孙晓艳
- 作品数:51 被引量:119H指数:5
- 供职机构:中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- bFGF诱导表皮细胞去分化形成短暂扩充细胞
- 孙晓艳刘惠玲付小兵
- 重视精准烧伤医学体系的建设与推广被引量:1
- 2023年
- 近年来,精准医学有了较大的发展,但由于观念固化、方法与工具缺乏等原因,精准医学在烧伤外科中的进展与应用远远落后于其他学科。该文从烧伤创面面积与深度的精准诊断、烧伤创面的精准治疗、烧伤并发症的精准监测与诊治、精准烧伤康复治疗等方面,简要阐述了加强精准烧伤医学体系建设与推广的必要性及可能策略,希望能引起烧伤医务工作者的进一步重视,以快速推动我国精准烧伤医学的发展。
- 罗高兴孙晓艳吴军
- 关键词:烧伤烧伤深度烧伤瘢痕烧伤康复
- 表皮干细胞的分离培养和鉴定被引量:23
- 2007年
- 目的分离培养和鉴定人表皮基底层干细胞。方法中性蛋白水解酶选择性的消化表皮与真皮之间的细胞连接,采用改良的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法分离、培养表皮中的干细胞,观察培养第2、4、6天时a6、β1整合素、K19、K14、p63、Nestin、CD34、PCNA及K10在表皮干细胞中的表达差异。结果改良过的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法能够有效地促进表皮干细胞的贴壁和伸展。原代分离的表皮基底层干细胞a6、p1整合素,K19,K14,p63,Nestin,CD34及PCNA表达为强阳性而K10不表达。这些细胞具有干细胞的特点,可以形成克隆。随着培养时间的增加,表皮干细胞形态发生变化,a6、β1整合素、K19、K14,表达逐渐减弱,K10表达逐渐增强。此外,在原代分离的细胞中可见单个核样干细胞表达a6、β1整合素,K19,K14,P63,Nestin,CD34及PCNA,这些细胞形态相似体积较表皮基底层干细胞大,胞核为肾形,染色较深。结论中性蛋白水解酶消化合并改良过的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法能够高效地分离表皮中的干细胞。分离的细胞具有干细胞的特点,可以形成集落。此外,原代分离培养的表皮干细胞中仍然可见单个核样干细胞,这些细胞形态相似,类似血液系统来源的单核细胞,胞质内均匀分布着粗大的阳性颗粒。单个核样干细胞可能与皮肤的发牛、发育以及创伤修复有关。
- 孙晓艳付小兵孙同柱
- 关键词:表皮干细胞单克隆抗体免疫组织化学
- 卵圆细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞被引量:2
- 2008年
- 背景:原代分离的肝卵圆细胞具有双向分化的能力和横向分化的可塑性。目的:分离大鼠肝脏卵圆细胞,在化学诱导剂作用下使其定向分化为胰岛素分泌细胞。设计、时间及地点:对照观察细胞实验,于2007-05/2008-01在解放军总医院基础研究部,国家重点实验室完成。材料:SPF级SD大鼠,体质量(120±20)g。方法:采用改良梯度离心法分离、培养大鼠肝卵圆细胞,并行免疫组织化学鉴定。随后将卵圆细胞置于含有诱导剂Nicotimide和高浓度葡萄糖的RPMI1640培养液继续培养,同时以不含诱导剂的RPMI1640培养液培养的卵圆细胞作为阴性对照。主要观察指标:采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联免疫吸附实验、放射免疫分析检测两组卵圆细胞胰岛素的表达。结果:改良的梯度离心方法分离的细胞具干细胞特点,可形成集落,并且OV6、CD34、Nestin染色呈阳性。分离的大鼠肝卵圆细胞,加入诱导剂Nicotimide和高浓度葡萄糖诱导培养1周后,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联免疫吸附、RIA检测均显示胰岛素分泌量远高于不含诱导剂细胞(P<0.05)。结论:化学诱导剂Nicotimide和高浓度葡萄糖可以在短时期内作用肝卵圆细胞可启动胰十二指肠同源盒基因-l基因,使之定向分化为胰岛素分泌细胞。
- 缴富斌张波孙晓艳罗军季建华
- 关键词:肝脏干细胞卵圆细胞PDX-1梯度离心RIA
- 一种诱导成体表皮细胞去分化的非转基因方法
- 本发明涉及表皮干细胞研究领域。具体说来,本发明涉及一种在体外培养条件下,通过改变热刺激条件和采用生长因子干预技术,在非转基因条件下诱导成体表皮细胞去分化转变为表皮干细胞的方法。
- 付小兵孙同柱孙晓艳蔡飒
- 一种逆转间充质干细胞衰老的方法及应用
- 本发明提供了一种逆转间充质干细胞衰老的方法及应用,其中,所述方法包括:提供老化的间充质干细胞;提供包括TGF‑βRI激酶抑制剂II及丙戊酸的工作液;利用所述工作液对所述老化的间充质干细胞进行处理,获得年轻化的间充质干细胞...
- 黎彦孙晓艳冀帅飞吴旭
- 文献传递
- 表皮干细胞的研究进展被引量:13
- 2008年
- 表皮干细胞(epidermal stem cells)主要位于表皮基底层和毛囊外根鞘膨凸部(bugle)。表皮干细胞通过不对称分裂完成自我更新,同时形成一个新的子代细胞——短暂扩增细胞(transit amplifying cells,TA cells)。TA细胞继续分裂扩增、上移从而形成其他各细胞层如颗粒细胞层、棘细胞层等。随着时间的推移,颗粒层细胞、棘层细胞发育成熟行使组织功能,并逐渐老化失去细胞器,被细胞自身分泌的角质蛋白所替代,形成透明层或者角质层直至脱落。这个过程又可称为:生长期、衰退期和静止期。表皮就是遵循这个不断循环往复的生理过程,自我更新,自我修复。
- 孙晓艳付小兵
- 关键词:表皮干细胞自我更新毛囊外根鞘CELLS颗粒细胞
- 去分化来源表皮干细胞的分离与鉴定被引量:3
- 2009年
- 目的分离培养和鉴定去分化来源的表皮干细胞。方法采用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导表皮细胞去分化形成表皮干细胞,采用Ⅳ型胶原黏附法分离获得去分化来源的表皮干细胞。观察去分化来源表皮干细胞的形态及增殖特点,并通过免疫细胞化学、免疫荧光及流式细胞技术对其形态和表型进行鉴定。结果去分化来源的表皮干细胞能够表达表皮干细胞及其亚群特异性的表面标志蛋白,如β1整合素、CK19、CK14等,而CK10的表达为阴性。激光共聚焦检测显示α6整合素和CD71在去分化来源表皮干细胞及其亚群中的分布均存在着区域性差异。此外,流式细胞检测结果显示去分化来源的表皮干细胞中主要包含α6+CD71-和α6+CD71+的两种细胞群落,分别占被检测细胞总数的24.52%±7.88%及66.97%±5.04%。结论去分化来源的表皮干细胞与机体自身来源的表皮干细胞在形态和表型上具有相似性,可以作为表皮干细胞的替代细胞应用于皮肤重建与再生的相关研究。
- 孙晓艳卫勃付小兵刘惠玲
- 关键词:表皮干细胞免疫组织化学流式细胞术
- 高钙培养促进人表皮角质细胞间的黏附和聚集
- 2007年
- 目的观察细胞外钙浓度变化对表皮角质细胞黏附聚集的影响,并探讨其可能的调控机制。方法本实验分为两组:低钙培养组(60μmol/L);高钙(2 mmol/L)培养组。培养3d后,镜下观察细胞的黏附和聚集现象;然后利用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)的方法测定E-钙调素和P-钙调素mRNA的表达水平;最后借助免疫荧光法检测E-钙调素和P-钙调素蛋白在细胞内的表达和分布。结果高钙培养3d后细胞分层并出现明显的黏附和聚集,E-钙调素也在高钙培养的条件下表达明显增加(P<0.01),而P-钙调素的表达没有明显的变化。结论高钙培养促进人表皮角质细胞的黏附和聚集,E-钙调素的表达可能在其中发挥重要作用。
- 张翠萍付小兵李淑云孙同柱孙晓艳蔡飒
- 关键词:钙角质细胞钙调素
- 6-氨基己酸激活人表皮干细胞中Oct4基因的表达被引量:1
- 2011年
- 目的摸索并建立表皮干细胞Oct4基因的非转基因诱导方法。方法采用RT-PCR方法 ,检测经6-氨基己酸刺激48h后表皮干细胞Oct4基因的转录水平。结果 6-氨基己酸能有效激发表皮干细胞Oct4基因的转录。结论 RT-PCR方法检测表皮干细胞Oct4基因转录水平变化的准确度高、重复性好,实验步骤简单,是初步筛选诱导基因转录表达小分子化合物的实用方法 。
- 刘惠玲伍明俊陈美霞李美蓉伍志强赵亚力韩为东孙晓艳
- 关键词:6-氨基己酸表皮干细胞OCT4