杜红梅 作品数:29 被引量:51 H指数:4 供职机构: 潍坊医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省自然科学基金 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞黏附分子和微管相关蛋白doublecortin的表达变化 被引量:2 2011年 目的:在环磷酰胺致大鼠神经管畸形(NTD)模型基础上,研究NCAM和DCX在大鼠胚胎神经上皮细胞中的表达变化,进一步探讨其致畸作用的分子机制,为预防人类神经管畸形的发生提供理论依据。方法:将孕鼠随机分实验组和对照组,应用免疫荧光技术检测NCAM和DCX在NTD发生中的表达变化。结果:给药后4、 8h,实验组NCAM和DCX阳性率与对照组相比,差异无统计学意义;给药后12、 24、 48h,实验组NCAM和DCX阳性细胞增多,NCAM和DCX阳性率与对照组相比,差异均有统计学意义。结论:环磷酰胺使NCAM、 DCX表达增加,干扰了神经元前体细胞向神经元方向的分化成熟。 陈燕春 管英俊 刘焕彩 赵春艳 杜红梅 高海玲关键词:环磷酰胺 神经管畸形 神经细胞黏附分子 DOUBLECORTIN 促红细胞生成素促进体外鼠胚脑皮质神经干细胞增殖 被引量:8 2010年 目的检测体外培养SD大鼠胚脑皮质神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖和分化的生物学特性,为NSCs研究提供适宜的细胞模型;探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对NSCs增殖的影响,为NSCs的相关研究提供实验依据。方法本研究对孕14d(E14)SD大鼠取鼠胚脑皮质悬浮培养、贴壁诱导分化。采用光电镜观察,以nestin免疫荧光染色鉴定NSCs,微管相关蛋白2(microtubule associated protein2,MAP2)和神经胶质原纤维酸性蛋白(glia fibrillary acid protein,GFAP)检测NSCs分化。取第三代(P3)NSCs向悬浮培养基中添加不同剂量的EPO,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测法检测NSCs的增殖情况。结果分离E14dSD大鼠胚脑皮质,在添加B27、bFGF、EGF的无血清培养基中培养,可形成大量悬浮的神经球并可进行体外扩增传代,神经球内的细胞均呈Nestin阳性、BrdU阳性。在添加10%胎牛血清的培养基中,神经干细胞可自然分化为神经元和神经胶质细胞。与对照组对比,加入≥5U/mlEPO后MTT检测NSCsOD值明显增高。结论 SD大鼠胚脑皮质体外培养可得到大量增殖的神经干细胞并能分化为神经元和神经胶质细胞,EPO可促进体外NSCs的增殖。 袁丽丽 马登殿 杜红梅 孔佑华 张慧 任妍 郭岩关键词:SD大鼠 皮质 神经干细胞 体外培养 促红细胞生成素 Notch 2在肌萎缩侧索硬化症SOD1^(G93A)转基因小鼠脊髓内的表达变化 2017年 目的明确肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)SOD1G93A转基因小鼠脊髓内Notch 2表达水平与ALS病程的关系。方法应用Notch基因阵列表达谱检测Notch信号通路相关分子在表达人突变SOD1基因的SOD1G93A转基因ALS小鼠及野生型鼠脊髓内的表达差异。应用real-time PCR、免疫组织化学染色、Western blot方法检测Notch 2在不同阶段各组小鼠脊髓内的表达变化。结果 Notch基因阵列表达谱聚类分析结果显示Notch 1、Notch 2在95d、122d SOD1G93A鼠脊髓内均显著增高,而Notch 4仅在122d SOD1G93A鼠升高明显。Notch下游靶基因HES1在108d SOD1G93A鼠脊髓内显著降低。RT-PCR结果证实Notch 2在SOD1G93A鼠脊髓内的表达变化。免疫组织化学标记显示Notch 2在SOD1G93A鼠、野生型鼠脊髓各部均有表达,Western blot结果显示Notch 2蛋白表达在95d SOD1G93A鼠增高显著。结论 Notch 2信号分子的表达随ALS疾病进展,在脊髓退变过程中变化显著,可能参与ALS疾病进程。 张皓云 薄其付 杜红梅 陈燕春 郑昕蕊 于丽 管英俊关键词:肌萎缩侧索硬化症 转基因小鼠 NOTCH信号通路 NOTCH2 脊髓 大鼠脊髓神经干细胞的鉴定及光镜和电镜观察 被引量:4 2009年 本研究应用无血清培养技术对分离的大鼠胚胎脊髓神经干细胞进行体外培养,在倒置显微镜和电镜下观察细胞形态,应用BrdU标记、免疫荧光染色检测细胞增殖、分化情况。免疫荧光显示nestin、MAP2、GFAP以及BrdU/nestin、BrdU/MAP2、Br-dU/GFAP均有阳性表达,说明从大鼠胚胎脊髓可成功分离出神经干细胞,它们分化后可以表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原。脊髓神经干细胞具有自我更新能力,能分化为神经元和星型胶质细胞。 杜红梅 管英俊 袁丽丽 张皓云关键词:神经干细胞 脊髓 细胞培养 Beclin1和LC3Ⅱ在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达变化 被引量:2 2015年 目的:检测自噬基因Beclin1和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型(LC3Ⅱ)在环磷酰胺致大鼠神经管畸形(NTD)神经上皮细胞中的表达变化,探讨自噬与NTD发生的关系,为防治NTD提供一条新的途径.方法:在已建立的环磷酰胺致大鼠NTD模型基础上,应用免疫荧光显色检测环磷酰胺致大鼠NTD神经上皮细胞中Beclin1和LC3Ⅱ表达变化.结果:与生理盐水对照组相比,环磷酰胺实验组神经管神经上皮细胞中Beclin1和LC3Ⅱ阳性细胞光密度值在处理后4h无明显改变;在处理后8、12、24 h升高,48 h降低,差异均有统计学意义.结论:环磷酰胺导致大鼠胚胎神经管神经上皮细胞中Beclin1和LC3Ⅱ表达异常,自噬改变可能是NTD发生的重要途径. 陈燕春 刘焕彩 周风华 赵春艳 杜红梅 丁昊宇 接琳琳关键词:环磷酰胺 神经管畸形 BECLIN1 大鼠脊髓发育过程中神经干细胞的分化 被引量:3 2008年 目的:研究正常大鼠脊髓发育过程中神经干细胞的分化规律。方法:应用免疫荧光染色技术,检测Nestin、NeuN、MAP2、GFAP、CNPase阳性细胞在大鼠胚胎期及生后脊髓内的分布及变化情况。结果:胚胎发育早期,脊髓中央管、灰质、白质均可检测到Nestin阳性细胞,生后Nestin阳性细胞数量逐渐减少。大鼠脊髓神经元的发生呈现明显的背腹模式,孕14d(E14)脊髓内可检测到NeuN阳性细胞,E16 NeuN阳性细胞逐渐增多,腹侧NeuN阳性细胞核体积较大,分布较稀疏,背侧神经元细胞核体积较小,分布较密集。MAP2染色结果与NeuN一致。胶质细胞的分化、成熟在生后初期进行,P4可检测到GFAP及CNPase阳性细胞,主要分布于脊髓白质内,P30在脊髓灰质内可检测到GFAP阳性细胞,细胞分支较多且短。结论:正常大鼠脊髓发育中神经干细胞的分化呈现一定规律性,向神经元方向化较早且呈明显的背腹模式,胶质细胞的分化较晚。 张皓云 管英俊 孙秀宁 王金平 袁丽丽 杜红梅关键词:神经干细胞 脊髓 分化 Notch1在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠动物模型和细胞模型中的表达变化 被引量:2 2017年 目的:观察Notch1在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠动物模型和细胞模型中的表达情况。方法:应用免疫荧光、免疫印迹、RT-PCR,检测Notch1在95、108、122 d ALS转基因鼠脊髓中的表达变化;检测转染pEGFP-wt-SOD1和pEGFPG93A-SOD1的NSC34细胞模型中Notch1的表达变化。结果:Notch1可与β-tubulinⅢ共表达,与GFAP无明显共表达。较同窝野生型鼠,Notch1于蛋白水平和mRNA水平上的表达在95 d ALS转基因鼠脊髓中无明显变化,在108 d和122 d ALS转基因鼠脊髓中明显升高;与转染pEGFP-wt-SOD的NSC34细胞相比,转染pEGFP-G93A-SOD1的NSC34细胞中Notch1蛋白和mRNA表达增多。结论:Notch1在ALS转基因鼠动物模型和细胞模型中表达增多,提示Notch1信号通路可能与ALS相关。 杜红梅 管英俊 于丽 陈燕春 周风华 张皓云 接琳琳 刘永新关键词:肌萎缩侧索硬化症 转基因鼠 NOTCH1 同等学力申请临床医学硕士专业学位人员培养的实践探讨 被引量:3 2010年 同等学力申请临床医学硕士专业学位工作的开展,对提高医师的临床能力具有重要意义。文章结合我院同等学力申请临床医学硕士专业学位人员培养工作,就课程设置、实践要求、科研能力培养、临床能力培养与考核、学位论文要求等问题进行了探讨。 鞠学红 管英俊 张金宝 孙嘉斌 朱红 王雪净 杜红梅关键词:同等学力 专业学位 硕士 维甲酸、音猬因子对大鼠脊髓神经干细胞向运动神经元样细胞分化的影响 被引量:2 2010年 目的:分离大鼠胚胎的脊髓神经干细胞进行体外培养,探讨维甲酸(RA)、音猬因子(Shh)诱导其向运动神经元样细胞分化。方法:应用无血清培养技术分离培养脊髓神经干细胞,通过5-溴-2-脱氧尿苷标记、免疫荧光显色检测细胞增殖、分化情况;培养液分组添加Shh、RA或shh+RA,观察神经干细胞向运动神经元样细胞的分化情况。结果:大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞,分化后可表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原;诱导分化后结果显示Shh组未检测到胆碱乙酰转移酶阳性细胞,RA组为20.63%,shh+RA组为66.84%,其差异具统计学意义。结论:从大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞,Shh、RA可不同程度地诱导脊髓神经干细胞分化为运动神经元样细胞。 杜红梅 管英俊 袁丽丽 张皓云关键词:神经干细胞 脊髓 运动神经元 神经干细胞定向诱导分化的研究进展 被引量:3 2006年 杜红梅 管英俊 袁丽丽关键词:定向诱导分化 神经干细胞 中枢神经系统疾病 多向分化潜能 神经胶质细胞 干细胞治疗