翁艳洁
- 作品数：7 被引量：19H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 多位点短发卡状RNA提高对靶基因干扰效率的研究
- 翁艳洁
- 关键词：RNA干扰外源基因DSRED短发卡状RNA干扰素应答
- 三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用被引量：6
- 2008年
- 背景与目的:shRNA技术是近来发展的热点技术之一,但普遍采用的单位点shRNA干扰载体效果并不理想。本研究探讨三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用。方法:构建外源基因DsRed全长载体转染HEK293细胞。针对报告基因DsRed设计4个干扰载体,一个含有3段shRNA,另外3个分别含有此3段中1段shRNA。转染293/DsRed,荧光显微镜观察基因DsRed。应用实时定量PCR(Real-timePCR)和流式细胞仪(FACS)检测4个载体对DsRed基因在mRNA及蛋白水平干扰效应。结果:4个载体对靶基因DsRed在mRNA及蛋白水平均有干扰效应,且含有3段shRNA载体对DsRed基因干扰效率为(89±16)%,显著高于3个只含有1段shRNA载体[(50±23)%,(52±15)%,(55±27)%],差异有显著性(P<0.05)。结论:三位点shRNA干扰载体可以提高对靶基因的干扰效率。
- 翁艳洁翁丹卉夏曦宋晓红卢运萍王世宣马丁王常玉
- 关键词：RNA干扰外源基因DSRED短发卡状RNA
- 卵巢癌肿瘤起始细胞分离、鉴定及其与化疗耐药相关性的研究
- 研究背景:
与目的卵巢癌严重危害妇女健康，其恶性程度居妇科恶性肿瘤首位，因70％的患者在诊断时为晚期，已存在广泛转移，手术不能完全切净，故目前国内外普遍开展以减瘤手术和以铂为基础的联合化疗的综合治疗。80％的卵巢癌...
- 翁艳洁
- 关键词：侧群细胞耐药机制
- Stathmin在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义被引量：4
- 2011年
- 背景与目的:Stathmin是一种重要的微管调节蛋白,参与多种肿瘤的发生、发展。本研究旨在验证并探讨Stathmin在上皮性卵巢癌中的表达及意义。方法:利用免疫组化和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测22例卵巢正常上皮组织,16例良性肿瘤和50例上皮性卵巢癌组织中Stathmin的表达。结果:上皮性卵巢癌中Stathmin mRNA的表达明显高于卵巢良性肿瘤(P<0.05)和正常卵巢上皮(P<0.05)。免疫组化方法检测显示,Stathmin蛋白主要定位在细胞的细胞质,且上皮性卵巢癌中Stathmin蛋白阳性率明显高于卵巢良性肿瘤和正常卵巢上皮(74.00%vs 31.25%、9.09%,P<0.01),而卵巢良性肿瘤与正常卵巢上皮相比,差异无统计学意义(P>0.05)。进一步利用χ2检验统计分析得出,Stathmin蛋白与卵巢癌的临床分期、病理分级、淋巴转移相关(P<0.05),而与年龄、病理类型及腹水量无相关性(P>0.05)。结论:Stathmin在上皮性卵巢癌中高表达,可能与卵巢癌的发生、发展相关。
- 石英翁艳洁周文娟周婷陈刚王常玉
- 关键词：卵巢癌STATHMIN免疫组化逆转录聚合酶链反应
- HSP27在卵巢癌顺铂耐药细胞系中的作用被引量：3
- 2011年
- 目的探讨HSP27在卵巢癌耐药细胞系及敏感细胞系中的表达及其在卵巢癌顺铂耐药中的作用。方法通过RT-PCR及Western blot检测卵巢癌细胞株OV2008和CI3K中HSP27 mRNA和蛋白的表达水平;将合成的针对HSP27基因的特异性siRNA及正义真核表达质粒pEGFP-C1-HSP27(命为p-HSP27),分别转染CI3K和OV2008细胞。通过RT-PCR及Western blot检测转染前后CI3K及OV2008细胞中HSP27 mRNA和蛋白表达的变化;MTT及流式细胞仪分别测定转染前后CI3K及OV2008细胞对顺铂敏感度的变化。结果 (1)HSP27在CI3K细胞中的mRNA和蛋白表达水平显著高于OV2008细胞,差异有统计学意义(P<0.05);(2)转染siRNA48 h,CI3K细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50)明显低于转染空载体和未转染的CI3K细胞(P<0.05);转染正义质粒p-HSP27 48 h,OV2008细胞对顺铂的IC50明显高于转染空载体和未转染的OV2008细胞(P<0.05);(3)转染siRNA及正义质粒48 h,再用顺铂作用CI3K细胞24 h。转染siRNA的CI3K细胞的凋亡率比转染空载体和未转染的CI3K细胞的凋亡率明显增加,前者明显高于后两者(P<0.05);转染正义质粒的OV2008细胞的凋亡率比转染空载体和未转染的细胞的凋亡率明显下降,前者明显低于后两者(P<0.05)。结论 CI3K及OV2008细胞内HSP27基因表达的强弱可影响其对顺铂的敏感度,提示HSP27可能在卵巢癌顺铂耐药中起重要作用。
- 李海燕王常玉石英翁艳洁王鸿艳罗丹枫
- 关键词：HSP27卵巢癌SIRNA顺铂药物抵抗
- 腹膜间皮细胞和卵巢癌细胞A2780的相互作用及对顺铂敏感性的变化
- 2011年
- 【目的】探讨卵巢癌细胞A2780与卵巢癌患者的腹膜间皮细胞（HPMC）非接触共培养前后Akt2基因水平改变及对顺铂敏感性的变化。【方法】原代培养卵巢癌患者的HPMC与卵巢癌细胞A2780非接触性共同培养24h，观察细胞形态学变化，收集细胞后，分剐利用半定量Real-timePCR法、Westernblot法测定细胞共培养前后Akt2基因在mR—NA和蛋白水平表达的改变，MTT法检测共培养前后对不同浓度顺铂敏感性的变化。【结果】非接触性共培养后，Akt2mRNA水平表达显著增加（P〈0．05）；总Akt2蛋白培养前后比较无差异（P〉0．05），磷酸化Akt（p-Akt）蛋白明显上调（P〈0．05）；不同浓度顺铂作用后，共培养细胞的存活率升高（P〈O．01）。【结论】HPMC与卵巢癌细胞A2780相互作用可产生促进肿瘤生长的调控因子，引起p-Akt的活化，产生耐药，二者间可能存在着复杂的调控网络。
- 翁艳洁石英鲍引娣周文娟王鸿雁王常玉
- 关键词：间质细胞腹膜顺铂
- TLR4在宫颈癌与不同HPV亚型宫颈癌细胞株中表达及意义被引量：5
- 2011年
- 目的 探讨TLR4在正常宫颈组织、宫颈上皮不典型增生、宫颈癌组织以及不同HPV亚型宫颈癌细胞株中表达与意义.方法 采用SP免疫组织化（IHC）检测TLR4在12例正常宫颈组织、30例宫颈轻度不典型增生（cervical intraepithelial neoplasia Ⅰ,CINⅠ）、30例宫颈中-重度不典型增生（cervical intraepithelial neoplasiaⅡ-Ⅲ,CIN Ⅱ-Ⅲ）以及49例宫颈癌（invasive cervical carcinoma,ICC）组织中的表达;应用细胞免疫荧光法、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测TLR4在不同HPV亚型宫颈癌细胞株HPV18（＋）HeLa、HPV16（＋）Siha以及HPV（-）C33a宫颈癌细胞株上的表达.结果 TLR4的表达随着宫颈病变程度的增高逐渐增强,在正常宫颈组织、CINⅠ、CIN Ⅱ～Ⅲ、ICC中阳性表达率分别为8.33 %（1/12）、20.00 %（6/30）、26.67 %（8/30）和55.10 %（27/49）,ICC与正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ～Ⅲ之间均有显著性差异（P＜0.01）.TLR4表达与HPV感染有关,在HPV阳性宫颈癌细胞株上表达强于HPV阴性细胞株.结论 TLR4可能参与宫颈癌起始、发展,TLR4的表达与功能与HPV感染有关.
- 王永军翁艳洁石英段华王世宣
- 关键词：TOLL样受体-4宫颈上皮不典型增生宫颈癌宫颈癌细胞株人乳头瘤病毒
