蒋春舫
- 作品数：38 被引量：215H指数：9
- 供职机构：同济医科大学附属协和医院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 针对Toll样受体4基因的小发夹结构RNA对RAW264·7细胞炎症因子分泌的抑制作用被引量：7
- 2006年
- 目的构建针对Toll样受体(TLR)4mRNA的小发夹结构RNA(shRNA)真核表达载体pEGFP-siRNA/TLR4,检测该shRNA诱导的RNA干扰(RNAi)对脂多糖刺激RAW264·7细胞分泌炎症因子的抑制作用,以探讨针对TLR4基因的RNAi对RAW264·7细胞炎症反应的抑制作用。方法构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)及shRNA克隆位点的质粒pEGFP-H1/siRNA,运用网络工具siRNAWizard(http://www·sirnawizard·com/)设计针对TLR4mRNA的寡核苷酸片段。将其克隆入pEGFP-H1/siRNA,构建表达EGFP及TLR4-shRNA的真核表达质粒pEGFP-H1/TLR4-siRNA。运用脂质体转染技术将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至培养的小鼠巨噬细胞系RAW264·7,观察细胞系中荧光蛋白的表达强度;再运用脂多糖刺激转染的RAW264·7细胞,运用ELISA方法检测该细胞系分泌炎症因子水平的变化。结果质粒pEGFP-H1/siRNA及pEGFP-H1/TLR4-siRNA分别用BbsⅠ和MluⅠ酶切电泳后,前者出现4·9kb和340bp的的条带,后者出现5·0kb和220bp的条带,与实验设计的质粒长度一致,且测序证实克隆序列正确。将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至RAW264·7细胞后,EGFP的表达率为50%±8%。用脂多糖刺激后,TLR4-SiRNA转染组细胞培养液TNF-α水平(2h:825pg/ml±136pg/ml;8h:2190pg/ml±359pg/ml)明显低于对照siRNA转染组(2h:1179pg/ml±240pg/ml;8h:4720pg/ml±227pg/ml,均P<0·01)。结论针对TLR4mRNA的shRNA可能通过RNAi机制对脂多糖诱导的RAW264·7细胞炎症因子的分泌有明显的抑制作用。
- 张进祥王慧吴河水蒋春舫郑启昌
- 关键词：RNA基因沉默脂多糖类巨噬细胞
- 道路交通事故致颅脑损伤预后影响因素及预测模型建立的探讨被引量：5
- 2007年
- 时俊新张静王增珍蒋春舫
- 关键词：道路交通事故临床预后颅脑损伤
- 恢复野生型PTEN基因表达对炎性乳腺癌MDA-MB-468体外生物学行为的影响(英文)
- 2007年
- 目的研究野生型PTEN基因转染对人炎性乳腺癌MDA-MB-468细胞体外生物学行为的影响及机制。方法应用基因重组技术构建重组质粒pcDNA3.1-PTEN,用脂质体转染乳腺癌细胞株MDA-MB-468,用RT-PCR、免疫组化及免疫印迹方法分析目的基因及其蛋白表达,并用免疫印迹方法检测转染后,在表皮生长因子的诱导下,磷酸化蛋白激酶B(PKB/Akt)的表达,四甲基唑蓝(MTT)法分析细胞增殖,Annexin V-FITC和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果RT-PCR、免疫组化及免疫印迹显示pcDNA3.1-PTEN转染组有PTENmRNA及其蛋白表达,且显示转染组在表皮生长因子的诱导下,p-Akt蛋白表达下调。MTT检测表明pcDNA3.1-PTEN转染组活细胞数较其它各组均低(P<0.01),流式细胞分析其凋亡率达21.68%。结论野生型PTEN基因依赖其磷酸酶活性可诱导乳腺癌MDA-MB-468细胞凋亡。
- 陈庆永王国斌王春友蒋春舫郑海
- 关键词：乳腺癌PTEN基因转染P13K/AKT凋亡
- 腹腔镜辅助下结直肠癌根治术75例报告被引量：15
- 2005年
- 目的评价腹腔镜技术在结直肠癌根治术的临床应用价值。方法对77例腹腔镜下结直肠癌根治术患者的临床资料进行回顾性分析。结果75例(97.4%)均在腹腔镜下完成手术,其中右半结肠切除术12例、横结肠切除术2例、左半结肠切除术12例、乙状结肠切除术8例、Dixon术19例、Parks术8例、Miles术12例、结肠次全切除术2例、全结肠切除术2例。2例中转开腹行Miles术。无围手术期死亡及出血和肠瘘等并发症。术后胃肠功能恢复时间1-4(平均2)d。术后随访时间2-42(平均15)个月;死亡2例。结论腹腔镜下结直肠癌根治术操作安全、创伤小,可达到根治性切除的效果。
- 陶凯雄王国斌陈道达卢晓明龙跃平蒋春舫黄文广周颜才
- 关键词：腹腔镜辅助MILES术左半结肠切除术乙状结肠切除术结肠次全切除术
- 骨盆骨折并肛管、直肠和尿道损伤
- 1994年
- 骨盆骨折并肛管、直肠和尿道损伤蒋春舫，张寿熙病史摘要患者。男，２５岁。两天前被汽车撞倒并从下腹部压过，当时下腹部和臀部剧烈疼痛，不能站立和行走。排尿较费力，有肉眼血尿和肛门滴血。当地医院在抗休克的同时行骨盆骨折手法复位和肛门及周围软组织损伤的清创缝合...
- 蒋春舫张寿熙
- 关键词：骨盆骨折肛管直肠尿道
- 颅脑损伤预后预测模型建立的方法探讨被引量：1
- 2010年
- 目的回顾道路交通事故致颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)的病例,筛选预后影响因素,并对建立预后预测模型的可能性进行探讨。方法资料来源于1 294例因道路交通事故致TBI住院病历,用Logistic回归对可能的预测因子进行筛选,并对估计的Logistic回归模型进行评价。结果①在病情相同的条件下,年龄越大预后不良的可能性越大。年龄大于55岁的患者,预后不良的优势比是25岁以下患者的3.7倍。性别、健康状况、交通事故类型以及交通事故发生至入院抢救的间隔时间以及医疗费用负担方式等,对临床转归未发现有明显影响。②本研究得到的Logistic回归模型,回代判别ROC曲线下面积为0.83,以及拟合优度检验结果均显示模型拟合良好。结论病情严重程度和年龄是最为重要的两个预测因子,本研究得到的Logistic回归模型具有一定的临床应用价值。
- 时俊新张静蒋春舫王增珍
- 关键词：颅脑损伤预后LOGISTIC模型
- 外源性PTEN基因转染对炎性乳腺癌MDA-MB-468细胞株体外生物学行为的影响被引量：1
- 2006年
- 目的研究外源性PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10)基因表达对炎性乳腺癌MDA-MB-468细胞株体外生物学行为的影响。方法应用基因重组技术构建并鉴定pcDNA3.1-PTEN真核表达质粒,重组质粒被BglⅡ酶切线性化后运用脂质体介导基因转染法,将外源性PTEN基因导入乳腺癌细胞系MDA-MB-468中,经G418筛选阳性克隆,空载体pcDNA3.1(-)转染入细胞作为对照,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)分析目的基因及蛋白表达,膜联蛋白Ⅴ-FITC(FITC-AnnexinⅤ)和碘化丙啶(PI)双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果重组真核表达质粒pcDNA3.1-PTEN经限制性内切酶XbaⅠ和BamHⅠ双酶切,电泳后显示约1.4kb的PTEN目的片段和5.4 kb的pcDNA3.1(-)载体片段,证明重组质粒连接正确。RT-PCR、Western blot均显示pcDNA3.1-PTEN转染组有PTEN mRNA及其蛋白表达,流式细胞分析显示恢复PTEN蛋白表达后其凋亡率较其它两组细胞凋亡率增高(均P<0.01)。结论成功地构建了pcDNA3.1-PTEN真核表达质粒,外源性PTEN基因可通过诱导细胞凋亡而抑制乳腺癌细胞的增殖。
- 陈庆永蒋春舫陈剑英王春友
- 关键词：乳腺癌PTEN基因基因转染
- 曲格列酮诱导胃癌MKN45细胞株凋亡被引量：1
- 2007年
- 目的:研究不同浓度曲格列酮对胃癌MKN45细胞过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARγ)激活水平变化及细胞凋亡的作用.方法:胃癌MKN45细胞培养后分为4组,分别为生理盐水对照组和1、5、10μmol/L曲格列酮实验组.用EMSA测定不同浓度曲格列酮对胃癌MKN45细胞PPARγ激活水平的变化,用流式细胞术检测caspase-3蛋白的表达、细胞周期的变化及凋亡.结果:随曲格列酮浓度的增加,PPARγ活性明显升高,以对照组活性为100.1、5、10μmol/L曲格列酮组的PPARγ平均活性分别为155.8、21 8.7和307.6(P<0.01).流式细胞术证实MKN45细胞经1,5,10μmol/L曲格列酮的作用后,随着曲格列酮剂量的增加,Caspase-3蛋白的表达均值分别为4.51,10.95,20.49,33.56(P<0.01),G_0/G_1期细胞逐渐增加,S期细胞下降,凋亡细胞增多.结论:曲格列酮通过对胃癌MKN45细胞PPARγ的激活可引发胃癌MKN45细胞株细胞周期抑制及凋亡,可为胃癌的治疗提供新的靶点.
- 蒋春舫陈庆周洁郑海陈娟
- 关键词：曲格列酮过氧化物酶体增殖激活受体Γ胃癌凋亡EMSA
- PPARγ参与调节胃癌MKN45细胞株VEGF mRNA的表达及临床意义被引量：3
- 2007年
- 目的研究过氧化物酶体增殖激活受体(PPARγ)是否体外参与调节胃癌MKN45细胞VEGF mRNA的表达及临床意义。方法体外培养人胃癌细胞系MKN45,不同浓度的PPARγ激动剂(曲格列酮),PPARγ特异性抑制物体外作用细胞,EMSA测定细胞PPARγ的活性,RT-PCR检测细胞VEGF mRNA的表达。结果相对于对照组,随曲格列酮浓度的增加,胃癌MKN45细胞株PPARγ活性显著性升高(P<0.01),VEGF mRNA的表达显著性降低(P<0.01),且呈剂量依赖关系;PPARγ特异性抑制物能显著性抑制曲格列酮诱导的胃癌MKN45细胞株PPARγ的活化和VEGF mRNA的表达的下调(P<0.01)。结论PPARγ可能参与调节胃癌MKN45细胞株VEGF mRNA的表达,曲格列酮通过激活PPARγ,抑制胃癌MKN45细胞株VEGF mRNA的表达,可能为胃癌的治疗提供新的靶点。
- 郑海蒋春舫陈庆
- 关键词：过氧化物酶体增殖激活受体Γ胃癌血管内皮生长因子
- 老年道路交通伤害病例临床流行病学特征及转归因素分析被引量：8
- 2009年
- 目的描述老年道路交通伤害住院病例的临床流行病学特征,探讨影响住院转归的因素。方法抽取武汉市两所大型综合医院1999-2004年间230例老年道路交通伤害患者作为研究对象,进行临床流行病学现况分析。结果研究对象中男性132例,女性98例,以60～65岁、65～70岁组患者比例为高(32.61%、28.70%);50.87%的伤害发生于小学及以下文化程度者;事故类型以机动车-行人居多(56.09%),最易损伤的部位是四肢(37.40%),其次是头部(24.35%):43.04%的患者施行了手术;老年道路交通伤害住院病例病死率(8.26%),显著高于住院整体人群(2.65%)。单因素分析结果显示有无基础疾病、是否实施手术治疗及入院体位对住院病例转归有显著影响(P<0.05)。结论对普通人群进行道路安全宣传教育,加强机动车管理,提高患者住院治疗质量是预防老年道路交通伤害发生和促进转归的重要措施。
- 蒋春舫张进祥郑海刘苏南陈庆勇陈平陈阳龙汪洋彭万勇
- 关键词：道路交通伤害老年人群住院病例流行病学
