赵广存
- 作品数:9 被引量:29H指数:3
- 供职机构:广西大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国际科技合作重点项目计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 地衣芽孢杆菌GXN151的纤维素酶基因cel12A的序列分析及其在大肠杆菌中的表达被引量:4
- 2003年
- 地衣芽孢杆菌菌株GXN151的cel12A基因为783bp,可编码含261个氨基酸的羧甲基纤维素酶Cel12A,Cel12A的N末端第1~28氨基酸具典型的信号肽特征、第9~31氨基酸具跨膜功能域特征、第104~261氨基酸形成家族12糖基水解酶(glycosylhydrolase)功能域。将编码其第73~261氨基酸的DNA序列克隆到大肠杆菌表达载体pET30a(+)得表达质粒pGXN12A,用1mmol/LIPTG诱导处理JM109(DE3)/pGXN12A的培养液6hpGXN12A的表达量达到最高,在JM109(DE3)和BL21(DE3)pLysS中该表达蛋白质可分别占菌体胞内总蛋白的54.3%和20.9%。在含羧甲基纤维素的LA平板上JM109(DE3)/pGXN12A和BL21(DE3)pLysS/pGXN12A表现有较弱的羧甲基纤维素酶活性,说明重组的Cel12A的催化功能域具有独立的催化活性。包含体检测表明pGXN12A在JM109(DE3)中的表达产物大部分形成不溶性包含体。
- 刘永生冯家勋段承杰赵广存柏学亮张成刚唐纪良马庆生
- 关键词:地衣芽孢杆菌纤维素酶基因大肠杆菌
- 牛瘤胃未培养细菌中一个β-葡萄糖苷酶基因umbgl3A的克隆及鉴定被引量:20
- 2005年
- 通过构建牛瘤胃未培养细菌的宏基因组文库,共获得12000个克隆,文库外源DNA总容量为4.2×108bp,筛选得到九个表达β-葡萄糖苷酶活性的克隆,并对其中的一个表达β-葡萄糖苷酶活性的克隆pGXN1009进行亚克隆,将β-葡萄糖苷酶基因定位在4.3kb的片段上。测序结果表明在4.3kb的片段上有一个全长为1956bp的ORF,编码一个可能的β-葡萄糖苷酶基因um-bgl3A,其编码产物与一个来源于小鼠大肠未培养细菌的β-葡萄糖苷酶(GenBankAcessionNO:AAX16378.1)一致性为63%、相似性为79%;与哈氏噬纤维菌(Cytophagahutchinsonii)的β-葡萄糖苷酶(GenBankAcessionNO:ZP-00308419)的一致性为50%、相似性为67%。利用SMART软件对Umbgl3A结构组件预测表明,Umbgl3A包含一个家族3糖基水解酶(glycosylhydrolase)功能域和一个家族3C糖基水解酶功能域。遗传进化分析表明umbgl3A基因可能是来自牛瘤胃微生物噬纤维菌属未培养的一个种。
- 赵广存段承杰庞浩封毅许跃强莫新春唐纪良冯家勋
- 关键词:牛瘤胃宏基因组
- 未培养微生物纤维素酶基因资源的挖掘
- <正>纤维素是地球上最丰富的生物质(biomass)资源,全球每年通过光合作用产生的纤维素高达1.55×109吨,其中89%尚未被人类利用。纤维素的利用与转化对于解决世界能源危机、粮食短缺、环境污染等问题具有重要意义。纤...
- 冯家勋庞浩段承杰封毅许跃强张鹏赵广存莫新春唐纪良
- 文献传递
- 内切葡聚糖酶及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种内切葡聚糖酶及其编码基因与应用。本发明提供的一种内切葡聚糖酶,是具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质:1)序列表中的SEQ ID №:2;2)将序列表中SEQ ID №:2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基...
- 冯家勋段承杰赵广存普连仙冼亮庞浩唐纪良
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- 内切葡聚糖酶及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种内切葡聚糖酶及其编码基因与应用。本发明提供的一种内切葡聚糖酶,其氨基酸残基序列如序列表中的SEQID NO:2的氨基端的第20-552位氨基酸残基所示,或者是氨基酸残基序列如序列表中的SEQ ID NO:...
- 冯家勋段承杰赵广存普连仙冼亮庞浩唐纪良
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- 堆肥未培养微生物宏基因组文库的构建及纤维素酶基因的克隆、表达及产物鉴定
- 从环境微生物Metagenome文库中克隆基因是一个有效的获取新基因的途径。由于堆肥含有大量的腐殖酸及各种杂质,因而利用堆肥材料构建Metagenome 文库是一个大难题。我们通过联合使用PVPP 柱纯化和电洗脱的方法获...
- 庞浩段承杰封毅张鹏许跃强赵广存唐纪良冯家勋
- 关键词:堆肥宏基因组文库纤维素酶
- 文献传递
- 一种内切葡聚糖酶及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种内切葡聚糖酶及其编码基因与应用。本发明提供的一种内切葡聚糖酶,是具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质:1)序列表中的SEQ ID №:2;2)将序列表中SEQ ID №:2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基...
- 冯家勋段承杰赵广存唐子君曹旭唐纪良
- 文献传递
- 牛瘤胃未培养微生物纤维素酶基因的克隆、鉴定及表达
- 本研究通过构建牛瘤胃未培养微生物的宏基因组文库,共获得12 000个克隆,文库外源DNA总容量为4.2×108bp,筛选得到十个表达β-葡萄糖苷酶活性的克隆和十个表达β-1,4-内切葡聚糖酶活性的克隆,而且在十个表达β-...
- 赵广存
- 关键词:牛瘤胃未培养微生物宏基因组文库Β-葡萄糖苷酶纤维素酶木聚糖酶
- 文献传递