聂洪丽 作品数:5 被引量:12 H指数:3 供职机构: 电子科技大学 更多>> 发文基金: 教育部留学回国人员科研启动基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
鼠尾草属植物的DNA及RNA高效提取方法 被引量:3 2007年 以鼠尾草属植物为原料,采用CTAB法提取DNA,并在TSB法及氯化锂沉淀法的基础上改进并建立了一种高效高质量提取RNA的方法。用核酸测定仪测浓度和琼脂糖凝胶电泳检测质量,均获得了高浓度和高质量的DNA及RNA,为RT-PCR、分子克隆等分子生物学实验提供了很好的模板。 聂洪丽 宋先强 邓科君 杨足君关键词:鼠尾草属 RNA提取 DNA提取 卤醇脱卤酶的改造与发掘 卤醇脱卤酶不仅可以催化污染环境的有机卤化物的分解,从而降低其污染性,而且可以催化合成许多药物的中间体,在手性药物合成方面有广阔的应用前景,不过目前数据库中只有6种此类酶,为更好的利用这种酶,一方面可以运用突变等手段在催化... 聂洪丽关键词:定点突变 宏基因组技术 文献传递 富集培养及高质量DNA提取有利于从土壤宏基因组中获取新卤醇脱卤酶基因 被引量:3 2010年 目的:宏基因组技术作为一种不依赖于微生物纯培养的新方法,在挖掘新基因方面具有极大的潜力。本研究旨在建立一种从土壤中高效获取卤醇脱卤酶新基因的策略。方法:通过对现有DNA提取方法进行改进,同时结合富集培养途径以提高土壤宏基因组DNA质量和特异性;在此基础上,应用T-Coffee及CDEHOP程序设计特异引物并对目的基因进行扩增,同时采用正交法设计优化扩增条件,以提高获得卤醇脱卤酶基因的效率。结果:应用改进法提取的DNA质量较改进前有大幅度提高,其D260nm/D280nm及D260nm/D230nm值均大于1.8,且可以不经纯化直接用于PCR和相关酶切实验;PCR扩增目标基因的特异性增强,其中用经富集培养后所得DNA为模板扩增目标基因的特异性最强,TA克隆测序阳性结果比例最高。结论:富集培养和高质量DNA的获得有助于基于宏基因组途径获取新基因。 聂洪丽 汤丽霞 张诗海 江荣香基于宏基因组学的卤醇脱卤酶筛选 环境中的多数有机卤化物具有高毒性和低可降解性,卤醇脱卤酶可以催化邻卤醇进行分子内亲和取代生成相应的环氧化物,在消除有机卤化物的污染方面具有十分重要的作用。此外,在催化环氧化物和邻卤醇之间的转化反应中卤醇脱卤酶具有很高的立... 聂洪丽 汤丽霞关键词:有机卤化物 宏基因组 野生大麦ISSR-PCR反应体系的正交优化研究 被引量:6 2007年 利用SPSS建立正交试验体系,从Taq酶、Mg2+离子、dNTP、模板、引物的浓度5个水平对大麦ISSR反应体系进行优化,确定了适合大麦的快速高效ISSR反应体系。试验结果表明,在25μl反应体系中各反应成分为:0.5 U Taq酶,1μmol/L Mg2+,0.2μmol/LdNTP,0.3μmol/L引物,50 ng模板DNA。这一反应体系的建立对利用ISSR-PCR进行大麦种质资源的分类和新基因资源的挖掘打下了坚实的基础。 张韬 聂洪丽 陈颖骁 任正隆关键词:大麦 ISSR SPSS 正交设计