- shRNA干扰肝癌细胞Kir6.2基因表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的:构建shRNA体内表达载体pGenesil-3-siRNA,筛选出抑制Kir6.2基因表达的有效靶序列。方法:以Kir6.2基因为目的基因,以产生shRNA质粒载体pGenesil-3为表达模板,细胞内转录合成2条siRNA,脂质体转染法将shRNA质粒载体pGenesil-3共转染SK-Hep1细胞,将细胞分为SK组(未转染)、HK组(转染阴性对照质粒)、K1组(转染重组质粒K1)和K2(转染重组质粒K2)组。经G418筛选出单克隆进行培养,用RT-PCR和Western Blotting分别检测Kir6.2 mRNA和蛋白的表达,筛选出抑制Kir6.2表达的有效siRNA靶序列。结果:SK、HK、K1和K2组Kir6.2 mRNA表达的相对量分别为0.936±0.042、0.848±0.058、0.225±0.0360、0.171±0.029,K1、K2组Kir6.2mRNA的表达与HK、SK组比较均明显降低(P<0.05)。SK、HK、K1和K2组的Kir6.2蛋白表达的量分别为0.925±0.045、0.901±0.067、0.269±0.024、0.318±0.031,K1、K2组Kir6.2蛋白的量与HK、SK组比较均明显降低(P<0.05)。结论:shRNA抑制了肝癌细胞Kir6.2基因的表达。
- 苏晓通梁平李靖丁生才杨彤翰
- 关键词：RT-PCRWESTERNBLOTTING
- 原发性肝癌合并门静脉高压症的外科治疗（附37例报告）被引量：1
- 2010年
- 目的 总结原发性肝癌合并门静脉高压症外科手术治疗的方法、疗效及围手术期注意事项.方法 回顾性分析我院2003年1月至2009年6月外科治疗的37例原发性肝癌患者合并门静脉高压症的临床资料.结果 术后并发症总发生率为37.8%（14/37）,其中围手术期死亡1例（死亡率2.7%）,其他创面大量渗血5例,中等量腹水4例,肺部感染3例,肝性脑病1例.随访至今死亡19例,其中18例死于肝癌复发,1例死于上消化道出血.存活17例,最长1例存活49个月,生存期2～49个月,平均18.4个月.结论 对原发性肝癌合并门静脉高压症患者行肝癌局部切除附加门奇断流、脾脏切除是安全有效和可行的,加强围手术期处理是提高近期疗效的关键.
- 郑幼伟张练郑启昌和华苏晓通
- 关键词：原发性肝癌门静脉高压症外科治疗
- shRNA沉默肝癌细胞Kir6.2基因对K_(ATP)通道电流的影响
- 2008年
- 目的研究shRNA干扰肝癌细胞Kir6.2基因后KATP通道电流的变化。方法脂质体法将构建的3种shRNA质粒表达载体HK(隐性对照质粒)、K1(质粒携带干扰序列1)、K2(质粒携带干扰序列2)分别转染肝癌细胞。实验分为4组:SK组(未转染)、HK组、K1组、K2组。采用膜片钳全细胞记录方法记录KATP通道电流。高阻封接后,用10mmol/L2-脱氧-D-葡萄糖灌流液灌流10min,测量各组的电流,最后换成100μM格列本脲灌流液灌流10min,再次测量电流,再次电流相减即可得格列本脲敏感的KATP电流。绘制Ⅰ-Ⅴ曲线。结果在SK、HK、K1、K2 4组中,KATP电流分别为(n=7)(nA)(1.80±0.673)、(1.87±0.541)、(5.16±1.011)、(3.89±1.287)。K1、K2组与SK组比较差异有统计学意义。K1、K2组KATP电流的幅度明显高于HK组。结论shRNA沉默肝癌细胞Kir6.2基因后KATP通道电流改变明显。
- 苏晓通梁平丁生才杨彤翰韩克强
- 关键词：SHRNA肝癌细胞全细胞记录格列本脲
- shRNA干扰肝癌细胞Kir6.2基因表达对细胞内钙离子浓度的影响被引量：2
- 2008年
- 目的研究shRNA干扰肝癌SK-Hep1细胞Kir6.2基因表达及对细胞内钙离子浓度的影响。方法脂质体转染法将shRNA质粒载体pGenesil-3共转染SK-Hep1细胞,实验分为SK组(未转染)、HK组(阴性对照)、K1组(干扰序列1)和K2组(干扰序列2)。经G418筛选出单克隆培养,RT-PCR和Western Blotting分别检测Kir6.2 mRNA和蛋白的表达,筛选出抑制Kir6.2表达的有效序列。Fluo4-AM孵育各组细胞,流式细胞仪检测荧光强度。结果RT-PCR结果显示K1、K2组Kir6.2 mRNA的表达与HK、SK组比较均降低。K1、K2组Kir6.2蛋白的量与HK、SK组比较均降低。K1和K2组钙离子浓度远远低于SK和HK组。结论shRNA抑制了肝癌细胞Kir6.2基因的表达,钙离子浓度显著降低。
- 苏晓通梁平丁生才李靖杨彤翰李洪艳
- 关键词：WESTERNBLOTTING钙离子浓度
- 高脂血症性胰腺炎31例临床分析
- 2010年
- 我院自2005年1月至2009年6月收治急性胰腺炎（AP）289例，其中31例为高脂血症性胰腺炎（HLP），现报道如下：
- 郑幼伟韩保卫王晓苏晓通刘莉茹
- 关键词：高脂血症性胰腺炎急性胰腺炎
- 腹腔镜辅助胃癌根治术在老年肥胖患者的应用被引量：9
- 2013年
- 目的：探讨腹腔镜辅助胃癌根治术在肥胖老年患者应用中的可行性及其临床疗效。方法：回顾性分析2008年9月-2012年9月26例接受腹腔镜辅助胃癌根治术老年肥胖患者（肥胖组）和同期67例接受腹腔镜辅助胃癌根治术非肥胖老年患者（非肥胖组）的临床资料。结果：肥胖组手术时间明显长于非肥胖组[（231．2±51．4）min vs．（208．5±53．6）min，P=0．039]，但两组术中出血量、术后住院时间差异无统计学意义（均P〉0．05）。两组术后并发症发生率差异无统计学意义（23．1％雌22．4％，P=0．589）。两组术后1，3，5d各免疫学指标差异均无统计学意义（均P〉0．05）。肥胖组术后体能评分明显高于非肥胖组（P〈0．05），而呼吸困难分、疲劳评分低于非肥胖组（均P〈0．05），余各项生活质量评分两组差异均无统计学意义（均P〉0．05）。88例（90．3％）随访2～48个月，肥胖组1，2，4年生存率分别为91．3％，78．2％，65．2％；非肥胖组1，2，4年生存率分别为93．4％，77．7％，62．3％，两组比较差异无统计学意义（X^2=0．0l1，P=0．916）。结论：肥胖能增加老年腹腔镜胃癌根治术的手术时间，但并不会影响手术安全性及近期疗效。
- 胡军红杨德生王晨宇苏晓通张春旭任学群
- 关键词：胃肿瘤外科学肥胖症腹腔镜
- 重组生长激素对梗阻性黄疸大鼠肝细胞凋亡的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察梗阻性黄疸状态下大鼠肝脏细胞凋亡的情况,探讨重组生长激素注射液的抗凋亡作用及其对肝脏的保护作用。方法健康雄性SD大鼠72只,随机分为3组:假手术对照组(SO组,n=24)、梗阻性黄疸模型组(OJ组,n=24)、生长激素治疗组(RH组,n=24)。分别于建模后3、7、14 d随机从各组中取一亚组处死大鼠进行指标测定,检测血清总胆红素(TBIL)和总胆汁酸(TBA)水平变化及肝脏组织学的光镜检查,TUNEL法检测肝组织细胞原位凋亡,免疫组织化学(SP)法检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达。结果 RH组和OJ组血清TBIL、TBA水平,术后3 d时即明显升高,此后升高渐趋缓慢,并逐渐下降,但仍高于SO组。RH组术后3、7 d时TBIL和TBA水平较OJ组明显下降(P<0.05);组织学光镜观察:RH组和OJ组术后3 d即出现肝细胞损伤,并随时间延长而加重,但各时相点RH组较OJ组减轻。OJ组和RH组术后3 d即见细胞凋亡增加,7d明显增加,14 d后镜下视野见广泛细胞凋亡,RH组与OJ组比较,各时相点凋亡细胞明显减少(P<0.05)。Bcl-2蛋白表达的规律与凋亡呈一致性,但各时相点上表达RH组较OJ组明显上调(P<0.05)。结论大鼠梗阻性黄疸时肝脏存在着细胞凋亡,是梗黄状态下肝功能损害的重要机制。重组生长激素对肝细胞凋亡有明显抑制作用。
- 和华李国祥张练雷霆户平安李四桥苏晓通
- 关键词：梗阻性黄疸肝细胞凋亡重组生长激素总胆红素总胆汁酸
- 索拉菲尼片联合经肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝癌的临床疗效被引量：2
- 2022年
- 目的:探讨索拉菲尼片联合经肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗不可手术切除的原发性肝癌的临床疗效及安全性。方法:选取2019年9月-2020年12月某院收治的62例不可手术切除肝癌患者为研究对象,按照均等单盲法将参与本研究的患者分为对照组和试验组各31例,对照组采用单纯TACE治疗,试验组在对照组的治疗上采用索拉菲尼片口服,统计两组治疗有效率以及药物不良反应的发生情况,并比较两组无疾病进展生存时间、总生存时间。结果:试验组的治疗有效率与疾病控制率分别为93.55%、96.77%,对照组治疗有效率与疾病控制率分别为70.97%、90.32%,试验组明显更高,差异显著(P<0.05);两组不良反应发生率对比无明显差异(P>0.05),试验组的无疾病进展生存时间、总生存时间均长于对照组,差异显著(P<0.05)。结论:对不可手术切除的原发性肝癌患者TACE术后辅助索拉菲尼片治疗,可有效提高疾病控制率与治疗有效率,提升生活质量,降低肝癌复发风险,安全性高,临床疗效显著。
- 和华刘海潮詹勇苏宝威苏晓通
- 关键词：经肝动脉化疗栓塞术原发性肝癌安全性
- shRNA沉默Kir6．2基因表达载体的构建及其对HepG2细胞增殖和侵袭的影响
- 2008年
- 目的构建shRNA体内表达载体pGenesil-3-shRNA，研究抑制Kir6．2基因表达对HepG2细胞增殖和侵袭的影响。方法以Kir6．2基因为目的基因，以产生shRNA质粒载体pGenesil-3为表达模板，细胞内转录合成2条shRNA。重组质粒经BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切鉴定和测序后，使用Lipofectamine 2000转染HepG2细胞。实验分为SK组（未转染）、SK-HK组（阴性对照）、SK-K1（转染干扰序列1）组和SK-K2（转染干扰序列2）组。G418筛选出荧光单克隆进行培养。Western blot检测Kir6．2蛋白在各组细胞中的表达。MTT法和Transwell系统分别检测各组细胞的增殖和侵袭能力。结果经酶切、测序鉴定，重组质粒符合设计要求。Western blot检测结果显示SK组、SK-HK组、SK-K1组和SK-K2组Kir6．2蛋白质相对表达量分别为0．9349±0．0443，0．9098±0．0195，0．2869±0．0295，0．3256±0．0341；和对照组相比，实验组Kir6．2蛋白减少。MTT法检测SK组、SK-HK组、SK-K1组、SK-K2组细胞的增殖分数分别为0．7523±0．0681，0．7351±0．0589，0．2494±0．0485，0．2261±0．0298，F=0．2401，P=0．000。Transwell实验结果显示，SK组、SK-HK组、SK-K1组、SK-K2组细胞的穿膜数分别为47．0±7．1，40．7±8．0，14．3±5．1，15．0±3．7，F=30．74，P=0．000。和对照组相比，实验组HepG2细胞增殖和侵袭能力均明显降低。结论抑制HepG2细胞Kir6．2基因的表达可降低HepG2细胞的增殖和侵袭能力。
- 苏晓通梁平丁生才李靖李洪艳韩克强
- 关键词：RNA干扰HEPG2细胞增殖
- shRNA沉默人肝癌细胞株SK-Hep1 Kir6.2基因的研究
- 离子通道是生命活动的基础,离子通道与肿瘤的关系逐渐引起人们关注,深入了解离子通道在肿瘤形成、发展和转移过程中的作用,不仅有利于更加全面地阐明肿瘤发病机制,也将可能为肿瘤预防和治疗提供新靶标和新的生物学干预手段。钾离子通道...
- 苏晓通
- 关键词：KATP通道膜片钳
- 文献传递
