马建霞
- 作品数：10 被引量：24H指数：3
- 供职机构：复旦大学附属华东医院消化内科更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金连云港市卫生局科研项目江苏省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ^125Ⅰ粒子短时低剂量率照射对胰腺癌Capan-2细胞神经浸润的影响被引量：1
- 2013年
- 目的 观察^125I粒子短时低剂量率照射对胰腺癌Capan-2细胞神经浸润的影响,并探讨其分子机制.方法 建立胰腺癌Capan-2细胞和大鼠背根神经节（DRG）共培养及Capan-2或DRG单培养模型.通过125I粒子低剂量率照射平板对3种模型进行照射,以相应未照射模型作为对照.倒置显微镜下观察癌细胞、DRG的生长,图像分析软件计算神经突和癌细胞集落占据的表面积,ELISA法检测细胞培养上清液和基质胶溶解液中神经生长因子（NGF）及转化生长因子α（TGF-α）浓度,RT-PCR法检测胰腺癌Capan-2细胞神经营养因子-3（NT-3）mRNA表达.结果 共培养模型中DRG发出的神经突向癌细胞定向、集中生长,而癌细胞沿神经突的方向生长.经125I粒子照射后这种定向、集中和互逆的生长受到一定程度的抑制.共培养组第5天所增加的神经突表面积为290.15±12.08,较DRG单培养组的124.83±6.96显著增加（P＜0.01）,经照射后的神经突表面积减少到201.53±12.20（P ＜0.01）;所增加的Capan-2细胞表面积为300.47±12.99,较Capan-2细胞单培养组的199.30±8.60显著增加（P＜0.01）,经照射后的Capan-2细胞表面积减少到202.35±7.97 （P ＜0.01）.共培养组不表达NT-3mRNA,经照射后NT-3mRNA表达量为0.68±0.04（P ＜0.05）.共培养组培养上清液中NGF及TGF-α浓度分别为（27.56 ±13.73）、（40.86±20.73） ng/ml,经照射后分别升高到（94.98±33.80）、（157.54±83.76） ng/ml,差异有统计学意义（P＜0.05或＜0.01）.共培养组基质胶溶解液中NGF及TGF-α浓度分别为（60.42 ±33.03）、（64.39±21.52） ng/ml,经照射后分别升高到（132.52±53.01）、（138.38±83.58） ng/ml,其中NGF的差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 125I粒子短时低剂量率照射可以抑制胰腺癌和神经的交互作用,其机制可能与癌细胞促神经浸润介质NGF、TGF-α和NT-3等表达上调有关.
- 司佩任路筝刘岩马建霞吴洪玉李兆申
- 关键词：胰腺肿瘤碘同位素小剂量照射肿瘤浸润
- 靶向重组腺病毒介导Hsp70基因表达对大鼠胰腺癌移植瘤的抑制作用被引量：2
- 2012年
- 目的:观察重组腺病毒Ad5-pCEA-Hsp70介导的Hsp70基因表达对大鼠胰腺癌移植瘤生长的影响,并分析其相关机制.方法:建立大鼠胰腺癌皮下移植瘤模型,随机分为3组,分别给予Ad5-pCEA-Hsp70、Ad5-control以及PBS进行治疗.对比不同时间点3组肿瘤大小,评价抑瘤效果:通过ELISA的方法检测外周血Hsp70蛋白含量及细胞因子INF-γ、TNF-α、IL-6的含量;取动物的移植瘤常规HE染色,观察淋巴细胞浸润情况;分离动物脾脏单核细胞,通过流式细胞仪检测CD83+细胞比例,并观察脾淋巴细胞对体外培养的大鼠胰腺癌细胞的杀伤能力.结果:治疗后第4、6、8周,Ad5-pCEA-Hsp70组肿瘤体积分别与Ad5-control组及PBS组相比(724.4mm3±81.6mm3vs901.3mm3±103.9mm3、987.5mm3±126.0mm3;681.3mm3±64.9mm3vs1270.6mm3±131.6mm3、1398.5mm3±193.0mm3;648.0mm3±65.9mm3vs1487.0mm3±243.0mm3、1660.0mm3±167.0mm3),差异均具有统计学意义(均P<0.01).Ad5-pCEA-Hsp70组动物外周血Hsp70蛋白及细胞因子INF-γ、TNF-α、IL-6的含量均显著高于Ad5-control组和PBS组(均P<0.01).HE染色发现,与Ad5-control组和PBS组相比,Ad5-pCEA-Hsp70组有较多的淋巴细胞浸润.经流式细胞仪检测,Ad5-pCEA-Hsp70组脾单核细胞中CD83+细胞比例显著高于Ad5-control组及PBS组(10.8±1.3%vs5.1±0.6%、4.8±0.6%;均P<0.01).脾淋巴细胞介导的CTL实验中,当效靶细胞比为1:1时,3组动物之间并无统计学差异(P>0.05),但随着效靶细胞比的增加,Ad5-pCEA-Hsp70组对胰腺癌细胞的杀伤能力较Ad5-control组和PBS组明显增加(P<0.05,P<0.01).结论:重组腺病毒Ad5-pCEA-Hsp70介导的Hsp70基因表达对大鼠胰腺癌动物模型的肿瘤生长具有抑制作用,其机制与促进树突状细胞(dendritic cells,DC)的成熟、诱导细胞因子INF-γ、TNF-α、IL-6的分泌、促进淋巴细胞浸润有关.
- 孙运良徐灿苏长青马建霞高军满晓华李兆申
- 关键词：热休克蛋白70重组腺病毒胰腺癌
- p38MAPK信号通路在TLR4促进胰腺癌血管生成中的作用被引量：6
- 2017年
- 目的探讨Toll样受体-4(TLR4)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路在胰腺癌血管生成中的作用。方法以脂多糖(LPS)、TLR4-siRNA及p38 MAPK信号通路阻断剂SB203580分别作用于体外培养的胰腺癌PANC-1细胞,Western blot检测TLR4、血管内皮生长因子(VEGF)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38)蛋白表达。收集各种因素处理后的PANC-1细胞培养液,观察其对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移和管腔形成的影响。结果 LPS组的HUVECs增殖率、迁移数目和管腔形成个数分别为(139.2±12.6)%、48.1±9.1和47.8±9.6,均显著高于对照组(P<0.05)。TLR4-siRNA组的HUVECs增殖率、迁移数目和管腔形成个数分别为(60.2±8.7)%、31.3±4.5和17.2±3.3,均显著低于对照组(P<0.01);SB203580组的HUVECs增殖率[(79.6±8.9)%]、迁移数目(21.6±4.3)和管腔形成个数(23.5±4.3)均较对照组显著减少(P<0.05);且TLR4-siRNA+LPS、B203580+LPS组的HUVECs增殖率、迁移数目和管腔形成个数均分别显著低于LPS组(P<0.01)。与对照组相比,LPS组VEGF、p-p38蛋白表达均明显增加,TLR4-siRNA组、SB203580组TLR4、VEGF、p-p38蛋白表达明显减少;且TLR4-siRNA+LPS组、SB203580+LPS组VEGF、p-p38表达较LPS组明显减少。结论 TLR4可促进胰腺癌的血管生成,其机制与激活p38 MAPK信号通路、促进VEGF表达有关。
- 孙运良马建霞满晓华吴红玉
- 关键词：TOLL样受体4胰腺肿瘤血管生成
- 雷公藤内酯醇对胰腺癌PANC1细胞Toll样受体4／核因子-κB信号通路的影响被引量：7
- 2013年
- 目的探讨雷公藤内酯醇（TP）对人胰腺癌PANC1细胞株侵袭能力的影响及其与Toll样受体4／核因子．KB（TLR4／NF-KB）信号通路的关系。方法将PANC1细胞分为亲本细胞组、TP组、脂多糖（LPS）组和TP＋LPS组。TP组培养液中加入50ng／ml的TP，LPS组加入μg／ml的LPS，TP＋LPS组先用50ng／ml的TP处理2h，再加入μg／ml的LPS。各组细胞均常规培养24h。采用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测TLR4、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA和蛋白的表达，双荧光素酶报告基因系统检测NF-KB活性，Transwell小室检测细胞侵袭能力。结果亲本组、LPS组、TP组、TP＋LPS组的TLR4mRNA表达量分别为0．41±0．06、0．46±0．10、0．20±0．04和0．25±0．06，TLR4蛋白表达量分别为0．55±0．06、0．60±0．03、0．18±0．04和0．13±0．00；NF—KB活性分别为13．0±3．0、31．6±4．3、7．3±1．5和10．8±2．1；穿膜细胞数分别为（56．8±8．6）、（104．5±12．8）、（32．0±5．7）和（46．8±7．0）个；MMP-9mRNA表达量分别为0．36±0．05、0．58±0．07、0．18±0．03和0．30±0．004，MMP-9蛋白表达量分别为0．31±0．04、0．53±0．08、0．11±0．02和0．15±0．00。LPS组TLR4mRNA和蛋白表达量与亲本组差异无统计学意义，但NF-KB活性、穿膜细胞数、MMP-9mRNA和蛋白表达量显著高于亲本组（t值分别为8．654、7．593、6．655、4．982，P值均〈0．01）。rrP组TLR4mRNA和蛋白表达量、NF·KB活性、穿膜细胞数、MMP-9mRNA和蛋白表达量均显著低于亲本组（t值分别为-7．609、-9．948、-4．176、-5．915、-8．179、-9．948，P值均〈0．01）。TP＋LPS组TLR4mRNA和蛋白表达量、NF-KB活性、穿膜细胞数、MMP-9mRNA和蛋白表达量均显著低于LPS组（t值分别为-4．437、-14．805、-10．506、-9．700、-9．055、-8．932，P值均〈0．01）。结论TP具有抑制胰腺癌细胞侵袭的作用，其机制与抑制TLR4／NF-KB信号通�
- 马建霞孙运良王一倩童依丽于晓峰
- 关键词：胰腺肿瘤TOLL样受体4雷公藤内酯基质金属蛋白酶类
- Toll样受体4与胰腺癌PANCl细胞对吉西他滨敏感性的关系
- 2016年
- 目的观察Toll样受体4（TLR4）与胰腺癌PANCl细胞对吉西他滨（GEM）敏感性的关系，探讨其相关机制。方法将PANCl细胞分为GEM组、脂多糖（LPS）＋GEM组、TLR4-siRNA＋GEM组。GEM组给予GEM处理，LPS＋GEM组先用1mg／L的LPS干预4h后再用GEM处理，TLR4-siRNA＋GEM组先用100pmol／mlTLR4-siRNA转染细胞4h后再用GEM处理。以不做任何处理的细胞作为对照组。采用MTY法检测各组细胞的增殖，Hoechst33258染色观察细胞形态学变化，流式细胞仪检测细胞凋亡率，蛋白质印迹法检测细胞TLR4、磷酸化AKT（p-AKT）、活性Caspase-3蛋白表达。结果GEM组、LPS＋GEM组、TLR4-siRNA＋GEM组GEM对PANCl细胞的半数抑制浓度（Ic50）分别为（8．90±0．62）、（14．21±0．95）、（3．96±0．27）mg／L，LPS＋GEM组显著高于GEM组，TLR4-siRNA＋GEM组显著低于GEM组，差异均有统计学意义（P值均〈0．01）。LPS＋GEM组典型凋亡形态学改变的细胞数较GEM组减少，而TLR4．siRNA＋GEM组则较GEM组增多；对照组、GEM组、LPS＋GEM组、TLR4-siRNA＋GEM组细胞凋亡率分别为（2．1±0．3）％、（15．1±2．3）％、（9．8±1．5）％、（22．9±3．1）％，LPS＋GEM组显著低于GEM组，TLR4-siRNA＋GEM组显著高于GEM组，差异均有统计学意义（P值均〈0．01）。4组的TLR4表达量分别为0．83±0．08、0．81±0．07、0．85±0．07、0．16±0．03；p-AKT表达量为0．61±0．05、0．36±0．03、0．73±0．07、0．21±0．02；活性Caspase-3表达量为0．66±0．05、0．73±0．07、0．45±0．04、0．91±0．07。TLR4．siRNA＋GEM组的TLR4、p-AKT表达均较GEM组显著下降（P值均〈0．01），而活性Caspase-3表达显著增高（P〈0．05）。LPS＋GEM组的p-AKT表达较GEM组显著增加（P〈0．01），而活性Caspase-3蛋白表达显著减少（P〈0．01）。结论TLR4可抑制胰腺癌PNACl细胞对GEM的敏感性，其机制可能与激活P13K／AKT通路，下调活性Caspase-3
- 孙运良虞阳童依丽吴洪玉马建霞
- 关键词：胰腺肿瘤TOLL样受体4吉西他滨磷酸化AKTCASPASE-3
- 125I籽源短时低剂量率照射对胰腺癌神经生长因子表达的影响被引量：4
- 2014年
- 胰腺癌组织125I籽源近距离放射治疗是对位置深在的胰腺癌进行内放疗的一种方法，包括在组织内、组织表面或组织附近放置具有放射性的粒子进行治疗，通过放射性粒子持续释放射线来达到最大限度地杀伤肿瘤细胞的作用。
- 司佩任路筝刘岩马建霞吴洪玉李兆申
- 关键词：胰腺癌组织神经生长低剂量率近距离放射治疗放射性粒子照射
- 重组腺病毒介导Hsp70基因表达对胰腺癌荷瘤小鼠的免疫功能影响被引量：2
- 2012年
- 目的观察重组腺病毒介导热休克蛋白质70(Hsp70)基因表达对胰腺癌荷瘤小鼠的治疗作用及其对免疫功能的影响。方法建立胰腺癌荷瘤小鼠动物模型,随机分为荷瘤组、对照组和治疗组,对比不同时间点三组肿瘤大小,评价抑瘤效果。通过Western blot检测移植瘤组织Hsp70蛋白表达,流式细胞仪检测脾单核细胞中CD4+、CD8+细胞比例,ELISA检测血清中细胞因子IL-2、INF-γ、IL-4、IL10的含量。结果与荷瘤组和对照组相比,治疗组肿瘤生长受到明显抑制(P<0.05或P<0.01),脾单核细胞中CD4+、CD8+细胞比例明显增加(P<0.01)。治疗组血清中细胞因子IL-2、INF-γ含量较荷瘤组和对照组明显增加(P<0.01),IL-10含量则明显减少(P<0.01)。结论重组腺病毒介导的Hsp70基因表达对荷瘤小鼠胰腺癌动物模型的肿瘤生长具有抑制作用,其机制与激发免疫系统功能有关。
- 孙运良徐灿苏长青马建霞吴红玉
- 关键词：重组腺病毒胰腺肿瘤免疫功能
- 缺氧状态下人胰腺癌细胞对吉西他滨反应的实验研究
- 2013年
- 目的:观察缺氧状态对人胰腺癌细胞吉西他滨化疗敏感性的影响并分析其相关机制。方法:将人胰腺癌细胞SW1990分为常氧组、缺氧组、常氧+吉西他滨组和缺氧+吉西他滨组。MMT法检测各组细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡、Real-time PCR和Western blot分别检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、多药耐药基因(MDR-1)mRNA和蛋白的表达。结果:与常氧+吉西他滨组相比,低氧+吉西他滨组的细胞增殖率明显增加,细胞凋亡率显著下降(P<0.05);低氧组和低氧+吉西他滨组HIF-1α蛋白表达分别显著高于常氧组(P<0.05或P<0.01);与常氧组相比,低氧组和低氧+吉西他滨组的MDR1 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:缺氧状态可增加人胰腺癌细胞SW1990对吉西他滨的化疗抵抗,其机制与缺氧环境可诱导HIF-1α和MDR1基因表达有关。
- 马建霞王一倩吴洪玉金晶于晓峰
- 关键词：缺氧缺氧诱导因子-1Α多药耐药基因胰腺癌
- 雷公藤内酯醇抑制COX-2表达调控胰腺癌细胞生物学性状的实验研究
- 2015年
- 雷公藤内酯醇（triptolide,TPL）是从中国传统中药雷公藤中提取的有效成分.近年来的研究发现,TPL不仅具有抗炎、抗免疫反应等多种药理作用,还具有广谱抗肿瘤作用,是一种多靶点的天然抗肿瘤药物[1-4].实验表明,TPL能抑制体外培养的胰腺癌细胞增殖及胰腺癌动物移植瘤的生长[1].环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）为一种诱导型酶,与多种肿瘤的发生、发展密切相关[5].研究发现,TPL不仅可通过抑制COX-2表达调控炎症过程,还可通过下调COX-2表达抑制结肠癌细胞的增殖和迁移[2,6].然而TPL是否也通过下调胰腺癌细胞COX-2的表达而抑制肿瘤生长目前尚不清楚.本研究应用TPL干预人胰腺癌PANC1细胞,观察其对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用,探讨其相关机制。
- 孙运良马建霞吴红玉金晶李淑德
- 关键词：COX-2表达雷公藤内酯醇胰腺癌细胞生物学性状抑制肿瘤生长癌细胞增殖
- 原位注射法建立人胰腺癌SW1990裸鼠种植瘤模型及高频内镜超声探头对其的监测被引量：2
- 2011年
- 目的建立裸小鼠人胰腺癌原位种植瘤模型，探索监测种植瘤生长的方法。方法将对数生长期的人胰腺癌细胞株SW1990制备成细胞悬液，原位注射于Balb／c—nu裸小鼠胰腺尾部包膜下，利用高频内镜超声（EUS）探头体表观察肿瘤结节的生长及声像图像。结果20只裸小鼠均接种成功，1只裸鼠于接种后25d时死亡。接种后14d，EUS检查的瘤体大小为（8．09±2．61）mm^3，肿瘤结节呈均质低回声，边界清楚，周边有包膜及声晕，形态规则，30％的肿瘤结节周边可见低速环绕彩色血流信号；接种后28d，瘤体增大至（12．40±3．51）mm^3，70％的肿瘤结节呈不规则形，部分为分叶状，肿块呈低回声，不均质，未见液化坏死区，70％的肿瘤结节周边可见低速环绕彩色血流信号。结论原位注射法是建立裸小鼠人胰腺癌原位种植瘤模型较理想的方法，操作简便，成瘤率高；高频内镜超声显像是可靠的监测胰腺原位种植瘤的手段。
- 马建霞司佩任吴洪玉王洛伟潘雪高军李兆申金震东
- 关键词：胰腺肿瘤内镜超声检查
