邢海霞
- 作品数：2 被引量：17H指数：2
- 供职机构：昆明医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：云南省科技条件平台建设计划项目云南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HSP70多肽复合物修饰DCs疫苗抗胰腺癌荷瘤小鼠的实验研究被引量：14
- 2009年
- 目的:探讨负载热休克蛋白70多肽复合物(HSP70-PC)抗原的树突状细胞(DCs)疫苗对胰腺癌荷瘤小鼠的免疫治疗作用。方法:采用低渗裂解、ConA-Sepharose亲和层析及ADP-Agarose亲和层析法,从小鼠胰腺癌(MPC83)肿瘤组织中纯化HSP70-PC,修饰小鼠骨髓来源的树突状细胞(DCs),制备树突状细胞HSP70多肽肿瘤疫苗,用MTT法检测混合淋巴细胞反应(MLR)中HSP70-PC致敏DC对CTL的增殖及活化效果;建立MPC83荷瘤小鼠模型,观察树突状细胞HSP70多肽肿瘤疫苗对荷瘤小鼠治疗的效果和小鼠存活期。结果:经上述方法分离、纯化获得了较高纯度的HSP70-PC蛋白质;HSP70-PC在1.5～2.0μg/ml范围内可达到刺激树突状细胞最强效果,用HSP70-PC修饰的DCs能增强T细胞的增殖和活化能力;应用树突状细胞HSP70多肽肿瘤疫苗治疗荷瘤小鼠能显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,延长荷瘤小鼠存活期。结论:采用低压亲和层析柱可从胰腺癌瘤块中获得较高纯度HSP70多肽复合物,其修饰的DCs疫苗用于荷瘤小鼠免疫治疗有显著疗效,为临床胰腺癌生物免疫治疗奠定基础。
- 张晓娟董坚吴振林洪敏邢海霞
- 关键词：胰腺癌树突状细胞肿瘤免疫
- 乳腺癌细胞高亲和融合多肽蛋白的表达以及靶向转运被引量：3
- 2009年
- 目的探究乳腺癌特异性多肽携带外源生物分子进入特定肿瘤细胞的功能。方法编码乳腺癌细胞特异性多肽(PⅠ)的序列插入质粒pGEX-2T,构建原核表达载体pGEX-2T-PⅠ,表达融合蛋白GST-PⅠ,亲和层析纯化,Western-blot鉴定。GST-PⅠ与人乳腺癌细胞MBA-MB-231体外共培养,免疫荧光检测PⅠ多肽携带GST蛋白的跨膜功能。结果成功构建pGEX-2T-PⅠ原核表达载体,并在大肠杆菌中表达。融合蛋白占细菌总蛋白量的30%左右,纯化后蛋白纯度约为85%。免疫荧光检测显示,GST-PⅠ能特异性进入MDA-MB-231细胞。结论乳腺癌特异性多肽PⅠ能够介导融合蛋白GST-PⅠ穿过细胞膜进入MDA-MB-231细胞内。
- 刘为青董坚赵德萍洪敏杨军邢海霞
- 关键词：乳腺癌基因治疗
