黄湘鹭
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国药科大学药学院更多>>
- 发文基金：北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 集成干扰素突变体ⅡFN_(72C)的构建及其聚乙二醇定点修饰被引量：1
- 2010年
- 目的:设计构建集成干扰素突变体IIFN72C并进行聚乙二醇定点修饰,以获得高活性的长效干扰素分子。方法:利用蛋白质分子同源模建,选择在集成干扰素分子IIFN的第72位引入半胱氨酸残基构成集成干扰素突变体IIFN72C。诱导表达后经包涵体变复性和层析纯化,与单甲氧基聚乙二醇(mPEG-MAL)定点偶联。修饰产物经纯化后,以SDS-PAGE考察其纯度,用WISH-VSV系统进行生物活性测定。结果:IIFN72C以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上,比活性与突变前相当;修饰产物大多数为单修饰体,纯化后纯度大于98%,比活性保留约为修饰前的8%。结论:成功设计并表达IIFN72C用于PEG定点修饰,修饰产物活性保留得以提高。
- 黄湘鹭陶杉杉徐晨李洁周建平
- 关键词：定点突变
