陈寅
- 作品数：11 被引量：60H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院蚕业研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 宿主域扩大的重组救活昆虫杆状病毒表达载体的构建及外源基因的表达被引量：15
- 2002年
- 通过克隆的家蚕核多角体病毒解旋酶基因DNA与重组救活可线性化的苜蓿尺蠖核多角体病毒基因工程载体病毒 (BacPAK6 )DNA在昆虫细胞中发生重组 ,经累代筛选获得了既可感染家蚕又可感染秋粘虫细胞Sf 2 1的宿主域扩大的昆虫杆状病毒表达载体 (HyBacPAK6 )。HyBacPAK6DNA经Bsu36Ⅰ酶切后与含植酸酶基因的转移载体pVL1393 phy在家蚕细胞中重组后 ,通过蓝白斑筛选发现重组率可达 90 %以上。然而以杂交病毒为载体的外源基因表达量仅为以BmNPV为载体病毒的表达量的 2 0 %左右。分析认为HyBacPAK6可用于表达一些对蚕体有害的外源基因。
- 易咏竹陈寅张志芳何家禄秦俭
- 关键词：外源基因表达家蚕昆虫杆状病毒表达系统
- 纳豆激酶基因在家蚕生物反应器中的表达被引量：11
- 2003年
- 纳豆由枯草杆菌(Bacillussubtilis)或纳豆菌(Bacillusnatto)发酵大豆而成.1987年,日本学者须见洋行等首次从传统食品纳豆中发现了一种具有溶栓活性的酶制剂,并命名为纳豆激酶(nattokinase,NK).
- 陈寅林旭瑷张志芳易咏竹何家禄吴祥甫
- 关键词：纳豆激酶家蚕生物反应器抗栓药物
- 半胱氨酸蛋白酶基因在家蚕杆状病毒表达系统中的表达被引量：2
- 2003年
- 为了探讨杆状病毒的致病机理、改善杆状病毒表达系统的表达效率 ,将来源于家蚕核型多角体病毒ZJ8株的半胱氨酸蛋白酶 (cystenineprotease,CP)基因克隆到转移载体pVL 1393上 ,获得重组转移载体pVL cp ,与线性化的Bm BacPAK6病毒DNA共转染家蚕Bm 5贴壁细胞。通过蓝白斑筛选、纯化后得到的重组病毒经PCR鉴定证明 ,cp基因已被正确导入 ,注射感染家蚕 5龄幼虫 12 0h后表达产物活性达到最高。对表达产物进行SDS PAGE及酶活力分析 ,检测到半胱氨酸蛋白酶在家蚕生物反应器中的表达 ,其表达量约为 16 0 0U/mL。
- 林旭瑷林旭瑷李卫国陈寅易咏竹张志芳
- 关键词：半胱氨酸蛋白酶致病机理生物反应器生物杀虫剂
- 应用家蚕生物反应器生产appA植酸酶
- 从猪粪便中分离并筛选出高效生产appA植酸酶的大肠杆菌菌株.通过PCR方法从该菌株基因组中克隆了植酸酶基因appA,测序结果显示该基因全长1299个核苷酸.将appA基因克隆到转移载体pVL1393上,通过与线性化Bm-...
- 张志芳陈寅朱中泽何家禄
- 关键词：植酸酶大肠杆菌生物反应器基因克隆
- appA植酸酶基因与纳豆激酶基因的克隆与表达研究
- 该实验从猪粪中筛选出一个高产植酸酶的E.coli菌株,根据Dassa等报道的序列设计一对引物通过PCR方法扩增了appA基因.由appA植酸酶在家蚕生物反应器中的超量表达以及appA植酸酶本身所具有的酶学特性推断,家蚕表...
- 陈寅
- 关键词：植酸酶纳豆激酶纤维蛋白蛋白酶活性
- 文献传递
- 杆状病毒表面展示系统的研究进展被引量：4
- 2004年
- 杆状病毒表面展示系统是近几年发展起来的一种新的真核展示系统 ,通过在病毒衣壳蛋白gp6 4插入外源肽、二者融合表达或与特异性的锚定部位结合 ,在病毒表面进行融合表达而筛选出目的活性肽或蛋白。可用来展示需糖基化、二硫键异构化等翻译后修饰才表现功能活性的复杂真核蛋白及构建多肽文库、抗体库等。本文简述了该技术的原理、研究进展、应用及发展前景等。可以预见 。
- 林旭瑷陈寅张志芳何家禄沈桂芳
- 关键词：杆状病毒真核生物生命科学
- 家蚕翅原基的一些发育规律研究被引量：10
- 2004年
- 为进一步解明家蚕的生长发育机制 ,调查了家蚕 5龄幼虫及蛹期翅原基的大小和形态变化 :翅原基在 5龄前期生长缓慢 ,变态前生长最快 ,2～ 3d及 8～ 11d为形态变化最大的两个时期 ;蛹期翅芽基本不变 ,3d始见初生鳞毛 ,5d时已经呈浓密的毛状 ,8d时翅面鳞毛发育成柳叶状 ,之后逐渐出现分叉 ,9d花纹清晰可见 ,化蛾后翅面鳞片呈现棕榈叶状。进行翅原基摘除和异位移植发现 :4个翅原基全部摘除后家蚕仍能正常生长并发育成蛹和具有交配及产卵能力的蛾 ,表明家蚕血球和造血器官有很强的再生能力 ,家蚕血球细胞的生成可能具有更复杂的机制 ,由此证明了家蚕翅原基异位移植的可行性。
- 周庆祥易咏竹张志芳陈寅何家禄吕鸿声
- 关键词：家蚕发育规律异位移植造血器官
- 利用家蚕生物反应器生产广适性、高比活植酸酶和酸性磷酸脂酶的方法
- 本发明提供一种利用重组杆状病毒在昆虫体内表达、生产广适性、高比活植酸酶appA方法，包括：广适性、高比活植酸酶基因与杆状病毒载体进行重组；用重组病毒感染昆虫宿主；被感染的昆虫宿主进行植酸酶和酸性磷酸脂酶的表达；收集含植酸...
- 张志芳何家禄姚斌周亚竟陈寅易咏竹
- 文献传递
- 猪带绦虫45W-4B基因在家蚕细胞中的表达被引量：5
- 2006年
- 猪带绦虫45W基因已被认为是预防猪囊虫病的基因工程疫苗候选基因之一。其中4B基因是45W基因家族中高度保守的一个成员(以下称45W-4B)。本试验将重组于pGEM-3Z载体上的4B基因转载到pVL1393转移载体中,通过鉴定获得重组质粒pVL1393-4B,然后将重组质粒与BmNPV病毒共转染,筛选出重组BmNPV-4B重组病毒,用该重组病毒感染Bm细胞,收集细胞上清,SDS-PAGE电泳鉴定表达蛋白,并经Westernblot检测表明该蛋白能识别囊虫病人(猪)阳性血清,45W-4B蛋白的成功表达对进一步研究45W蛋白的结构和功能以及开发高效猪囊虫基因工程疫苗打下了基础。
- 余招锋才学鹏张志芳于三科陈寅林旭瑷
- 关键词：猪囊虫家蚕
- 利用家蚕生物反应器生产广适性、高比活植酸酶和酸性磷酸脂酶的方法
- 本发明提供一种利用重组杆状病毒在昆虫体内表达、生产广适性、高比活植酸酶appA方法，包括：广适性、高比活植酸酶基因与杆状病毒载体进行重组；用重组病毒感染昆虫宿主；被感染的昆虫宿主进行植酸酶和酸性磷酸脂酶的表达；收集含植酸...
- 张志芳何家禄姚斌周亚竟陈寅易咏竹
- 文献传递
