【目的】探讨信号转导因子与转录激活因子3(signal transduction and activators of transcription 3,STAT3)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体对宫颈癌HeLa细胞化疗药物顺铂敏感性的作用。【方法】构建针对STAT3基因的shRNA干扰质粒和阴性对照质粒,同时设空白对照组。采用Lipofectimane 2000转染宫颈癌HeLa细胞,RT-PCR及免疫蛋白印迹法分别检测STAT3基因的mRNA及蛋白表达水平。细胞经不同浓度顺铂(DDP)作用后,流式细胞术(FCS)检测细胞凋亡率,四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测细胞生长抑制率并计算DDP的50%抑制浓度(IC50)。【结果】与各对照组细胞相比,转染STAT3基因shRNA真核表达载体的HeLa细胞,STAT3基因在mRNA和蛋白水平表达均下降,凋亡率均明显增加,细胞对DDP的IC50值明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】针对STAT3基因的shRNA真核表达载体有效地抑制宫颈癌HeLa细胞STAT3基因表达,增强其对化疗药物DDP的敏感性。
