王玮
- 作品数：24 被引量：49H指数：4
- 供职机构：武警后勤学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市科技攻关项目天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人Tumstatin功能区基因原核表达载体的构建
- 2008年
- 【目的】构建人肿瘤抑素(Tumstatin)功能区Tum-5原核融合表达载体pET42a-Tum5。【方法】根据人Tumstatin基因序列以及大肠杆菌密码子的偏爱性设计合成多个寡核苷酸,经PCR拼接获得Tum-5基因;酶切目的基因与pET42a载体,回收纯化后做定向克隆连接,转化E.coliDH5α;重组质粒通过PCR、BglⅡ与XhoⅠ的双酶切、DNA测序加以鉴定。【结果】重组质粒PCR扩增出的产物与目的基因大小相同;重组质粒双酶切电泳分析,插入片段大小约320 bp,与预期结果一致;对连接点两端进行测序,结果显示接头两端序列连接正确,插入序列与载体读码框架相匹配。【结论】成功构建人Tum-5基因表达载体,该研究为抗血管药物治疗实体瘤奠定了基础。
- 王瑞珉王玮史娜谢红陈立军
- 关键词：肿瘤抑素融合表达载体抗血管生成
- 人源肝癌细胞系中甲胎蛋白基因表达及甲基化的研究被引量：2
- 2009年
- 目的:了解不同人源肝癌细胞系甲胎蛋白(AFP)基因表达及不同区域甲基化状态,探讨肝癌发生的表达遗传学调控机制。方法:采用亚硫酸氢盐-基因组测序(bisulfite-assisted genomic sequencing,BAGS)技术,检测人源HepG2、SMMC-7721肝癌细胞系和人成纤维细胞中AFP基因启动子区及CpG岛区的甲基化水平,RT-PCR检测基因的表达,并分析相关性。结果:HepG2细胞高表达AFP,SMMC-7721细胞低表达AFP,成纤维细胞不表达AFP;在启动子区,HepG2细胞的非甲基化修饰位点发生率较高,尤其是第一个和第二个CG位点,SMMC-7721细胞的甲基化程度较之高,而成纤维细胞甲基化程度整体很高;在CpG岛区,成纤维细胞的非甲基化修饰位点发生率较高,主要是第6个和第7个CG位点,SMMC-7721、HepG2细胞的甲基化程度较之高。结论:AFP基因启动子甲基化程度与基因表达水平存在负相关,AFP基因CpG岛甲基化程度与基因是否表达有关,AFP基因启动子低甲基化可能是AFP高表达的分子机制。
- 王玮陈立军初殿伟呼文亮
- 关键词：甲胎蛋白类基因表达调节CPG岛HEPG2细胞SMMC-7721细胞
- 芸香苷诱导K562细胞凋亡机制被引量：9
- 2006年
- 目的研究芸香苷诱导白血病K 562细胞凋亡过程中caspase-3基因及细胞色素C的表达。方法体外培养白血病K 562细胞,M TT法观察细胞毒作用,测定IC50,Hoechst 33342/P I双荧光染色后,荧光显微镜下观察细胞核形态,流式细胞仪检测细胞周期,TR IZOL试剂提取K 562细胞RNA,核酸定量仪检测纯度,RT-PCR扩增,紫外透射检测扩增产物,扩增产物测序,观察caspase-3的表达,4×1-0 5m o l/L药物处理细胞后,分离细胞线粒体和胞浆,经SDS-PAGE电泳分离蛋白,W estern b lotting检测线粒体、细胞浆细胞色素C表达。结果芸香苷浓度为2×1-0 5、4×10-5、8×10-5m o l/L时,细胞生长受到显著抑制,并呈剂量依赖性;不同浓度芸香苷处理K 562细胞44h后,应用M TT比色法计算IC50为4×1-0 5m o l/L;4×10-5m o l/L芸香苷处理细胞24 h后,Hoechest 33342/P I双荧光染色可观察到明显核固缩、凝集等细胞凋亡表现;流式细胞仪检测芸香苷处理后G2期细胞显著增多(64.7%),DNA合成受抑,凋亡率增加;PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳,紫外透射仪下明显观察到500 bp条带,产物经过序列测定证实芸香苷处理细胞诱导caspase-3基因的表达;W estern B lotting检测线粒体细胞色素C表达水平下调,细胞浆出现明显细胞色素C蛋白条带。结论芸香苷诱导K 562细胞caspase-3基因表达,细胞色素C通过线粒体膜进入胞浆,导致细胞线粒体功能异常,细胞发生凋亡,线粒体途径诱导白血病细胞凋亡是其作用机制之一。
- 陈立军靳秋月王瑞珉王玮呼文亮陈虹
- 关键词：芸香苷CASPASE-3细胞凋亡细胞色素C
- 骨髓间充质干细胞在骨软骨缺损修复中的研究现状被引量：4
- 2008年
- 初殿伟王玮王文良
- 关键词：骨髓间充质干细胞骨软骨缺损
- 足背三叶草状皮瓣吻合移植修复相邻指皮肤缺损的疗效
- 2017年
- 目的探讨足背三叶草状皮瓣修复相邻指皮肤缺损的临床效果。方法对15例相邻指皮肤缺损患者应用足背三叶草状皮瓣修复治疗。结果患者均获得随访,时间6~12个月。13例皮肤缺损修复后愈合良好;2例皮瓣边缘部分坏死,经生肌膏换药3周后皮缘愈合。结论足背三叶草状皮瓣修复相邻指皮肤缺损具有较好的效果。
- 初殿伟王玮王海涛杨术旺
- 关键词：手损伤皮肤缺损
- 应用特异性靶蛋白检测姜黄素对前列腺癌细胞抑制作用的方法
- 本发明是一种应用特异性靶蛋白检测姜黄素对前列腺癌细胞抑制作用的方法，属于分子生物学领域，本方法利用特异性靶蛋白AR、通过癌细胞生长情况和凋亡率检测姜黄素对前列腺癌细胞抑制作用，其检测结果证明是准确的，同时，也能证明免疫印...
- 杨磊呼文亮陈立军王洪敏牟心红靳秋月姚丽锁江蕊谢红王瑞岷王玮程世翔樊嵘
- 文献传递
- 槲皮素对K562细胞DNA损伤的初步研究
- 本文研究了槲皮素对K562细胞DNA损伤的作用。结果表明，槲皮素是具有广泛生物学活性的物质，既可抑制脂质过氧化、抑制血小板聚集、抑制环氧化酶等，又能够抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡，对多种细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用。
- 谢红王玮靳秋月陈立军
- 关键词：细胞损伤肿瘤预防槲皮素中药药理
- 文献传递
- DNA甲基化与肿瘤的关系被引量：3
- 2008年
- 俞媛陈立军王玮呼文亮
- 关键词：DNA甲基化肿瘤CPG岛
- 手术治疗59例三踝骨折疗效分析被引量：1
- 2011年
- 踝关节是人体负重量最大的屈戌关节，其活动灵活、解剖结构复杂。它由多个骨骼、关节、韧带组成，发生骨折多属于关节内骨折，并伴有脱位、韧带损伤。三踝骨折（Cotton骨折）是踝部骨折的严重型，由内踝、外踝、后踝（胫骨后唇）骨折组成，同时伴有韧带和关节的破坏，手法复位很难恢复解剖结构，同时断裂韧带需手术修复，体现了手术治疗三踝骨折的重要性。
- 杨术旺初殿伟王玮
- 关键词：三踝骨折COTTON骨折内固定
- 创伤性脑损伤的动物模型被引量：5
- 2008年
- 初殿伟王玮杨术旺
- 关键词：脑损伤动物创伤
