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加强管理会计环境研究建立有中国特色的管理会计: 2001年; 建设有中国特色的管理会计,还有一个很重要的工作要做,就是研究管理会计环境.会计发展史证明:环境因素是导致会计发展变革的根本动因.管理会计作为一门应用型学科,其原理和方法就必须随所处的环境变化而变化.影响管理会计的环境因素很复杂.其中较主要的因素有:经济环境因素、文化环境因素和管理环境因素.; 张琳李安琪

猪诺如病毒巢式RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：1: 2016年; 为了解中国猪群中猪诺如病毒感染情况,本研究根据猪诺如病毒保守的RNA依赖性RNA多聚酶(RNA Dependent RNA Polymerase,RDRP)基因序列设计了一套巢式RT-PCR引物,用该引物从猪粪便样品中扩增出与预期目的产物大小一致的条带,经克隆、测序后获得的序列与GenB ank数据库序列比对,证明所扩增的序列属于猪诺如病毒,表明本研究成功建立了猪诺如病毒巢式RT-PCR检测方法。该检测方法具有高特异性和敏感性,应用该方法检测某猪场健康育肥猪粪便样品,阳性率为54.5%。通过RDRP基因进行核苷酸同源比对发现本文获得的猪诺如病毒Wuning 1株属于GII群诺如病毒,与美国猪诺如病毒毒株OH-QW101/03/US、中国猪诺如病毒毒株Norovirus pig/GII/Ch6/China/2009核苷酸序列同源性最近。值得注意的是猪诺如病毒Wuning1毒株与武汉人诺如病毒毒株E2120/CHN/2010核苷酸同源性高达77.1%,说明猪诺如病毒Wuning 1毒株与武汉人诺如病毒基因组上亲缘性较近。本研究成功建立了一种检测猪诺如病毒的巢式RT-PCR方法,并应用于临床猪粪便样品的检测,为猪诺如病毒的诊断与监测提供了可供借鉴的方法、为猪诺如病毒的进化、分子病毒学及与人诺如病毒关系的深入研究提供依据。; 陈燕君唐玉新周信荣宋德平黄瑫彭棋李安琪张帆帆张田生叶昱吴琼; 关键词：巢式RT-PCR 同源性分析

新现猪Delta冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及其应用被引量：35: 2016年; 【目的】猪Delta冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus,PDCoV)是近年来新发现的可引起猪只,特别是新生仔猪腹泻的冠状病毒,其引发的腹泻具有较高的发病率和死亡率,是造成新生仔猪死亡的重要原因之一。试验拟建立新现PDCoV RT-PCR检测方法,并调查当前江西腹泻猪群中PDCoV的感染情况。【方法】通过对Gen Bank数据库中PDCoV全基因组序列的比对分析,找出保守序列,用Primer 3.0在线软件设计1对扩增PDCoV核衣壳(N)蛋白基因片段的特异性引物,基于该引物建立PDCoV RT-PCR检测方法;用建立的方法检测腹泻猪粪便及肠道样品,挑选阳性扩增产物进行克隆、测序;用本试验获得的PDCoV序列与其他国家或地区的PDCoV序列以及猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)共同构建进化树,分析PDCoV各毒株及其与PEDV和TGEV之间的进化关系;以PEDV、TGEV、猪库布病毒(PKoV)、猪星状病毒(PAstV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)及猪瘟病毒(CSFV)RNA为模板验证引物的特异性;构建PDCoV核衣壳蛋白基因片段重组质粒,并以系列稀释的重组质粒为模板确定所建立的PDCoV RT-PCR方法的敏感性;应用建立的RT-PCR方法调查249份2012—2015年江西省猪群腹泻样品中PDCoV的存在情况,随机抽取一定数量的RT-PCR阳性扩增产物进行克隆、测序进一步验证反应的特异性。【结果】1以腹泻猪粪便样品RNA为模板,应用所设计的特异性引物扩增出了329 bp的单一条带,与预期目的片段大小一致,扩增产物经克隆后测序,将获得的序列与NCBI Gen Bank数据库序列进行比对,比对结果表明试验所获得的序列与数据库中PDCoV序列的同源性高达99.1%,证明所扩增的序列属于PDCoV;2将8条本试验获得的PDCoV N基因片段序列与18株其他国家或地区的PDCoV毒株以及PEDV、TGEV的相应N基因片段序列构建进化树,结果表明26条PDCo V序列属于同一个分支,而PEDV和TGEV则分别属�; 张帆帆宋德平周信荣黄冬艳李安琪彭棋陈燕君吴琼何后军唐玉新; 关键词：RT-PCR 腹泻进化树

抗猪流行性腹泻病毒变异株卵黄抗体的制备、纯化及其活性影响因素的研究被引量：7: 2018年; 为制备抗猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)变异株卵黄抗体并探索卵黄抗体的纯化方法,本试验采用灭活的PEDV变异株CH/JX01全病毒免疫蛋鸡,收集免疫后所产的鸡蛋,分别用水稀释法、PEG-6000法和水稀释-硫酸铵二次沉淀法对鸡蛋中IgY进行提纯,然后运用间接ELISA和Western blotting方法鉴定和比较3种方法的提纯效果,获得可用于规模化生产的提纯方法;同时研究不同温度、pH条件下抗体活性,寻找对提纯IgY活性具有保护作用的物质。结果显示,本试验成功制备了抗PEDV变异株的卵黄抗体。浓度检测结果表明,水稀释法提取的IgY浓度最高,为6.204mg/mL;PEG-6000方法提纯的IgY浓度次之,为4.673mg/mL;水稀释-硫酸铵二次沉淀法IgY浓度最低,为3.359mg/mL。间接ELISA检测结果表明,水稀释-硫酸铵二次沉淀法提纯的IgY效价最高,为1∶12 800;其次是PEG-6000,为1∶6 400;而水稀释法最低,为1∶1 600。综合3种方法所提纯的卵黄抗体浓度与效价,发现水稀释-硫酸铵二次沉淀法的提纯效果优于其他两种方法。活性影响因素试验结果表明,提纯的IgY在37~60℃活性稳定;pH为4.0~11.0时具有良好的活性;在酸性条件下,20%硫糖铝对IgY活性具有较好的保护作用。本试验结果将为卵黄抗体的大规模生产运用与储存提供了有效的参考依据。; 雷丹李安琪罗素贤叶昱叶昱唐玉新; 关键词：卵黄抗体

以原核表达的猪δ冠状病毒N蛋白为包被抗原的间接ELISA方法的建立被引量：12: 2016年; 为建立检测血清中猪δ冠状病毒(PDCoV)抗体的间接ELISA方法,本研究根据PDCoV的N基因序列设计特异性引物,扩增出N蛋白全基因序列,将其克隆至低温表达载体p Cold I中并转入BL21,诱导表达获得大小约为41 ku的可溶性目的蛋白;western blot试验表明所表达的蛋白具有反应活性。以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,建立了PDCoV间接ELISA抗体检测方法。结果表明,本研究建立的ELISA方法阴阳性临界值为0.316,与猪流行性腹泻病毒等6种猪常见病原阳性血清均无交叉反应,具有良好的特异性。批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,重复性和稳定性均较好。应用建立的间接ELISA方法,对收集自江西各地区282份猪血清进行检测,阳性率为12.8%(36/282),表明PDCoV在我省猪群中普遍存在。本实验建立的PDCoV抗体捕获间接ELISA为临床上猪群PDCoV感染监测和流行病学调查提供了实验依据。; 张帆帆宋德平郭楠楠叶昱周信荣李安琪张敏彭棋陈燕君黄冬艳唐玉新; 关键词：N蛋白原核表达间接ELISA

猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定、毒力基因检测及药敏试验被引量：8: 2016年; 2015年3月,江西省上饶市万年县某规模化养猪场部分肥猪出现体温升高、呼吸困难、咳嗽等症状,部分发病猪出现死亡,病死率为35%,疑似猪传染性胸膜肺炎放线杆菌感染。用TSA及鲜血培养基进行了胸膜肺炎放线杆菌的分离和纯化,经培养特性、染色镜检、生化试验及16SrDNA PCR鉴定等证明了分离菌为生物Ⅰ型胸膜肺炎放线杆菌。毒力基因检测表明该菌具有ApxⅣ毒力基因。药敏试验结果显示,分离菌对头孢哌酮、诺氟沙星高度敏感,对青霉素G耐药。; 周信荣宋德平彭棋陈燕君李安琪张帆帆吴琼唐玉新; 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌药敏试验

猪肠病毒RT-PCR方法的建立和一株野猪肠病毒全基因组分析以及抗PEDV变异株卵黄抗体的制备: 猪肠病毒(Porcine enteroviruses,PEVs)现被分类为肠病毒G型(Porcine enteroviruses G,EV-G),属于小RNA病毒科(Picornaviridae)。猪是EV-G唯一的自然...; 李安琪; 文献传递

关于我国管理会计教材质量的调查分析被引量：6: 2003年; 通过对我国现行管理会计教材质量总体状况的调查分析,表明我国管理会计教材理论脱离实际,没有建立有中国特色的管理会计理论体系。研究认为,改变目前落后状况的关键在于加强我国管理会计典型案例的研究。; 张海涛张琳李安琪; 关键词：管理会计

七彩山鸡致病性阴沟肠杆菌的分离鉴定、毒力和遗传进化分析被引量：4: 2018年; 为了确诊一起大规模七彩山鸡发病、死亡的原因,试验采用细菌分离鉴定、序列分析、细菌生长曲线绘制、药敏试验和半数致死量测定等方法对致病原进行研究。结果表明：从发病鸡肺脏中分离出一株致病菌,PCR扩增该菌的16S r DNA序列,与GenBank中的序列进行BLAST分析,分离菌与阴沟肠杆菌的同源性〉99.9%,证实该分离菌为阴沟肠杆菌;细菌生长曲线的线性回归结果为y=81.677x-1.612 3;该分离菌对头孢噻肟、氧氟沙星等药物高度敏感,对阿莫西林、头孢拉定、青霉素等药物耐药;该分离菌对试验小鼠的半数致死量为3.85×10-9cfu/m L。; 李昊叶昱宋德平宋德平李安琪周信荣吴琼李安琪; 关键词：阴沟肠杆菌遗传进化分析药敏试验半数致死量

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李安琪

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