高英
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组小鼠Galectin-9在大肠杆菌中的表达以及体外功能检测被引量：1
- 2007年
- 本研究旨在构建重组Galectin-9（半乳糖凝集素9）原核表达质粒，并对表达蛋白进行纯化和功能学鉴定。
- 汪峰何文涛袁劲吴柯周鸿敏徐逸高英陈忠华
- 关键词：大肠杆菌体外小鼠原核表达质粒半乳糖凝集素
- 肥大细胞体外诱生CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的作用
- 2009年
- 探索小鼠骨髓源性肥大细胞能否在体外诱生CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞。从小鼠股骨获取骨髓细胞,加入完全RPMI 1640培养基(含IL-3和SCF各10 ng/ml)诱导4周。用甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞异染颗粒;流式检测CD117和FcεRIα双阳性细胞比例。将肥大细胞与同基因来源的T细胞按不同比例(1∶2、1∶1、2∶1)置于48孔培养板中培养,作为三个实验组;未加肥大细胞的单独T细胞组作对照组。四个组均加入CD3抗体和CD28抗体各2μg/ml,IL-2 1 000U/ml,5 d后流式检测Foxp3表达情况。RT-PCR,免疫组化法检测肥大细胞中TGF-β1的表达。与对照组相比,实验组Foxp3表达均升高(对照组:3.37%±0.40%;实验组为:8.23%±0.80%、10.87%±1.25%、13.63%±0.55%)。RT-PCR和免疫组化均检出TGF-β1表达。肥大细胞能在体外诱导T细胞转化为CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞,可能与肥大细胞表达TGF-β1有关。
- 张维娜吴轲周鸿敏何文涛高英汪理林星光方泽民蔡兰军周巧丹雒真龙陈忠华
- 关键词：小鼠肥大细胞CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T细胞TGF-Β1
- 小鼠骨髓源性肥大细胞的培养及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:在体外利用小鼠骨髓干细胞诱导获得高纯度的肥大细胞。方法:从小鼠股骨获得骨髓细胞,放入含10%胎牛血清的RPMI1640培养基中,加入不同浓度的刺激因子,即IL-3和SCF各分别为10ng/ml、15ng/ml、20ng/ml,放入CO2培养箱中培养4周,用免疫组化观察CD117的表达,用流式细胞术检测CD117和FcεRIα双阳性细胞的比例,用甲苯胺蓝染色法观察细胞的成熟度,并与较常用的肥大细胞系P815做比较。结果:培养获得的肥大细胞,其中IL-3和SCF分别为10ng/ml和15ng/ml时均可在4周后得到纯度大于95%的CD117和FcεRIα双阳性肥大细胞,而20ng/ml时FcεRIα的表达却有所降低,双阳性细胞仅达90%,而P815细胞系表达FcεRIα的比例很低。免疫组化发现培养获得的细胞大部分均表达CD117。甲苯胺蓝染色发现培养获得的细胞核被染成深蓝色,胞浆中布满大量紫红色的颗粒,呈现肥大细胞的典型特征。而P815却少见典型的紫红色异染颗粒。结论:用IL-3和SCF各10ng/ml可在体外成功培养获得高纯度的小鼠骨髓源性肥大细胞,且其在表型和成熟度方面均好于P815细胞系。
- 张维娜吴轲周鸿敏彭清臻何文涛高英林星光方泽民陈忠华
- 关键词：肥大细胞骨髓小鼠
- 半乳糖苷凝集素-7免疫增强功能的体外研究被引量：3
- 2010年
- 目的了解半乳糖苷凝集素-7(galectin-7)对不同T细胞亚群增殖的影响,并进一步探讨其免疫治疗方面的应用前景。方法利用不同浓度的重组Galectin-7蛋白在有或无抗CD3和CD28抗体存在时与纯化的T细胞共同培养5 d,流式细胞仪检测T细胞及各亚群的增殖情况。结果 galectin-7能明显诱导T细胞的增殖,在与抗CD3和抗CD28抗体联用时能协同促进T细胞增殖反应,增殖的细胞主要为CD8+T细胞。结论 galectin-7能诱导并促进T细胞的增殖,在体外发挥免疫增强作用,深入探索其作用机制,有望研发新的靶点药物用于肿瘤的临床免疫治疗。
- 高英张维娜何文涛汪理周鸿敏林星光陈忠华
- 关键词：增殖T细胞亚群
- 哮喘大鼠静脉血和支气管肺泡灌洗液中降钙素基因相关肽的研究
- 目的：研究大鼠哮喘模型静脉血和支气管肺泡灌洗液中降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide,CGRP)的变化,探讨CGRP在哮喘发病机制中的作用.
方法：用卵蛋白(OVA)致敏...
- 高英刘光辉李宝珠杨东亮
- 关键词：降钙素基因相关肽过敏性哮喘ELISA法
- 文献传递
- 孕早期水平雌孕激素对小鼠体内调节性T细胞的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨孕早期的雌、孕激素对小鼠调节性T细胞在体内的影响及其相关性。方法建立去势C57BL/6小鼠模型,2周后分别皮下注射雌激素、孕激素及雌孕激素联合重建小鼠性激素水平,模拟妊娠早期小鼠激素水平。维持2周后,用流式细胞术和免疫组化检测给药后小鼠外周血、脾脏、髂窝淋巴结、胸腺中调节性T细胞比例变化情况。结果实验结果显示,雌鼠去势后,单独的雌激素干预可明显提高脾脏、髂窝淋巴结、外周血CD+4CD+25Foxp3+调节性T细胞在CD+4T细胞中的比例,分别为(8.56±1.85)%,(7.63±1.68)%,(6.13±1.32)%;与溶剂组比较差异有显著性(P<0.05)。但胸腺中调节性T细胞比例与溶剂组差异无显著性(P>0.05)。单独妊娠早期水平的孕激素与溶剂组比较,调节性T细胞比例有所升高,但差异无显著性(P>0.05)。而联合应用雌、孕激素对调节性T细胞的影响与单独应用雌激素的结果类似,两者差异无显著性。不同性别组给予相同干预药物,调节性T细胞的变化比例,雌雄两组差异无显著性(P>0.05)。免疫组化也得到了类似的结果。结论单独应用相当于孕早期水平的雌激素可明显提高小鼠外周血,脾脏,髂窝淋巴结CD+4CD+25Foxp3+调节性T细胞比例,而孕激素对外周调节性T细胞没有影响,两种激素对中枢淋巴器官的调节性T细胞均没有影响。小鼠T淋巴细胞中雌孕激素的受体分布及其功能与性别遗传没有相关性。
- 林星光汪理高英张维娜雒真龙陈忠华昌盛
- 关键词：孕激素小鼠
- 降钙素基因相关肽在哮喘中的作用
- 目的：利用大鼠哮喘模型揭示降钙素基因相关肽(CGRP)及其拮抗剂CGRP(8～37)在哮喘发病机制中的作用.
方法：雄性SD大鼠分哮喘组(A)、治疗组(B)、对照组(C)各8只,分别给予腹腔注射致敏原后连续激发...
- 李宝珠高英刘光辉杨东亮
- 关键词：降钙素基因相关肽免疫组织化学过敏性哮喘气道炎症发病机制
- 文献传递
- Galeetin-9（Tim-3L）显著减弱小鼠移植排斥
- 2009年
- 目的探究Galectin-9（即Tcell immunoglobulin domain and mucin domain protein-3 lig-and，Tim-3L）的真核定位与功能，及其对同种异基因排斥反应的影响。方法PCR扩增Galectin-9片段，插入到pEGFP—N1质粒，转染中国仓鼠卵巢癌细胞系（CHO）行G418筛选，分选增强型绿色荧光蛋白（EGFP）阳性细胞。免疫组化检测Galectin-9的表达，Alamar Blue法检测稳定转染Galectin-9的CHO细胞及其新鲜培养上清对脾细胞增殖的影响，ELISA检测IL-2水平。给予BALB／c→C57BL／6心脏移植受鼠Galectin-9蛋白100μg×7d。结果Galectin-9表达于细胞浆，稳定转染Galectin-9-EGFP的CHO细胞上清抑制淋巴细胞增殖和IL-2的产生。上述效应可被Tim-3-Fc融合蛋白逆转。Galectin-9干预的心脏移植物中位生存时间明显延长[（22．7±1．2）d，（7．2±0．4）d）]。结论真核细胞中Galectin．9可通过分泌形式负调节同种异基因免疫；Galectin-9有望成为新型的抗排斥药物。
- 何文涛袁劲方泽民汪峰徐逸周鸿敏高英张维娜王璐陈忠华
- 关键词：TIM-3GALECTIN-9免疫抑制小鼠
- 利用DIGE和RP-HPLC-ESI/MS技术寻找慢性移植肾失功患者血清标志物被引量：1
- 2009年
- 目的:利用蛋白组学二维差异性凝胶电泳(2-DDIGE)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC)联合电喷射离子化质谱(ESI/MS)技术寻找慢性移植肾失功患者血清生物标志物。方法:血清样本分成4组,慢性移植物失功组(CGD组)、移植后长期肾功能稳定组(SRF组)、急性排斥组(AR组)和健康对照组(N组)。血清样本经多重亲和排除柱去除高丰度蛋白处理后,使用2-DDIGE技术找到差异蛋白点。切下这些差异蛋白点,胰蛋白酶消化,经RP-HPLC-ESI/MS分析鉴定,在另一独立样本中对鉴定出的差异蛋白Galectin-7进行ELISA验证。结果:在CGD组患者血清中差异表达的蛋白共有39个,质谱鉴定出22个,包括载脂蛋白A-I前体,补体C4-A前体,Galectin-7等。ELISA结果提示CGD组患者血清中Galectin-7的表达较SRF组和N组有明显增高。结论:找到的这些差异蛋白具有不同的生物功能,为大样本、多中心的验证奠定了基础。Galectin-7可能是CGD的血清标志物,并对CGD的发病机制和治疗策略提供新的思路。
- 高英吴轲徐逸周鸿敏何文涛张维娜林星光蔡兰军雒真龙方泽民郭晖周绍棠昌盛杜敦峰陈忠华
- 关键词：肾移植慢性移植物失功蛋白组学
