费敏
- 作品数：11 被引量：4H指数：1
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- 环氧二十碳三烯酸在肾脏疾病的研究进展
- 2013年
- 环氧二十碳三烯酸（epoxyeicosatrienoicacids，EETs）是具有强大生物活性的内生脂质环氧化合物，具有舒张血管抗炎和调节细胞增殖‘等功能。但EETs的半衰期十分短，
- 费敏孙斯凡赵婷婷李平
- 关键词：环氧二十碳三烯酸肾脏疾病环氧化合物舒张血管EETS半衰期
- 突变型二氢生物蝶呤还原酶基因对氧化应激的影响
- 古艳婷孙斯凡赵婷婷张浩军朱斌董晞费敏李平
- EPHX2基因过表达质粒的构建及意义探讨
- 2014年
- 目的:构建LETO、OLETF大鼠EPHX2基因过表达重组质粒,观察其在人胚肾细胞(human embryonic kidney293T,HEK293T)中的表达,及对HEK293T细胞NF-κBp65 mRNA表达的影响。方法:提取LETO、OLETF大鼠肾脏组织总RNA,RT-PCR方法扩增编码EPHX2基因的cDNA,克隆至T-载体并测序,经亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,构建两型大鼠EPHX2过表达重组质粒,酶切鉴定并测序,采用磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞系。Western Blot方法检测EPHX2融合蛋白的表达,RT-PCR方法检测EPHX2基因过表达对HEK293T细胞NF-κBp65表达水平的影响。结果:(1)两个重组质粒均含有完整EPHX2 cDNA,测序证实OLETF型大鼠较LETO型大鼠EPHX2重组质粒有五个核苷酸位点的改变。(2)转染HEK293T细胞后,Western Blot证实融合蛋白成功表达;(3)TNF-α刺激增加HEK293T细胞中NF-κBp65mRNA表达;(4)EPHX2基因过表达促进TNF-α刺激后的HEK293T细胞中NF-κBp65 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:成功构建LETO型及OLETF型大鼠EPHX2过表达重组质粒(L-EPHX2/V5、O-EPHX2/V5),可在HEK293T细胞中过表达。为进一步探讨EPHX2基因在糖尿病肾病发生发展中的作用奠定了基础。
- 费敏李平赵婷婷孙斯凡古艳婷王华张浩军杨靖
- 关键词：重组质粒NF-ΚBP65糖尿病肾病
- 大鼠突变型ETFβ重组质粒的构建及鉴定
- 王华孙斯凡费敏李平
- 大鼠EPHX2基因重组质粒的构建及在293T细胞中的表达
- <正>背景:糖尿病肾病是糖尿病常见的微血管病变,在糖代谢紊乱与血流动力学改变的基础上,炎症机制是糖尿病肾病持续发展的关键因素。可溶性环氧化物水解酶(soluble epoxide hydrolase,sEH)由EPHX2...
- 费敏李平
- 文献传递
- sEH对糖尿病肾病进展的影响及中药干预作用的研究
- 目的:我们观察了不同程度肾损伤DN 大鼠肾组织中sEH 的表达,并探索柴黄益肾颗粒通过影响sEH 的表达而发挥肾保护作用的机制.方法:分别采用单侧肾切除合并STZ 诱导及高脂合并STZ 诱导不同程度肾损伤DN 大鼠模型....
- 费敏张浩军李平
- 大鼠EPHX2基因过表达对P65 mRNA表达的影响
- 目的：构建大鼠EPHX2基因的过表达重组质粒,转染至人胚肾293T细胞,检测其在细胞中的表达及对P65 mRNA水平表达的影响.方法：提取大鼠肾脏组织总RNA,应用RT-PCR方法扩增编码EPHX2基因的cDNA,克隆至...
- 费敏李平
- 关键词：重组质粒糖尿病肾病P65
- 大鼠EPHX2基因过表达对NF-κB p65 mRNA水平的影响
- 费敏李平
- sEH的表达与糖尿病肾病进展的相关性分析及中药干预作用的研究
- 近年来,可溶性环氧化物水解酶(Soluble epoxide hydrolase, sEH)作为心血管和肾脏疾病的治疗靶点受到关注。sEH的主要功能是催化水解具有强大生物学功能的环氧化合物-环氧二十碳三烯酸(Epoxye...
- 费敏
- 关键词：糖尿病肾病SEH炎症因子柴黄益肾颗粒重组质粒
- 文献传递
- 二氢生物喋呤还原酶参与调控HEK293T细胞自噬作用的初步研究被引量：4
- 2012年
- 目的探讨二氢生物喋呤还原酶(dihydropteridine reductase,QDPR)对HEK293T细胞自噬作用的影响。方法构建野生型QDPR和突变型QDPR重组质粒分别转染HEK293T细胞,并设空载体对照组。采用RT-PCR及Western blot方法检测空载体组,野生型QDPR组和突变型QDPR组自噬相关蛋白LC3和Beclin 1的表达量变化。结果 1)测序结果证实PCR扩增得到编码正常QDPR的cDNA序列正确以及突变的cDNA也在正确的位置突变;2)磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,野生型QDPR和突变型QDPR融合蛋白成功表达;3)RT-PCR结果显示,与对照组相比,野生型QDPR组LC3基因水平明显上调(P<0.05),突变型QDPR组LC3基因水平与对照组相比无统计学差异;与对照组相比,野生型和突变型组Beclin1基因水平无统计学差异;4)Western blot结果显示,与对照组相比,野生型QDPR组LC3-II和Beclin1的蛋白表达量明显上调(P<0.05),但LC3-I的蛋白表达量无统计学差异,突变型QDPR组与对照组相比LC3-I,II和Beclin1的蛋白表达量均没有统计学差异(P>0.05)。结论二氢生物喋呤还原酶能增强HEK293T细胞自噬相关基因LC3和Beclin 1的表达,提示其可能具有激活自噬作用的功能;二氢生物喋呤还原酶93位氨基酸的突变影响了其对细胞自噬作用的调控,降低了自噬标志分子LC3-I和Beclin1的基因表达。
- 古艳婷赵婷婷李平张浩军朱斌韩文兵董晞费敏孙斯凡
- 关键词：自噬LC3BECLIN1
