赵昀
- 作品数：12 被引量：9H指数：2
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划江苏省普通高校研究生科研创新计划项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 抗CD40单链抗体的慢病毒载体的构建和表达被引量：1
- 2012年
- 目的克隆大鼠抗小鼠的抗CD40激活型抗体的单链抗体(CD40-scFv),并构建可表达大鼠抗小鼠的抗CD40抗体的单链抗体(CD40-scFv)的重组慢病毒。方法采用RT-PCR法从分泌大鼠抗小鼠抗CD40激活型抗体的杂交瘤细胞株(FGK-115)中克隆VH和VL基因,用重叠延伸PCR法将VH和VL拼接在一起,构建抗CD40抗体的scFv基因,将CD40-scFv基因连接至PEGM-T克隆载体,限制性内切酶酶切及测序鉴定;构建含有大鼠抗小鼠的抗CD40激活型抗体的单链抗体(CD40-scFv)的慢病毒穿梭质粒,并与其它包装质粒一起通过磷酸钙法感染293T细胞;获得病毒颗粒并感染人慢性髓系白血病细胞MEG-01,检测其感染效率。结果含大鼠抗小鼠的抗CD40激活型抗体的单链抗体(CD40-scFv)的慢病毒穿梭质粒构建成功;通过磷酸钙感染293T细胞所得病毒上清可成功感染MEG-01细胞,流式细胞术检测阳性率可达96%。结论成功克隆了大鼠抗小鼠的抗CD40激活型抗体的单链抗体(CD40-scFv)基因,并建立其重组慢病毒表达系统,为后续的实验及应用研究工作奠定了基础。
- 文丽君赵李祥王征胡博赵昀刘海燕
- 关键词：CD40SCFV慢病毒载体
- AML1-ETO融合蛋白对BCL-2基因表达的影响被引量：1
- 2013年
- 本研究旨在观察AML1-ETO在白血病细胞中对于抗凋亡基因BCL-2表达的影响,探讨其在白血病发生中的作用。应用流式细胞术检测急性单核细胞白血病细胞株U937-WT、U937-Mock和经AML1-ETO基因转染的U937-A/E1-4的细胞凋亡率;使用免疫印迹法检测cleaved caspase-3蛋白的表达;荧光实时定量PCR检测转染细胞和对照组细胞以及AML-M2患者白血病细胞BCL-2 mRNA的表达;染色质免疫沉淀技术研究转染细胞中AML1-ETO与BCL-2基因启动子之间直接的相互作用情况。结果表明:AML1-ETO转染细胞的凋亡率明显增加,且检测到cleaved caspase-3蛋白的表达;转染了AML1-ETO的U937细胞系和具有AML1-ETO融合基因的AML-M2患者中,BCL-2的mRNA表达水平显著下调;转染细胞沉淀富集的AML1-ETO直接结合的DNA中含有BCL-2基因的启动子序列。结论:BCL-2是AML1-ETO的直接靶基因,AML1-ETO能下调BCL-2的表达。
- 庄文越李正祎赵昀岑建农庄文卓陈子兴
- 关键词：BCL-2基因表达
- 小鼠白细胞介素15慢病毒载体的构建和表达被引量：2
- 2010年
- 目的:克隆小鼠白细胞介素15(IL-15)基因,并构建可表达小鼠IL-15基因的重组慢病毒。方法:根据小鼠IL-15基因序列以及慢病毒穿梭载体相应的酶切位点设计合成PCR引物;提取小鼠脾脏总RNA,逆转录PCR扩增小鼠IL-15基因的编码区;克隆小鼠IL-15基因的编码区,并进行基因测序;构建含有IL-15基因的慢病毒穿梭质粒,并与其它包装质粒一起感染293T细胞;获得病毒颗粒并感染人慢性髓系白血病细胞MEG,Western Blot检测IL-15基因在MEG细胞中的表达。结果:含有小鼠IL-15基因编码区的慢病毒穿梭质粒构建成功,基因测序结果完全正确;含有小鼠IL-15基因的慢病毒载体包装成功;所得病毒上清可成功感染MEG细胞,流式细胞术检测阳性率可达98%;Western Blot结果证明小鼠IL-15基因在MEG细胞中正常表达。结论:成功扩增、克隆了小鼠IL-15基因,并建立其慢病毒表达系统,从而为后续的基础及应用研究工作奠定了基础。
- 胡博林丹丹张胤晟包光明单琳赵昀刘海燕
- 关键词：白细胞介素15慢病毒载体小鼠
- 抗癌荧光含糖银纳米团簇的制备方法
- 本发明公开了一种新型抗癌荧光含糖银纳米团簇的制备方法，其特征在于：1）先利用活性自由基聚合的方法制得结构规整可控的含糖聚合物，所述含糖聚合物的基本结构式如下：<Image file="DDA000041557422000...
- 陈高健陆伟陆嘉伟赵昀
- 文献传递
- 一种络合卟啉含糖光敏剂及其制备方法
- 本发明公开了一种络合卟啉含糖光敏剂及其制备方法，该方法步骤如下， 1 ）采用含糖单体、引发剂以及链转移剂进行可逆加成断裂链转移聚合反应，得到结构规整和分子量可控的含糖聚合物； 2 ）将步骤 1 ）中得到的含糖聚合物与卟啉...
- 陈高健陆嘉伟张卫东李军赵昀
- 文献传递
- RhoB抑制慢性粒细胞白血病细胞的生长被引量：2
- 2012年
- 目的:研究RhoB对慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞增殖能力的影响。方法:用PCR扩增RhoB编码区并构建几种RhoB脂类修饰突变体。以慢病毒为载体携带RhoB及其突变体在CML细胞中过表达后,检测细胞增殖能力,并分析细胞的周期进程。结果:过表达RhoB能抑制MEG-01细胞及CML患者CD34+细胞的增殖;脂类修饰缺失的RhoBC193G不能抑制CML细胞的增殖;单独进行法尼基(F)修饰和单独进行牻牛儿基牻牛儿基(GG)修饰的RhoB均可抑制CML细胞的增殖;过表达RhoB及其单种脂类修饰变体将CML细胞阻滞于G2/M期。结论:RhoB需要F或GG类型的脂类修饰才能抑制CML细胞的生长并将CML细胞阻滞于G2/M期。
- 姚红朱晓苏徐康萍周海侠赵昀
- 关键词：慢性粒细胞白血病RHOB增殖
- Gas2Δ171-313抑制K562细胞生长并增强其对伊马替尼的反应
- 2013年
- 目的:研究Gas2及其变体对慢性髓细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)K562细胞增殖的影响。方法:用PCR扩增Gas2编码区并构建两种Gas2变体(Gas2Δ171-313和Gas2Δ1-170)。以慢病毒为载体携带Gas2及变体到K562细胞中过表达,检测细胞增殖能力、细胞衰老及Calpain活性,并分析细胞周期。结果:过表达Gas2Δ171-313能显著抑制K562细胞增殖,而全长Gas2和Gas2Δ1-170对细胞增殖无显著影响;Gas2及其变体都对细胞周期无显著影响;Gas2Δ171-313可以显著提高细胞的Calpain活性,并促进细胞衰老;Gas2Δ171-313也能与伊马替尼协同性抑制K562细胞的集落生成能力。结论:Gas2Δ171-313能使K562细胞发生衰老类似的生长抑制,并与伊马替尼协同性抑制K562细胞的生长。
- 葛跃吴洁赵昀
- 关键词：慢性髓细胞白血病伊马替尼
- AML1-ETO真核表达载体的构建及对U937细胞增殖和分化的影响被引量：3
- 2011年
- 目的构建pcDNA3．1-AML1-ETO真核表达载体，并观察AMLI-ETO融合蛋白在U937细胞内的表达并检测其对细胞增殖与分化的影响。方法以原核表达载体pCMV5-AMLI—ETO为模板扩增AML1-ETO目的片段，将该基因重组于pcDNA3．1／V5-His-TOPO真核表达载体上，用脂质体转染技术将其导入U937细胞，经G418筛选获得稳定转染的克隆，PCR检测AML1-ETO基因的整合，RT—PCR及Westernblot检测AML1-ETOmRNA和蛋白的表达，用锥虫蓝拒染人工计数法观察细胞增殖活性，流式细胞术检测髓系分化抗原表达的变化，瑞特染色法观察细胞形态改变。结果pcDNA3．1-AML1-ETO经酶切鉴定及DNA测序证实序列完全正确，筛选出AMLI-ETO基因高表达的亚克隆，证实AML1-ETO基因稳定转染到U937细胞中并得到表达；转染细胞增殖受抑（P〈0．05），髓系分化抗原CD11b表达阳性率[（4．17±0．31）％]低于转染空载体和未转染对照组[（11．40±0．17）％、（11．03±0．15）％]（P〈0．001），形态呈低分化表现。转染细胞经TPA处理后，CD11b表达无明显变化（P〉0．05）。结论成功构建pcDNA3．1-AML1-ETO表达载体，并在真核细胞中得到了正确表达，AML1-ETO基因能抑制U937细胞的增殖与分化，为进一步研究该基因致白血病的机制奠定了基础。
- 庄文越陈子兴祁小飞岑建农沈宏杰赵昀
- 关键词：AML1-ETO白血病抗原CD11BU937细胞
- 一种络合卟啉含糖光敏剂及其制备方法
- <B>本发明公开了一种络合卟啉含糖光敏剂及其制备方法，该方法步骤如下，</B> <B>1</B> <B>）采用含糖单体、引发剂以及链转移剂进行可逆加成断裂链转移聚合反应，得到结构规整和分子量可控的含糖聚合物；</B> <...
- 陈高健陆嘉伟张卫东李军赵昀
- 新型抗癌荧光含糖银纳米团簇的制备方法
- 本发明公开了一种新型抗癌荧光含糖银纳米团簇的制备方法，其特征在于：1）先利用活性自由基聚合的方法制得结构规整可控的含糖聚合物，所述含糖聚合物的基本结构式如下：<Image file="DDA000041557422000...
- 陈高健陆伟陆嘉伟赵昀
- 文献传递
