汤丽霞
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
- 供职机构：电子科技大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学理学更多>>
- L-薄荷醇氧化制备L-薄荷酮及铬废液的处理被引量：1
- 2018年
- 文章以L-薄荷醇为原料,Jone's试剂为氧化剂制备L-薄荷酮。针对实验产生的大量含铬废液,用还原沉淀法处理,并将沉淀转化为重铬酸钾回收利用,同时通过DPCI分光光度法测定铬废液处理前后铬浓度,处理后铬浓度为0.03mg/L,达到国家排放标准。本实验将L-薄荷酮合成与后续铬废液处理结合,有效减少了铬废液的污染。
- 付雨晨王豪胡开吴帆方瑞琴汤丽霞
- 关键词：L-薄荷醇
- 重组卤醇脱卤酶的表达优化及纯化被引量：2
- 2010年
- 卤醇脱卤酶可以催化合成具有光学纯的环氧化物及β-取代醇等一类高价值手性药物中间体。卤醇脱卤酶的高效重组表达及纯化可以更好地促进该酶的应用。通过PCR扩增,将编码卤醇脱卤酶的基因克隆至pBAD表达载体中,经测序鉴定后,将其转入大肠杆菌TOP10中,对其重组表达条件进行优化,以提高蛋白表达量。同时,对该酶在已构建好的T7表达体系中的表达条件也进行了优化。经酶活测定及SDS-PAGE分析,选择最优条件进行500ml摇瓶的表达,在两种表达体系中,可溶性目的蛋白的含量均大大提高,占总蛋白含量35%左右。采用Q-Sepharose阴离子交换层析技术一步纯化,分别获得纯度为90%的卤醇脱卤酶34mg和41mg。同时,pBADHheC表达体系的构建为卤醇脱卤酶的生物催化特性改造奠定了基础。
- 李阳汤丽霞郑楷王雄江荣香
- 关键词：纯化
- 基于宏基因组学的卤醇脱卤酶筛选
- 环境中的多数有机卤化物具有高毒性和低可降解性，卤醇脱卤酶可以催化邻卤醇进行分子内亲和取代生成相应的环氧化物，在消除有机卤化物的污染方面具有十分重要的作用。此外，在催化环氧化物和邻卤醇之间的转化反应中卤醇脱卤酶具有很高的立...
- 聂洪丽汤丽霞
- 关键词：有机卤化物宏基因组
- 一种新型微生物卤醇脱卤酶的研究进展被引量：5
- 2010年
- 卤醇脱卤酶是细菌降解环境中重要污染物有机卤化物的关键酶之一,具有与其他已知脱卤酶不同的脱卤机制。它是一类通过分子内亲核取代机制催化邻卤醇转化为环氧化物的脱卤酶,可以高效催化有机邻卤醇进行脱卤反应,在治理环境污染方面具有十分重要作用。此外,在催化环氧化物和邻卤醇之间的转化反应中,卤醇脱卤酶具有很高的立体选择性,因而在手性药物合成方面也有广阔的应用前景。我们着重从卤化物生物降解途径、脱卤机制及应用等方面介绍了卤醇脱卤酶的最新研究进展,同时对卤醇脱卤酶改造的新方法进行了阐述与展望。
- 郑楷汤丽霞
- 关键词：有机卤化物生物降解途径生物催化
- 富集培养及高质量DNA提取有利于从土壤宏基因组中获取新卤醇脱卤酶基因被引量：3
- 2010年
- 目的:宏基因组技术作为一种不依赖于微生物纯培养的新方法,在挖掘新基因方面具有极大的潜力。本研究旨在建立一种从土壤中高效获取卤醇脱卤酶新基因的策略。方法:通过对现有DNA提取方法进行改进,同时结合富集培养途径以提高土壤宏基因组DNA质量和特异性;在此基础上,应用T-Coffee及CDEHOP程序设计特异引物并对目的基因进行扩增,同时采用正交法设计优化扩增条件,以提高获得卤醇脱卤酶基因的效率。结果:应用改进法提取的DNA质量较改进前有大幅度提高,其D260nm/D280nm及D260nm/D230nm值均大于1.8,且可以不经纯化直接用于PCR和相关酶切实验;PCR扩增目标基因的特异性增强,其中用经富集培养后所得DNA为模板扩增目标基因的特异性最强,TA克隆测序阳性结果比例最高。结论:富集培养和高质量DNA的获得有助于基于宏基因组途径获取新基因。
- 聂洪丽汤丽霞张诗海江荣香
- 多功能生物催化剂——卤醇脱卤酶的研究进展被引量：7
- 2008年
- 光学纯的环氧化物及β-取代醇是一类高价值中间体,在手性药物及精细化工合成领域具有十分重要的应用前景。卤醇脱卤酶是一类通过分子内亲核取代机制催化邻卤醇转化为环氧化物的脱卤酶,可以高效高选择地催化环氧化物和邻卤醇之间的转化,因而可以用来合成具有光学纯的环氧化物及β-取代醇等化合物。本文着重介绍了卤醇脱卤酶的催化机理及其应用研究进展,并对研究的发展方向提出了一些设想。
- 郑楷汤丽霞
- 关键词：生物催化亲核试剂
- 二硫键的氧化还原状态对Trx融合赤霉酸诱导富含半胱氨酸蛋白内源荧光及变性过程影响被引量：2
- 2010年
- 在采用亲和层析、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对原核表达的赤霉酸诱导的富含半胱氨酸蛋白(Trx-GcGASA)进行纯化、鉴定的基础上,运用稳态荧光光谱手段研究了二硫苏糖醇(DTT)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、过氧化氢、盐酸胍(GdnHCl)对Trx-GcGASA内源荧光及变性过程的影响,发现(1)在中性缓冲体系中融合蛋白的内源荧光以305 nm的酪氨酸的荧光发射为主;(2)伴随着二硫键还原,融合蛋白中色氨酸和酪氨酸的相对荧光强度比值从0.7变化至1.8倍左右;(3)经过0.5 mmol.L-1GSSG、5 mmol.L-1过氧化氢处理后,酪氨酸和色氨酸的荧光强度下降约12~21%;(4)无论是否采用1 mmol.L-1DTT处理,6 mol.L-1盐酸胍均不能诱导融合蛋白彻底变性;(5)二硫键的存在与否影响了盐酸胍诱导的变性过程。通过两态模型拟合获得Trx-GcGASA变性过程Gibbs自由能变化ΔG约为3.7 kJ.mol-1。相关工作不仅为深入研究融合伴侣Trx对GcGASA变性热力学、动力学及复性过程影响奠定了基础;同时,也为通过光谱手段获取GcGASA的结构信息提供了基础的数据。
- 张腾冯娟李阳陈锐汤丽霞庞小峰任正隆
- 关键词：内源荧光二硫键
