罗园媛
- 作品数：15 被引量：19H指数：2
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- 转染Akt1基因对缺血再灌注大鼠心肌线粒体通透性转换的影响被引量：11
- 2010年
- 目的:研究Akt1基因对缺血再灌注(I/R)损伤心肌细胞的保护作用,并探讨Akt1基因对心肌I/R损伤时线粒体通透性转换(MPT)功能的影响。方法:使用结扎/松解左冠状动脉前降支法,结扎冠状动脉前降支30min,再灌注120min,建立大鼠在体心肌I/R损伤模型。40只雄性SD大鼠随机分为5组,每组8只:假手术对照组(control组)、心肌缺血/再灌注组(I/R组)、转Akt1基因+I/R组(Ad-gene组)、空载体+I/R组(Ad-blank组)、转Akt1基因+I/R+Akt抑制剂组(Ad-inhibitor组)。Ad-gene组术前48h开胸心肌内直接分点注射脂质体Akt1质粒复合物,control组和I/R组分别注射同等体积磷酸盐缓冲液(PBS),Ad-blank组注射等体积脂质体,Ad-inhibitor组注射等体积脂质体Akt1质粒LY294002混合物。观察转染Akt1基因对大鼠I/R心脏乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)释放、心肌细胞凋亡、Akt1表达、线粒体和胞浆内细胞色素C(Cyc-C)表达以及MPT的影响。结果:Control组可见Akt1表达,但明显低于其余各组;与control组相比较,其余各组心肌细胞凋亡指数(AI)、LDH和CK均增高;与control组相比较,其余各组Cyc-C较胞浆表达增加而线粒体内表达减少。Ad-gene组Akt1蛋白表达较control组、I/R组、Ad-blank组及Ad-inhibitor组均增加;Ad-gene组AI、LDH和CK较I/R组、Ad-blank组及Ad-inhibitor组均显著减少,但仍高于control组;Ad-gene组Cyc-C较I/R组、Ad-blank组以及Ad-inhibitor组胞浆内表达减少而线粒体内表达增加;Ad-gene组较IR组、Ad-blank组和Ad-inhibitor组在540nm处吸光度值增高,但明显低于control组。I/R组、Ad-blank组以及Ad-inhibitor组Akt1、Cyc-C、AI、LDH和CK以及在540nm处吸光度值比较均无显著差异。结论:转染Akt1基因对I/R损伤心肌细胞具有保护作用,该作用可能与Akt1抑制I/R诱导的心肌线粒体膜通透性转换,从而保护线粒体的功能有关。
- 王静王静李东野夏勇罗园媛陈丹潘德锋朱红张卓琦
- 关键词：AKT1再灌注损伤线粒体通透性转换
- 超声微泡破裂法转染Akt基因对心肌细胞缺血保护作用研究
- 蒋学友李东野夏勇罗园媛陈丹潘德锋朱红徐通达张延斌
- 红色荧光蛋白标记蛋白激酶B的慢病毒构建和表达被引量：1
- 2011年
- 目的构建、包装并鉴定携带红色荧光蛋白（DsRed）标记的蛋白激酶B（aktl）的慢病毒。方法通过逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）扩增1488kbmouseaktl基因片段，通过TA克隆将akt1接入T载体，然后和IRES—dsred、pXZ208连接。酶切、测序鉴定正确的重组体（pXZ208-aktl—IRES—dsred）。三质粒系统经磷酸钙法包装病毒，荧光显微镜和流式细胞仪（FACS）检测病毒滴度。Westernblot比较病毒感染组与未感染组AKTl蛋白表达。pXZ208-akt1—IRES—dsred慢病毒和绿色荧光蛋白标记（GFP）的慢病毒共感染真核细胞，荧光显微镜观察两者的表达。结果经鉴定转移质粒构建正确，荧光显微镜观察293FT表达DsRed，FACS测得病毒滴度为（1．245±0．250）×10^7／ml。Westernblot证实病毒感染组与末感染组比较AKT1蛋白表达增高（P〈0．05）。与GFP标记的慢病毒共感染真核细胞，荧光显微镜观察到共同表达DsRed和GFP。结论DsRed标记akt1慢病毒构建和表达成功。DsRed和GFP标记慢病毒共感染真核细胞可观察到表达两种荧光蛋白。
- 罗园媛李慧娟李东野陈丹陶涛朱红徐通达夏勇
- 关键词：慢病毒蛋白激酶B红色荧光蛋白
- 30例心尖肥厚型心肌病心电图特征分析被引量：3
- 2012年
- 目的探讨心尖肥厚型心肌病(AHCM)的心电图(ECG)特征。方法分析30例AHCM患者和30例正常人的ECG资料,比较T波、ST段及R波的变化。结果 30例患者均合并ECG异常改变(100%),胸导联V3、V4、V5巨大倒置T波最明显,大多伴有ST段下移和胸导联QRS波群高电压。ST段下移程度与倒置T波深度呈正相关(r=0.40,P<0.05)。结论胸导联R波振幅增高合并巨大倒置T波是AHCM的特征性ECG变化。
- 李影张延斌罗园媛徐通达朱红李文华李东野
- 关键词：心尖肥厚型心肌病心电图
- GFP、Ds-red蛋白标记AKT1的慢病毒载体构建和表达
- 罗园媛李慧娟夏勇潘德锋朱红张卓琦徐通达李东野
- Akt1基因重组慢病毒载体感染体外培养大鼠乳鼠心肌细胞的研究
- 目前，缺血性心脏病的临床治疗主要包括药物治疗、介入治疗和外科手术治疗。但是，药物治疗有一定的局限性，血管再通治疗术后易发生再狭窄，且缺乏理想的解决办法。研究已发现梗死后凋亡心肌细胞主要分布在心肌梗死区边缘，对心肌细胞凋亡...
- 李东野罗园媛夏勇张卓琦朱红潘德峰杨煜徐通达
- 关键词：重组慢病毒载体体外培养心肌细胞
- 文献传递
- 转染Akt1基因对大鼠缺血再灌注心肌线粒体通透性转换的影响
- 李东野王静夏勇罗园媛陈丹潘德锋朱红张卓琦徐通达
- 携带人pax2、sfrp2干扰序列的慢病毒载体构建及体外表达
- 吴培李东野夏勇罗园媛陈丹潘德锋朱红徐通达
- 心肌细胞缺氧复氧损伤后收缩功能及钙瞬变检测
- 2015年
- 目的：建立成年SD大鼠心室肌细胞缺氧复氧（A／R）损伤模型，阐述细胞收缩及离子浓度同步测量系统在 A／R 损伤模型中检测心肌细胞收缩功能及钙瞬变的方法应用。方法通过 Langendorff 灌流、酶解法获取成年 SD 大鼠左心室心肌细胞，经缺氧3 h、复氧2h 建立 A／R 损伤模型；应用细胞收缩及离子浓度同步测量系统检测 A／R 损伤模型中单个心肌细胞的收缩功能及 Ca^2＋的变化情况，并与正常心肌细胞进行比较。结果心肌细胞经历 A／R 损伤后，单个心肌细胞的收缩幅度明显降低，舒张时间（R90）明显延长（P ＜0．01）；细胞内 Ca^2＋变化幅度明显减弱，舒张期细胞内钙消除常数（Tau）明显延长（P ＜0．01）。结论心肌细胞经历 A／R 损伤后与正常心肌细胞比较，收缩能力明显下降、Ca^2＋变化幅度显著减弱。本实验为探讨心脏缺血再灌注（I／R）损伤的发生机制、细胞收缩及离子浓度同步测量系统对其检测的应用提供了实验依据。
- 刘洋沈梦晓徐通达潘德锋吴培罗园媛赵益李东野
- 关键词：成年大鼠心肌细胞缺氧复氧缺血再灌注
- 携带Akt1基因慢病毒载体构建及在人骨髓间充质干细胞中的表达
- 对于缺血性心脏病的治疗，目前药物和介入治疗主要通过缩小缺血范围，恢复缺血区存活心肌的血液供应，延缓左心室重构以改善患者预后，但都不能修复已坏死的心肌组织，目前骨髓干细胞心肌内移植技术结合基因治疗为修补受损区域心肌提供了一...
- 李东野罗园媛夏勇张卓琦朱红潘德峰杨煜徐通达
- 关键词：缺血性心脏病骨髓间充质干细胞细胞心肌成形术
- 文献传递
