张璇
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
- 供职机构：山西医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京医学奖励基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 构建能转染人骨髓间充质干细胞的Ad5 GM-CSF-IL-2腺病毒载体
- 2013年
- 背景:如何将树突状细胞和T细胞活化因子运送至肿瘤局部是有待解决的难题之一。利用人骨髓间充质干细胞具有肿瘤趋向性和低免疫原性的特性,将树突状细胞和T细胞活化因子导入骨髓间充质干细胞后运送至肿瘤局部表达可能是解决上述难题的方案之一。目的:构建共表达粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素2的5型腺病毒载体(Ad5GM-CSF-IL-2),感染人骨髓间充质干细胞,检测粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素2的表达水平和持续时间,为体内活化树突状细胞和T细胞提供实验依据。方法:提取人外周血单个核细胞总RNA,以此为模板用RT-PCR方法扩增粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素2基因cDNA,PCR扩增片段分别插入pcDNA3.1/Myc-His(-)B真核表达载体中,再利用脑心肌炎病毒内部核酸进入位点(IRES)序列,构建腺病毒载体穿梭质粒pDC515 GM-CSF-IRES-IL-2。采用AdMaxTMFLP重组腺病毒载体体系,将穿梭质粒pDC515 GM-CSF-IRES-IL-2与pBGHfrt△E1,3FLP骨架质粒共转染至293细胞,通过重组酶位点特异性重组获得Ad5GM-CSF-IL-2。Ad5GM-CSF-IL-2感染人骨髓间充质干细胞后经γ射线照射使其失去增殖能力,分别用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素2ELISA试剂盒在不同的时间点检测细胞上清中粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素2蛋白的水平。结果与结论:经测序证实,克隆获得的粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素2的cDNA序列分别与GenBank NM_000758(435bp)和GenBank NM_000586(462bp)提供的序列完全一致。用AdMaxTMFLP重组腺病毒载体可高效、快捷地获得所要包装的腺病毒载体,通过IRES连接粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素2两个基因,均获得高效表达。Ad5GM-CSF-IL-2感染人骨髓间充质干细胞后可连续7d高水平地分泌粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素2。
- 张玉萍张璇郭智谭晓华
- 关键词：干细胞粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子骨髓间充质干细胞腺病毒载体
- IL-18的研究进展被引量：7
- 2012年
- 白细胞介素18（interleukin-18,IL-18）首先作为INF-γ诱导因子,由于其在炎症和免疫应答中的重要作用而被发现[1]。IL-18是1995年Okamura等在脂多糖诱导的小鼠中毒性休克的肝脏中提取出[1],结构及胞内信号转导通路类似于IL-1家族,而功能类似于IL-12家族的1种蛋白分子。但是与IL-12相比,IL-18有更强的诱导生成INF-γ的能力。
- 张璇张玉萍郭智
- 关键词：白细胞介素-18生物学功能干扰素-Γ
- 甲苯磺酸瑞马唑仑在子宫病损电切术麻醉中的应用研究被引量：8
- 2022年
- 目的观察甲苯磺酸瑞马唑仑在宫腔镜下子宫病损电切术去阿片化麻醉中的应用。方法对拟行全麻下宫腔镜病损电切术的患者60例,按随机数字表法分为瑞马唑仑组(R组)和丙泊酚对照组(P组)。所有患者给予氟比洛芬酯50 mg作为镇痛预处理。R组静脉注射甲苯磺酸瑞马唑仑注射液5 mg,追加2.5 mg/次;P组静脉注射丙泊酚中/长链脂肪乳注射液1.5 mg·kg^(-1),每次追加0.5 mg·kg^(-1)。记录患者基本生命体征:包括入室后(T0),麻醉诱导后(T1),手术开始(T2),放置扩阴器(T3),手术结束时(T4),手术结束后1 min(T5)、3 min(T6)、5 min(T7)的HR、MAP、SpO_(2)、BIS值、MOAA/S评分;主要观察指标:累计使用药物剂量,术中体动发生次数;次要观察指标:诱导时间,术中知晓发生率,术中镇静深度,离室时间,自制满意度调查问卷,术前及术后1日焦虑评分,不良事件发生率。结果与T0相比,R组T2时HR、T1~T5时BIS,P组T2~T4时HR、T1~T5时MAP、T1~T5时BIS均显著下降(P<0.05);R组T1~T6时SpO_(2),P组T1~T5时SpO_(2)均显著上升(P<0.05)。与R组相比,P组T3~T5时MAP,T4时SpO_(2),T1~T7时BIS,累计追加次数≥6次,术中体动发生≥3次,诱导时间,BIS 50~60例数,T5~T7时MOAA/S评分,患者满意度3分均显著下降(P<0.05);P组离室时间、不良事件总发生率显著高于R组(P<0.05)。两组术前焦虑评分差异无统计学意义(P>0.05),术后焦虑评分均显著下降(P<0.05),组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在宫腔镜下子宫病损电切术的去阿片化麻醉方案中,与丙泊酚相比,甲苯磺酸瑞马唑仑可提供安全有效的镇静效果。瑞马唑仑剂量0.3 mg·kg^(-1)优于单次注射5 mg。
- 张璇李亭仪郭志佳王春燕
- 瑞马唑仑在子宫病损电切术麻醉中的应用研究
- 目的： 比较甲苯磺酸瑞马唑仑与丙泊酚在成年女性宫腔镜下子宫病损电切术中应用的有效性和安全性。 方法： 对拟行宫腔镜下子宫病损电切术的患者，选取其中60例，按随机数字表法分为R组（瑞马唑仑组）和P组（丙泊酚组），R组...
- 张璇
- 关键词：丙泊酚
- 共表达CD40L和IL-2的腺病毒对树突状细胞成熟和IL-12产生的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨共表达人CD40L和IL-2的5/F35嵌合型腺病毒载体(Ad5/F35 CD40L-IL-2),对人单核细胞来源的树突状细胞(Mo-DC)的感染效率及感染后对Mo-DC表型及IL-12产生的影响。方法提取人外周血单个核细胞(PBMCs)总RNA,应用RT-PCR方法克隆CD40L和IL-2,构建Ad5/F35 CD40L-IL-2腺病毒载体。分离和培养人Mo-DC后,应用流式细胞仪分析嵌合型腺病毒载体对Mo-DC的感染效率、CD40L基因表达及感染前后Mo-DC表型的变化;采用ELISA法测定Mo-DC培养上清中细胞因子IL-2和IL-12的含量。结果成功克隆CD40L和IL-2基因并构建成5/F35嵌合型腺病毒载体。Ad5/F35嵌合型腺病毒载体能高效感染Mo-DC,感染效率可达75%以上,Ad5/F35 CD40L-IL-2感染Mo-DC能有效地表达CD40L和分泌IL-2。感染前Mo-DC中CD80、CD86、CD40和HLA-DR呈一定水平表达,而CD83表达水平较低,感染24 h后,CD80、CD86、CD40和HLA-DR表达水平明显上调,特别是CD83。感染不同时间点测定Mo-DC上清IL-12水平,上清中IL-12水平升高呈时间依赖性。结论 Ad5/F35 CD40L-IL-2能高效感染人Mo-DC并表达相应的基因产物,促进Mo-DC成熟和刺激IL-12的分泌。
- 张璇张玉萍谭晓华
- 关键词：白细胞介素-12
