袁秀芳
- 作品数：128 被引量：366H指数：11
- 供职机构：浙江省农业科学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种检测非洲猪瘟病毒的实时荧光定量PCR引物探针组、试剂盒及检测方法
- 本发明公开一种检测非洲猪瘟病毒的实时荧光定量PCR引物探针组、试剂盒及检测方法，涉及病毒检测技术领域。本发明提供一种检测非洲猪瘟病毒的实时荧光定量PCR引物探针组，包括针对非洲猪瘟病毒B646L基因的检测用引物和探针及针...
- 余斌袁秀芳徐丽华李军星苏菲叶十一
- 文献传递
- 胸膜肺炎放线杆菌分离株血清型的PCR鉴定和Apx毒素基因检测
- 2023年
- 旨在调查胸膜肺炎放线杆菌流行株的血清型及Apx毒素基因携带情况,采用PCR方法对APP分离株进行血清型鉴定和Apx毒素基因检测。结果表明,64个分离株分别被鉴定为2、5、7、8、12、15、19共7个血清型。7个血清型中发现12种不同的Apx毒力因子模式。毒力因子分析结果显示,同一血清型的不同菌株携带的Apx毒素基因存在差异,不同血清型的菌株也可能会携带相同模式的Apx毒素基因。本研究表明,血清8型胸膜肺炎放线杆菌是浙江省的优势血清型,血清19型菌株在国内首次被检测到。血清型与所携带的Apx毒素基因之间不存在必然联系。
- 卢碧凯袁秀芳徐丽华余斌苏菲叶十一陈怡洁蒋利明张晖李军星
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌血清分型APX毒力因子
- 一步法CSFV和PRRSV双重实时荧光定量RT-PCR诊断方法的建立与初步应用被引量：3
- 2015年
- 根据猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,分别设计了1对特异性引物和1条Taq Man探针,建立了一步法检测CSFV和PRRSV双重实时荧光定量RT-PCR方法。结果表明,建立的方法特异性高,与PCV2,PRV,PPV,PEDV,JEV,BVDV无交叉反应;可以检出20个拷贝数的模板RNA,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍;对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)低于4%,方法重复性好。应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对50份疑似病例组织进行检测,结果荧光定量RT-PCR检出30份PRRSV阳性,13份CSFV阳性,均高于常规RT-PCR方法的检出数(24份PRRSV阳性,10份CSFV阳性)。本研究建立的双重实时荧光定量RT-PCR方法具有快速、特异性好、灵敏度高的特点,可用于PRRSV和CSFV的实验室快速诊断和流行病学调查。
- 袁秀芳路斌徐丽华李军星王一成
- 关键词：猪瘟病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 猪主要病毒病快速诊断和猪α-干扰素防治新技术研究
- 王一成袁秀芳徐丽华李军星张存
- 随着养猪业规模化、集约化的发展，猪病疫情更趋复杂。两种或两种以上病原体引起混合感染或继发感染普遍发生，使猪病的确诊极其困难，延误防治常见不鲜。另一方面，中国养猪业中猪繁殖与呼吸综合症、伪狂犬病等病毒性疫病占主导地位，传统...
- 关键词：
- 关键词：养猪疫病防治
- 猪胸膜肺炎放线杆菌apxⅣ表达蛋白单克隆抗体的制备
- 将APP apxⅣN端基因克隆于pET-28a载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达。收获融合表达的apxⅣ蛋白,按50μg/只的剂量与等量弗氏佐剂乳化后,经腹腔接种BALB/C小鼠,免疫3次后,取其脾细胞与SP2/0骨髓...
- 袁秀芳王一成徐丽华
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌单克隆抗体
- 文献传递
- 猪主要RNA病毒病多重二温式RT-PCR检测方法的建立及初步应用
- 通过对Genbank登录的CSFV、PRRSV和JEV的核苷酸序列进行比对分析,找出CSFV的E2基因,PRRSV的Nsp2基因和JEV的E基因为相对保守区域。利用生物学软件在保守序列分别设计一对引物,目的片断大小分别为...
- 路斌袁秀芳徐丽华李军星王一成
- 关键词：CSFVPRRSVJEV
- 文献传递
- 猪附红细胞体、小附红细胞体和未定种附红细胞体检测用引物及试剂盒
- 本发明公开了猪附红细胞体、小附红细胞体和未定种附红细胞体检测用引物和检测试剂盒。所述检测用引物为序列表SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：4，本发明还提供了猪附红细胞体、小附红细胞体和未定种附红细胞体的检测试剂盒...
- 付媛石团员方维焕徐丽华袁秀芳李军星卢福庄张雪娟舒琦艳魏巍周永学
- 文献传递
- 猪流感诊断方法研究进展被引量：13
- 2006年
- 猪流感即猪流行性感冒,是由正黏病毒科A型流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病。其特征为突发,高热,精神沉郁,食欲废绝,呼吸困难,阵发性咳嗽。猪流感的病死率不高,病猪可康复。近年来,随着集约化养猪规模的不断扩大,猪流感对养猪业构成了较大的威胁。此外,猪流感在人流感和禽流感之间发挥着关键性作用,具有重要的公共卫生意义。自1918年首次报道以来,猪流感一直受到人们的广泛关注。研究快速、科学、准确的诊断方法,对于本病的检测和控制具有重要的意义。除常规的临床症状及病理变化诊断外,流感的确诊依赖于实验室诊断方法。文章从病原学、血清学和分子生物学等几个方面对该病的诊断研究进展做了综述。
- 王方昆王一成袁秀芳徐丽华
- 关键词：猪流感
- 副猪嗜血杆菌comC基因遗传进化及其与菌株血清型和潜在毒力基因的相关性分析被引量：2
- 2020年
- 为探索副猪嗜血杆菌菌株分类与其临床致病力之间的关系,研究对2009-2017年分离的148个菌株进行comC基因测序以及遗传进化分析,同时探讨部分潜在毒力基因、血清型以及临床致病力等与基于comC基因的菌株遗传进化的相关性。基于comC基因的进化树分析显示,副猪嗜血杆菌形成2个相对独立的分支,在分支Ⅰ中又形成2个亚群Ⅰ-A和Ⅰ-B。4个潜在毒力基因在comC进化树各分支中的分布模式具有明显差异,Ⅰ-A分支中hsdS、hsdR及ompP2基因检出频率较高,而fhuA基因检出频率较低;Ⅰ-B分支中fhuA及ompP2检出频率较高,而hsdS、hsdR检出频率较低;分支Ⅱ中只有ompP2检出频率较高,fhuA、hsdS和hsdR的检出频率都较低。血清型分布在各分支中也有明显差别,血清4,5,12,13,14型主要分布于分支Ⅰ中;而血清1,2,7型主要分布于分支Ⅱ中。系统感染分离菌株在3个分支中分布较均匀,但93.8%的心包液分离菌株位于分支Ⅰ中,且主要位于Ⅰ-A分支。因此,comC进化树各分支中潜在毒力基因和血清型的分布有明显差异,表明基于comC基因的遗传进化分析对副猪嗜血杆菌临床分离株具有良好的区分效果,但系统感染分离株与基于comC基因的遗传进化没有明显的相关性。本研究为探索副猪嗜血杆菌的分类方法及其与致病力的关系提供新的信息。
- 李军星徐丽华苏菲余斌袁秀芳
- 关键词：副猪嗜血杆菌遗传进化血清型毒力基因
- 2010—2013年浙江省猪流行性腹泻病毒临床检测及PEDV-S基因型分析被引量：26
- 2014年
- 2010年以来,全国大部分地区暴发新生仔猪严重流行性腹泻,给养猪业造成巨大经济损失。为分析猪流行性腹泻病毒(PEDV)在浙江省的流行和遗传变异情况,对2010—2013年收集的临床腹泻样品,以针对PEDV-S基因N端序列的RT-PCR检测病原,并测序其中的41份样品的扩增序列,分析PEDV-S1基因型变异情况。临床检测结果表明:PEDV临床检出率由2010年的42.86%提高到2013年的70%以上,并且浙江省各地的检出率都在50%以上;一年中7至8月份检出率明显降低。PEDV-S1基因N端序列分析结果表明,临床检测株的S1基因与传统毒株PEDV CV777的S基因序列及中国最早检测到的基因序列亲缘关系较远,可能浙江省PEDV的流行株可能属于一个新的基因型。同时研究结果提示PEDV-S基因的变异可能是现有CV777毒株疫苗免疫保护力不佳的原因。
- 杜晓莉王一成吴润徐丽华袁秀芳李军星周晓丽
- 关键词：猪流行性腹泻S1基因
