江志刚
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：湖南师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 斑马鱼CFL基因的克隆、多克隆抗体的制备及分析
- 2013年
- 在心脏发育过程中,相关基因的正常表达是有功能心脏形成的关键.斑马鱼CFL基因是从斑马鱼胚胎的cDNA文库中克隆出来的一个心脏发育候选基因.生物信息学分析表明:CFL基因编码278个氨基酸,含有一个CXXC结构域.为进一步研究该基因的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了该基因.将所得片段插入原核表达载体pET-28a载体中,经测序鉴定正确后转化入Rosetta菌株中,用IPTG诱导表达出pET-28a-CFL融合蛋白,表达的融合蛋白占菌体总蛋白的71%,融合蛋白相对分子质量约为30 kD.经包涵体纯化后,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体.经验证,具有较好的特异性和较高的效价,可以用作western-blot免疫印迹等实验分析.
- 王盼盼彭夕洋易珍江志刚邓云吴秀山万永奇
- 关键词：融合蛋白多克隆抗体
- 果蝇血液标记基因srp原核表达质粒构建及多克隆抗体制备被引量：2
- 2011年
- 果蝇基因srp是血液发育的早期标记基因,为了研究果蝇这一模式动物中血液发育的详尽过程,通过提取野生型成体果蝇的总RNA,反转录获得其cDNA文库,设计引物克隆出srp基因,将所得片段插入原核表达载体pET28a中,经酶切和序列鉴定,成功构建重组质粒,并通过IPTG诱导表达出His-srp融合蛋白,经Ni-IDA凝胶柱纯化后,免疫新西兰大白兔制备srp多克隆抗体,为血液发育研究奠定了基础.
- 鲁建鑫雷孝锋李帆江志刚吴秀山万永奇
- 关键词：果蝇SRP原核表达多克隆抗体
- FHL2基因异位表达对肺癌细胞的影响被引量：1
- 2019年
- 依据细胞的全能性,心肌细胞中的高表达基因可能对细胞增殖具有一定的抑制作用。FHL2作为心脏高表达的基因,为证实其对癌细胞增殖具有一定的抑制作用,通过COSMIC网站对FHL2基因进行生物信息学、统计学分析,发现其与肺癌的发生有一定的相关性;采用流式细胞术检测过表达FHL2基因的A549细胞的表型,并进一步通过蛋白免疫印迹检测相关的周期蛋白调控因子,结果表明,在A549细胞中过表达FHL2基因会使细胞周期阻滞,伴随着G1/S检验点的相关蛋白因子的表达变化。因此,心脏高表达基因FHL2可能是通过调节细胞周期蛋白阻碍A549细胞的增殖,从而达到对肺癌的发生发展的阻碍作用。
- 刘志强朱双丽花瑞江志刚林礼梁积峰陈宇温瑶王跃群刘作良吴秀山范雄伟
- 关键词：生物信息学细胞周期流式细胞术蛋白免疫印迹
