向东
- 关键词：人巨细胞病毒
- HCMV-miR-UL112-3p、HCMV-miR-22A在母婴巨细胞病毒垂直传播研究中的意义
- 目的检测配对母婴人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)-miR-UL112-3p、HCMV-miR-22A水平,研究HCMV-miR-UL112-3p、HCMV-miR-22A在评估HCMV...
- 吴蓉孔倩倩相芬芬倪振华许建康向东
- 文献传递
- 抗HPV18 E6多肽单克隆抗体的制备及鉴定
- 2016年
- 目的制备特异性抗人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）18 E6多肽抗体。方法通过在线分析软件AB-Cpred和Bcepred预测 HPV 18E6特异性多肽序列，将多肽序列与牛血清蛋白（bovine albumin，BSA）偶联，以偶联后多肽为抗原免疫BALB／c小鼠，采用杂交瘤技术制备抗 HPV18 E6多肽单克隆抗体；以 HPV18阳性分泌物标本DNA为模板，聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）获得 HPV 18 E6基因，将该基因插入表达质粒 pET-28a，转化大肠埃希菌BL21（DE3），异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导目的蛋白表达；采用 Western Blot方法鉴定抗 HPV18 E6多肽抗体与目的蛋白的反应性。结果建立的杂交瘤细胞株能稳定产生 HPV18 E6多肽单克隆抗体；重组表达质粒 pET-28a-HPV18 E6测序证明构建正确，成功表达 HPV18 E6蛋白；纯化后的抗 HPV 18 E6多肽抗体可特异性识别原核表达 HPV 18 E6蛋白。结论成功制备抗 HPV18 E6多肽序列，该抗体具有较好的特异性。
- 孔倩倩唐振华相芬芬詹月萍许健吴蓉康向东
- 关键词：人乳头瘤病毒多肽单克隆抗体
- HCMV-miR-UL112-3p、HCMV-miR-22A在母婴巨细胞病毒垂直传播研究中的意义
- 目的检测配对母婴人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)-miR-UL112-3p、HCMV-miR-22A水平,研究HCMV-miR-UL112-3p、HCMV-miR-22A在评估HCMV...
- 吴蓉孔倩倩相芬芬倪振华许建康向东
- HCMV-miR-UL112-3p、HCMV-miR-22A在母婴巨细胞病毒垂直传播研究中的意义
- 目的 检测配对母婴人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)-miR-UL112-3p、HCMV-miR-22A水平,研究HCMV-miR-UL112-3p、HCMV-miR-22A在评估HCM...
- 吴蓉孔倩倩相芬芬倪振华许建康向东
- 产ESBLs大肠埃希菌对氨基糖苷类药物的耐药性及其耐药基因序列分析被引量：7
- 2016年
- 目的研究云南玉溪市江川地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌对氨基糖苷类抗菌药物的耐药性及其耐药基因表达的频率,并对其耐药基因进行测序分析。方法采用纸片扩散法检测32株产ESBLs大肠埃希菌对庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、妥布霉素和奈替米星的耐药性。采用聚合酶链反应(PCR)检测7种氨基糖苷类修饰酶(AME)基因[aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰad、aac(6′)-Ⅰb、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ]和6种16S rRNA甲基化酶基因(armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、npmA),采用双脱氧末端终止法对aac(3)-Ⅱ基因进行测序分析。结果 32株产ESBLs大肠埃希菌对庆大霉素、阿米卡星、奈替米星、卡那霉素和妥布霉素的耐药率分别为100%、0%、0%、18%和87%。有6株菌株同时携带2种AME基因。从32株产ESBLs大肠埃希菌中检出aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ4种AME基因,阳性率分别为100%、9.4%、6.2%和3.1%;未检出16S rRNA甲基化酶基因。32株产ESBLs大肠埃希菌中有4株发生相同的aac(3)-Ⅱ突变,分别为G232A、T251C、G580A和T612A。8株不产ESBLs大肠埃希菌均未检出AME基因及16S rRNA甲基化酶基因。结论云南玉溪市江川地区产ESBLs大肠埃希菌耐氨基糖苷类药物与AME基因表达有关,奈替米星的耐药率增加可能与aac(3)-Ⅱ基因突变有关。
- 吴蓉吕玉江戴俊华相芬芬孔倩倩钱宁张贵留杨玉玲陈丽春康向东
- 关键词：大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶基因
- P-gp在人胃癌干细胞中表达的初步研究被引量：2
- 2016年
- 目的:通过无血清法富集人胃癌BGC-823干细胞,并对所获得的BGC-823干细胞生物学特性进行研究。方法:采用无血清悬浮培养方法富集人胃癌BGC-823干细胞球。后续实验分为BGC-823干细胞组和BGC-823细胞组:采用蛋白印迹(Western Blot)法和Hoechst33342染色法对所富集细胞的干性进行鉴定;利用平板克隆实验检测细胞单克隆形成能力;采用CCK-8法检测细胞对紫杉醇的敏感性;RT-PCR法检测P-gp mRNA的表达;细胞免疫荧光双染观察干细胞球CD44、P-gp的表达情况。结果:采用无血清悬浮培养法成功获得干细胞球。CCK-8结果显示,BGC-823干细胞对紫杉醇敏感性较BGC-823细胞降低(P<0.05)。干细胞球单克隆形成能力较人胃癌BGC-823细胞增强(P<0.05)。Western Blot和Hoechst33342染色法结果显示无血清富集的细胞为胃癌干细胞。RT-PCR、细胞免疫组化检测显示BGC-823干细胞CD44、P-gp的表达较BGC-823细胞升高,统计学差异明显(P<0.05)。结论:利用无血清富集法收集的人胃癌BGC-823干细胞球为研究干细胞的理想模型,胃癌干细胞的形成是耐药出现的潜在机制。
- 蒋洁敏乐红红相芬芬孔倩倩詹月萍许健吴蓉康向东
- 关键词：肿瘤干细胞人胃癌BGC-823细胞无血清耐药
