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陈德胜

作品数：65 被引量：599H指数：14
供职机构：南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫控制重点开放实验室更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 48篇期刊文章
  • 12篇会议论文
  • 1篇学位论文

领域

  • 55篇农业科学
  • 12篇生物学
  • 3篇医药卫生

主题

  • 50篇病毒
  • 20篇基因
  • 19篇传染
  • 19篇传染性
  • 19篇传染性支气管...
  • 17篇支气管炎病毒
  • 17篇传染性支气管...
  • 11篇克隆
  • 11篇S1基因
  • 10篇圆环病毒
  • 10篇猪圆环病毒
  • 9篇蛋白
  • 9篇鸡传染性
  • 9篇鸡传染性支气...
  • 7篇脑炎病毒
  • 7篇基因克隆
  • 7篇鸡传染性支气...
  • 6篇原核表达
  • 6篇脑炎
  • 5篇蛋白基因

机构

  • 61篇南京农业大学
  • 5篇上海交通大学
  • 5篇中国农业大学
  • 3篇江苏省农业科...
  • 3篇河南科技学院
  • 3篇沈阳农业大学
  • 3篇郑州牧业工程...
  • 3篇中国农业科学...
  • 2篇宁夏大学
  • 2篇上海市农业科...
  • 2篇江苏沿海地区...
  • 2篇南京出入境检...
  • 1篇青岛农业大学
  • 1篇新乡医学院
  • 1篇河南农业大学
  • 1篇吉林农业大学
  • 1篇中国疾病预防...
  • 1篇北京市兽医卫...

作者

  • 61篇陈德胜
  • 44篇陈溥言
  • 17篇芦银华
  • 16篇潘杰彦
  • 16篇戴亚斌
  • 15篇曹瑞兵
  • 10篇谈国蕾
  • 10篇蔡宝祥
  • 9篇郑其升
  • 9篇周斌
  • 8篇刘兴友
  • 8篇黄伟坚
  • 8篇张雪莲
  • 7篇姜焱
  • 5篇华修国
  • 5篇张晓勇
  • 4篇范伟兴
  • 4篇刘梅
  • 4篇徐学清
  • 4篇钱莺娟

传媒

  • 14篇中国病毒学
  • 6篇南京农业大学...
  • 6篇病毒学报
  • 5篇中国兽医学报
  • 3篇中国兽医科技
  • 3篇生物工程学报
  • 2篇中国畜牧兽医...
  • 2篇中国畜牧兽医...
  • 2篇中国畜牧兽医...
  • 2篇中国畜牧兽医...
  • 1篇中国兽医杂志
  • 1篇微生物学报
  • 1篇畜牧与兽医
  • 1篇中国人兽共患...
  • 1篇厦门大学学报...
  • 1篇国外医学（微...
  • 1篇动物医学进展
  • 1篇畜牧兽医学报
  • 1篇广西农业生物...
  • 1篇中国预防兽医...

年份

  • 1篇2009
  • 3篇2007
  • 3篇2005
  • 10篇2004
  • 18篇2003
  • 13篇2002
  • 6篇2001
  • 7篇2000
共 65 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
表达鸡传染性支气管炎病毒SD/97/01株S1蛋白的重组杆状病毒的构建被引量：7
2002年
采用BAC TO BAC 杆状病毒表达载体系统构建了表达鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)呼吸型毒株SD/ 97/ 0 1S1蛋白的重组杆状病毒 .含SD/ 97/ 0 1株S1基因的重组质粒pMDSD970 1S1用BamHI和SalI双酶切后 ,回收目的片段并克隆到杆状病毒转座载体pFASTBAC HTa中多角体基因启动子的下游 ,筛选出重组转座质粒pFASTSD970 1S1并转化大肠杆菌DH10 BAC 后 ,获得重组穿梭质粒rBacmidSD970 1S1.用重组穿梭质粒DNA转染昆虫Sf9细胞 ,获得了含SD/ 97/ 0 1S1基因的重组杆状病毒rAcSD970 1S1.重组病毒感染Sf9细胞后 ,用SDS PAGE、Westernblot和IFA对细胞表达产物进行检测和分析 .结果表明 :构建的重组杆状病毒能够在昆虫细胞中表达SD/ 97/ 0 1的S1蛋白 ,该蛋白具有天然蛋白的抗原性 .
戴亚斌陈德胜丁铲潘杰彦刘兴友芦银华刘梅陈溥言蔡宝祥
关键词：传染性支气管炎病毒S1基因S1蛋白基因重组
猪α1-干扰素的基因改造与高效原核表达被引量：29
2004年
poIFN α1基因中含有大量的大肠杆菌稀有密码子 ,为了获得高表达 ,使用了大肠杆菌的偏爱密码子 ,人工合成了poIFN α1成熟蛋白编码基因。在保留编码蛋白序列的同时 ,使其 5′端A +T的含量增加到最大限度 ,并将其终止密码子改为TAA。将合成的poIFN α1成熟蛋白编码基因插入原核单纯表达载体pRLC中 ,转化大肠杆菌DH5α。实现了poIFN α1在大肠杆菌中的高效表达 ,表达产物以包涵体形式存在。纯化的包涵体经含DTT的 6mol L盐酸胍的变性液溶解及含GSH GSSG的复性液复性处理 ,复性后的表达产物浓缩后经凝胶层析纯化 ,细胞病变抑制法测定表明 ,重组poIFN α1具有较高的抗病毒活性 ,约为 6 4x10 6 u mg。
曹瑞兵徐学清周斌陈德胜陈溥言
关键词：基因原核表达大肠杆菌包涵体抗病毒活性
流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白基因在原核细胞中的高效表达及其表达产物的抗原性分析被引量：6
2003年
目的　获得JEVE蛋白基因并使其在E coli中高效表达 ,以研究其抗原活性 ,为进一步研制ELISA早期诊断试剂盒奠定基础。方法　根据已发表的JEVSA - 14 - 14 - 2减毒株序列 ,设计一对特异性引物 ,通过RT -PCR扩增出E蛋白基因的cDNA片段 ,并将其克隆入 pET - 32a(+)表达载体中 ,构建重组融合表达载体pET -E ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)后 ,利用IPTG诱导获得高效表达。结果　扩增的E蛋白基因片段长 1113bp ,编码 371个氨基酸残基 ,该基因片段与国内发表的减毒株SA14 - 14 - 2碱基序列同源性为 10 0 %。表达产物分子量约为 6 2kD ,经Westernblotting分析表明表达产物具有较好的抗原性。结论　通过序列分析表明 ,我国的JEVSA - 14 - 14 - 2减毒株未发生基因突变。表达产物的稳定高效表达及其抗原特异性分析为今后ELISA早期诊断试剂盒的研制提供了依据。
杨耀武齐香荣陈德胜何孔旺陈溥言沈国顺
关键词：流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白原核细胞抗原性
猪伪狂犬病病毒GB株蛋白激酶(PK)基因的克隆及序列分析比较
2004年
以伪狂犬病病毒GB株细胞培养物为模板,用PCR方法扩增蛋白激酶(PK)基因,对其进行了克隆、序列测定,并与PRVNIA-3株、Ka株和其他α-疱疹病毒进行了同源性比较。结果显示:所扩增的PK基因片段长1396bp,该片段包含一个开放阅读框(ORF),长1005bp,编码由334个氨基酸组成的蛋白质。与NIA-3株及Ka株的核苷酸同源性为98.4%和97.5%,基因编码区氨基酸序列的同源性为98.2%和96.4%。具有真核细胞丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶氨基酸亚结构域特征序列,而且α-疱疹病毒PK基因具有一些特征性的、共有的氨基酸序列。为今后研究PK基因的功能和构建PK缺失株奠定了基础。
黄伟坚陈德胜姜焱芦银华张雪莲陈溥言
关键词：伪狂犬病毒蛋白激酶PCR扩增
IBV青岛腺胃分离株S1纤突蛋白基因的克隆与鉴定被引量：2
2000年
参考Genebank发表的传染性支气管炎病毒 (IBV)S1纤突蛋白基因序列 ,自行设计合成了 1对引物 ,对IBV青岛腺胃分离株 (SD/97/0 2 )RNA进行RT PCR扩增。产物经琼脂糖凝胶电泳分析 ,呈现 1条 16 5 7bp的条带 ,将其克隆入pMD18 T载体中 ,并进行序列测定 ,证实为S1基因。将此重组质粒命名为pMDQXS1。
潘杰彦陈德胜戴亚斌陈溥言
关键词：鸡传染性支气管炎病毒基因克隆
应用间接免疫荧光试验检测猪圆环病毒抗体被引量：81
2002年
用猪肾传代细胞系PK 15增殖猪圆环病毒 2型 (PCV 2 )毒株制备抗原 ,建立了检测PCV抗体的间接免疫荧光试验 (IFA)。应用该方法对 64份临床送检血清样品进行了检测。结果 ,3 8份血清呈现PCV抗体阳性 (5 9% )。IFA方法的建立为临床上进行PCV流行病学调查及相关疾病的诊断提供了另一种检测手段。
芦银华谈国蕾华修国陈德胜陈溥言
关键词：间接免疫圆环病毒抗体
猪γ干扰素的基因克隆、改造、表达及活性测定被引量：38
2003年
提取经ConA诱导培养的猪外周血白细胞总RNA ,RT -PCR扩增出猪IFN -γ基因并克隆到pGEM -T -easy载体 ,测序结果表明扩增片段是含有信号肽的猪IFN -γ的完整基因。设计 1对引物亚克隆猪IFN -γ成熟蛋白基因并对其5′端前 2个稀有密码子进行大肠杆菌偏嗜性改造。经测序鉴定后插入原核表达载体pRLC ,并实现在大肠杆菌中的高效表达。表达产物以包涵体形式存在 ,经 7mol·L-1盐酸胍的变性液溶解及 0 5mol·L-1盐酸胍复性液复性处理 ,表达产物进行脱盐、凝胶层析纯化。细胞病变抑制法测定结果表明 ,重组猪IFN -γ具有较高的干扰素活性 ,约为 4 5× 10 6U·mg-1。
曹瑞兵周斌陈德胜陈溥言
关键词：猪Γ干扰素基因克隆基因改造基因表达活性
用马立克氏病病毒强毒的BamH-L片段核酸鉴定血清1型毒株
2001年
马立克氏病病毒 (MDV) GA强毒株的 Bam H - L 片段 DNA全长为 2 892 bp,G+C比率为 5 5 .91%。用内切酶将其亚克隆为 6个片段 :Bam H - Pst 、Pst - Pst 、Pst - Cla 、Cla - Sm a 、Sm a - Sma 和 Sm a - Bam H 。用地高辛标记 L 片段 DNA或者分别标记其 6个亚片段核酸 ,通过斑点杂交试验都可将 MDV血清 1型毒株与 2型和 3型的毒株区分开来 ,应用 PCR方法可获得相同结果。但 PCR方法更敏感、更快捷。结果表明 ,MDV GA强毒株的Bam H - L片段 DNA对 MDV血清
陈溥言李运敏陈德胜张雪莲魏荣潘杰彦戴亚斌范伟兴姜焱丁巧玲
关键词：马立克氏病病毒
猪α1-干扰素全基因大肠杆菌偏嗜性密码子改造及高效原核表达
干扰素(interferon,IFN)是一类具有抗病毒、抗肿瘤和免疫激活功能的细胞因子。IFN可分为两个型,IFN-α多基因家族属于Ⅰ型干扰素,目前已知人类IFN-α可分为2个亚型,20多种。IFN-α因具有显著的抗病毒...
曹瑞兵王旭东王敏秀郑其生李学仁陈德胜陈溥言
文献传递
猪圆环病毒2型分离毒株全基因组的克隆及序列分析被引量：34
2003年
根据GenBank中猪圆环病毒 2型 (PCV 2 )基因序列 ,设计两对特异性引物 ,用PCR方法从接种疑似PMWS仔猪病料的细胞中分段扩增 2个分离毒株全基因组。将扩增片段克隆入 pGEM Teasy载体 ,筛选获得含有相应片段的阳性重组质粒。对质粒中的插入片段进行测序拼接 ,获得 2株均为 176 8bp的全基因组序列。应用DNAstar序列分析软件 ,对所测PCV 2序列与GenBank中的国内外PCV毒株进行同源性比较 ,并绘制系统发生树 ,结果发现 :所测两毒株之间的核苷酸序列同源性极高 ,可达 99 8% ,亲缘关系密切 ;与PCV 2参考毒株的同源性介于95 3%～ 99 7%之间 ,其中与美国的一株PCV 2同源性最高 ,分别为 99 5 %和 99 7% ,亲缘关系很近 ;与国内两分离株同源性分别为 96 4%和 98 8%～ 98 9% ;与PCV 1参考毒株同源性仅为 77 1%～ 77 5 %。
芦银华华修国陈德胜黄伟坚戴亚斌谈国蕾陈溥言
关键词：猪圆环病毒PCR
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