袁婷
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：天津医科大学代谢病医院内分泌研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 地拉罗斯联合顺铂对非小细胞肺癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨铁鳌合剂地拉罗斯及其联合顺铂对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的影响,为寻找肺癌有效的治疗途径提供依据。方法常规传代细胞培养方法培养肺腺癌细胞A549,以不同浓度的地拉罗斯、地拉罗斯联合顺铂干预细胞生长一定时间。在倒置显微镜下观察A549的生长抑制特征;MTT法检测细胞的增殖抑制状况;DAPI、AO/EB染色观察细胞凋亡的形态学变化;Annxin V-FITC/PI双染流式细胞术定量测定细胞凋亡状况。结果 A549细胞经不同浓度的药物作用一定时间以后,在倒置显微镜下可见随药物浓度和时间的增加,细胞数明显减少,细胞相互分散,贴壁细胞出现皱缩变小折光性差;MTT检测显示,细胞增殖抑制率随药物浓度的增加和作用时间的延长呈现上升趋势,即剂量效应关系及时间效应关系;DAPI、AO/EB染色法观察到细胞凋亡的形态学变化,即细胞发生染色质凝集,核固缩等典型的凋亡形态特征;流式细胞术检测显示,细胞的凋亡率随药物浓度的增加而升高,联合用药促细胞凋亡显著。结论铁鳌合剂地拉罗斯具有抗肺癌细胞A549增殖的能力,促进肿瘤细胞凋亡,其与顺铂联合可增强癌细胞耐受性,降低顺铂的用量及其不良反应。
- 袁婷梁吉祥张斌汪蓓蕾张欣郭刚张瑞
- 关键词：铁螯合剂顺铂细胞增殖
- 重组蛋白TAT-NLS-Nkx6.2在大肠杆菌的表达纯化及活性测定
- 2013年
- 目的:构建重组基因TAT-NLS-Nkx6.2的原核表达载体,获得重组TN-Nkx6.2蛋白,并验证其生物学活性。方法:该实验先将人类免疫缺陷病毒HIV-1的反式激活因子TAT、核定位信号NLS、Nkx6.2基因片段连接合成目的基因TAT-NLS-Nkx6.2。之后构建重组质粒pET-28a-TNNkx6.2并将其转化入E.coli DH5α中克隆,再转化至E.coli BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,经组氨酸Ni2+亲和层析纯化融合蛋白,并用SDS-PAGE及Western blot鉴定融合蛋白,荧光免疫组化染色观察TN-Nkx6.2在小鼠脑组织分布。结果:成功表达并获得纯度90%以上的TN-Nkx6.2蛋白,经Western Blot鉴定,TN-Nkx6.2有良好的免疫原性和免疫反应性荧光免疫组化染色证明TNNkx6.2与小鼠大脑细胞结合并内化进入胞浆及胞核。结论:获得的融合蛋白TN-Nkx6.2具有生物学活性,并能穿过血脑屏障与小鼠大脑细胞结合,并内化进入胞核和胞浆,为深入探讨同源盒基因Nkx6.2在甲状腺减低模型的分子机制研究奠定了物质基础。
- 孙少飞汪蓓蕾袁婷张斌张欣郭刚张瑞
- 关键词：重组蛋白蛋白纯化活性检测
