罗勇
- 作品数：14 被引量：52H指数：4
- 供职机构：华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 应用巢氏PCR方法快速检测猪鼻拭子样品中产毒素多杀性巴氏杆菌被引量：7
- 2007年
- 根据产毒素多杀性巴氏杆菌的toxA基因序列,设计了2对特异性引物,扩增的片段大小分别为864和447 bp,从而建立了一种能直接从猪鼻拭子中快速检测产毒素多杀性巴氏杆菌的巢氏PCR方法。该方法能检出26CFU菌量以上的模板DNA,且不能从猪的其它7种常见病原菌扩增到特异性条带。通过对5个不同地区阳性猪群中采集的146份临床鼻拭子样品进行巢氏PCR检测和细菌分离鉴定,结果2种方法同时为阳性的样品有44份,同时为阴性的样品有97份,另有5份样品只有巢氏PCR检测为阳性,巢氏PCR检测与细菌分离鉴定的符合率为96.58%。试验表明:巢氏PCR方法能快速、灵敏地从猪鼻拭子样品中检出产毒素多杀性巴氏杆菌,适合临床进行大规模病原学检测,具有良好的应用前景。
- 汤细彪吴斌刘国平杨明柳罗勇卢顺陈焕春
- 关键词：产毒素多杀性巴氏杆菌
- 一种检测猪产毒多杀性巴氏杆菌毒素抗体的ELISA试剂盒及应用
- 本发明属于动物细菌学与动物传染病学检测技术领域，具体涉及一种检测猪产毒多杀性巴氏杆菌毒素抗体的ELISA试剂盒及其在防治猪进行性萎缩性鼻炎(progressive atrophic rhinitis，PAR)中的应用。该...
- 吴斌汤细彪王大鹏罗勇卢顺陈焕春
- 文献传递
- Asia Ⅰ口蹄疫vp2蛋白单克隆抗体的制备及单抗竞争ELISA方法的建立被引量：6
- 2008年
- 制备AsiaI口蹄疫病毒vp2单克隆抗体(mAb)并建立了单抗竞争ELISA方法。用纯化的AsiaI型口蹄疫病毒vp2重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合,采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞。分别用ELISA、Western blotting检测mAb腹水的效价及其特异性。筛选到杂交瘤细胞2株,腹水效价均在100×29以上;以纯化后的AsiaI型口蹄疫病毒vp2重组蛋白作为抗原,利用AsiaI型口蹄疫病毒vp2单抗酶标物建立了竞争ELISA方法用来检测AsiaI型口蹄疫抗体。临床应用表明,该方法与UBI公司的口蹄疫全病毒抗体检测试剂盒总符合率达89.0%,和荷兰赛迪公司的口蹄疫病毒LPB-ELISA抗体检测试剂盒总符合率达86.5%。
- 向敏张克山卢顺蔡利军罗勇张建民何华王勤刚吴斌
- 关键词：口蹄疫单抗竞争ELISA单克隆抗体VP2蛋白
- 规模化猪场猪瘟免疫状况调查及仔猪首免日龄的优化被引量：20
- 2010年
- 为了调查规模化猪场猪瘟的免疫方案,比较及评价其免疫效果,本研究将湖北省7个规模化种猪场作为研究对象,将猪群分为经产母猪、种公猪、后备母猪、哺乳仔猪（0-30日龄）、保育仔猪（30-60日龄）和生长猪（61日龄以上）6个群体,并按各猪群5%-8%的比例采血,检测猪瘟抗体。结果表明,各猪群猪瘟免疫合格率分别为99.55%、96.43%、99.22%、89.88%、81.68%及78.64%,不同免疫方案下,各场猪群表现出不同免疫效果。而从总体上看,保育仔猪的猪瘟抗体水平是各个猪群中最为薄弱的环节。因此本研究在调查的基础上,继续探索了一个规模化猪场的仔猪猪瘟母源抗体消退规律,并且分别设置了14、21、28、35日龄猪瘟疫苗免疫组,于免疫后1周及2周后采血检测猪瘟抗体。结果表明,该场猪瘟免疫最佳首免日龄为28日龄,并根据研究结果将该场原来的首免21日龄调整到28日龄。本研究的开展对规模化猪场制定合理的猪瘟免疫方案具有较好的参考价值。
- 罗勇吴斌黎作华黄刚梅力李腾满晓营何启盖
- 关键词：规模化猪场猪瘟首免日龄
- 规模化猪场猪伪狂犬病野毒感染状况调查及仔猪首免日龄的优化
- 为了调查规模化猪场猪伪狂犬病野毒感染情况，本研究将湖北省7个规模化种猪场作为研究对象，详细了解各场的免疫方案，并将猪群分为经产母猪、种公猪、后备母猪、哺乳仔猪(0-30日龄)、保育仔猪(31-60日龄)、生长猪(61日龄...
- 罗勇吴斌黄刚李腾梅力
- 关键词：伪狂犬病家畜免疫
- 文献传递
- 规模化猪场种猪群猪瘟和猪伪狂犬病净化技术研究总结报告
- 猪瘟和猪伪狂犬病是猪的两种重要病毒性传染病，是影响生猪生产最为严重的两大猪传染性疾病。本研究通过猪瘟及猪伪狂犬病检测方法研制与应用、疫苗免疫程序研究、部分猪场种猪群带毒猪的检出与剔除等，使实施的规模化猪场的猪瘟及猪伪狂犬...
- 李宗华吴斌罗勇方奎刘爱梅袁丹成何启盖陈焕春
- 关键词：猪瘟猪伪狂犬病净化技术
- 文献传递
- 猪瘟病毒套式RT-PCR检测方法的建立和种猪场猪瘟免疫与净化研究
- 猪瘟/(classical swine fever;CSF/)是由猪瘟病毒/(classical swine fever virus;CSFV/)引起的猪的一种高度接触性传染病,死亡率非常高。目前,繁殖母猪往往呈现猪瘟病...
- 罗勇
- 关键词：猪瘟套式RT-PCR仔猪免疫
- 文献传递
- 猪支气管败血波氏杆菌菌毛fimD基因的克隆表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2009年
- 参照GenBank上支气管败血波氏杆菌的菌毛fimD基因序列(X75811),设计1对引物,从本实验室分离鉴定的猪源支气管败血波氏杆菌中扩增出fimD编码区1 098 bp的片段,将其克隆至原核表达载体pET-28a,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行融合表达。SDS-PAGE和Western blot检测证实该表达产物以包涵体形式存在,大小约42 ku,与用支气管败血波氏杆菌菌体制备的阳性血清能发生特异性反应。将包涵体变性和复性后包被酶标板建立间接ELISA(fimD-ELISA),特异性良好。用fimD-ELISA检测临床送检的668份血清,阳性率为30.7%。用该法与微量凝集试验平行检测102份血清,fimD-ELISA的敏感性高于微量凝集试验。
- 何华裴洁吴斌赵战勤张建民罗勇向敏卢顺
- 关键词：支气管败血波氏杆菌克隆ELISA
- 猪源肠出血性大肠杆菌的分离、鉴定及特性研究被引量：8
- 2009年
- 目的探讨猪源肠出血性大肠埃希菌病原学特征。方法对所分离的菌株进行生化鉴定、药敏试验,并使用聚合酶链反应(PCR)技术检测毒力基因、耐药基因,同时对致病性的菌株进行外膜蛋白分型、REP-PCR和ERIC-PCR分析。结果从315株大肠杆菌中筛选到山梨醇阴性的EHEC21株,其中含有stx1基因的菌株有4株,含有stx2基因3株,含有eae基因的17株,外膜蛋白分型属于三个型,其中OMP-1型最多,有15株,OMP-2型3株,OMP-3型3株,REP-PCR和ERIC-PCR结果显示这些致病性菌株带型差异性较大,分属于不同的亚群。结论华中地区是养殖业比较发达的地区,而且人均消费猪肉比例也较高,EHEC的存在对人是一种潜在的威胁,应加强监测力度,防止该菌在人群中感染和流行。
- 满晓营吴斌张璇余腾罗勇刘峰金梅林陈焕春
- 关键词：肠出血性大肠杆菌
- 表达SLTEC保护性抗原的重组猪霍乱沙门氏菌C500株的构建及生物学特性被引量：3
- 2009年
- 【目的】利用平衡致死系统构建表达产类志贺氏毒素大肠杆菌(Shiga-liketoxin Escherichia coli,SLTEC)保护性抗原的减毒猪霍乱沙门氏菌。【方法】构建表达SLT-IIeB-FedF的重组质粒,再将其电转入终宿主菌减毒猪霍乱沙门氏菌ΔasdC500株中构建成口服活疫苗株,经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测SLT-IIeB-FedF融合蛋白的表达情况,并观察重组菌体外培养的稳定性。【结果】利用宿主-载体平衡致死系统构建了表达SLTEC保护性抗原的重组减毒猪霍乱沙门氏菌,经SDS-PAGE电泳出现了1条蛋白质量约为37kDa的蛋白条带。且在没有选择压力的条件下体外能稳定地繁殖、生长和传代。【结论】成功构建表达SLTEC保护性抗原的重组减毒猪霍乱沙门氏菌,为发展猪水肿病-副伤寒的口服疫苗奠定了初步基础。
- 满晓营吴斌罗勇余腾赵战勤徐引弟郭爱珍陈焕春
- 关键词：TOXINESCHERICHIA
