黄鹤
- 作品数：71 被引量：136H指数：7
- 供职机构：天津大学更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程理学更多>>
- 特异性结合TNF-α的纳米抗体及其用途
- 本发明涉及免疫学领域，具体而言，本发明涉及经亲和力成熟的抗TNF‑α的纳米抗体或其抗原结合片段，编码它们的核酸分子、载体及宿主细胞，所述纳米抗体或其抗原结合片段的衍生物，以及它们用于疾病治疗的用途。
- 黄鹤康广博王杰文曹翔桉
- 靶向性重组PF4及其表达系统
- 本发明涉及一种与抑制肿瘤生长有关的重组肽，以及其真核表达载体。与抑制肿瘤生长相关的重组肽包括血小板因子四（PF4）47-70肽段和环状RGD肽；将PF4<Sup>47-70</Sup>肽段和环状RGD肽连接构成靶向性重组...
- 黄鹤王喆段毅涛甘一如王听月
- 文献传递
- 一种工程益生菌的构建方法及其应用
- 本发明提供一种过量合成胞外丁酸的工程益生菌、构建方法，及其在食品，保健品或医疗产品中的应用。所述益生菌包括导入四种外源基因，所述四种外源基因包括3‑羟基丁酰辅酶A脱氢酶编码基因Hbd、烯酰辅酶A水合酶编码基因Crt、反式...
- 黄鹤吴嘉豪王丽娜康广博
- 利用pET-29b载体进行葡激酶基因表达与其产物的亲和纯化被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨 6聚组氨酸序列与葡激酶基因序列融合表达及其表达产物的纯化方法。方法 :将葡激酶的c DNA序列连入 p ET- 2 9b质粒 ,转入 E.coli BL 2 1(DE3)进行表达。应用镍金属离子螯合层析及凝胶过滤层析法纯化表达产物 ,采用溶圈法对纯化产物进行生物学活性测定。结果 :6聚组氨酸与葡激酶的可溶性融合蛋白在 BL 2 1(DE3)中的表达量约占菌体可溶性蛋白总量的 2 5 % ;螯合层析纯化后其纯度可达 90 %以上 ;再应用 Sephacryl S-2 0 0 HR可使其纯度提高到 98%以上 ;测得其比活性为 5 .0× 10 4 AU· m g- 1 。结论 :利用 p ET- 2 9b载体成功进行了重组葡激酶基因的表达及其表达产物的亲和纯化。
- 吴樱黄鹤周加文甘一如
- 关键词：重组蛋白质类重组融合蛋白质类组氨酸色谱法
- 盐酸克伦特罗完全抗原的合成及其偶联工艺的优化被引量：9
- 2009年
- 为获取用于快速免疫分析的免疫抗原和包被抗原,本实验采用重氮化反应制备盐酸克伦特罗(Clenbuterol hydrochloride,CL)完全抗原,在强酸条件下CL先经重氮化,再与鸡卵清白蛋白(OVA)发生共价取代制备了盐酸克伦特罗包被抗原(OVA-CL),并以正交实验确定了共价取代反应的关键影响因素,进一步采用单因素实验确定了反应所需的最佳条件,并通过紫外扫描对制得的包被抗原进行了鉴定。结果表明,投料比例是盐酸克伦特罗完全抗原合成的关键因素,搅拌转速和反应时间也起着至关重要的作用。而且偶联反应在1h内基本完成,延长反应时间对提高产物偶联比影响不大。当投料比例为30:1,pH值约为8,低速搅拌状况下,包被抗原和免疫抗原的偶联比分别高达29:1和48:1,盐酸克伦特罗完全抗原合成条件的优化筛选取得了预期的效果。
- 杨香瑜黄鹤
- 关键词：盐酸克伦特罗重氮化反应
- 亲和色谱法从融合蛋白GST-IL-6中纯化重组人白细胞介素-6(英文)
- 2002年
- 研究用亲和融合谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)的方法纯化重组人白细胞介素 6(IL 6)的发酵和纯化工艺 ,使用含有质粒pHZl818的E .coliJMl0 9在 2XYT培养基中进行发酵表达 ,IL 6表达为与谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)融合的融合蛋白GST IL 6.融合蛋白存在可溶的活性蛋白和不可溶的包含体两种形式 ,此包含体无活性且无法复性 ,无法用亲和层析回收 ,通过实验优化摇床发酵的诱导温度和转速 ,以增加可溶融合蛋白的表达 .菌体超声破碎液后 ,上清液用作亲和柱层析 ,可将融合蛋白提纯至 80 00 ,每升发酵液可得 10mg融合蛋白 ,用凝血酶裂解处理 6h ,亲和标志物GST被特异性切除 ,裂解得到的IL 6用离子交换柱层析可纯化至 95 00 ,MTT法测得纯化的IL 6生物学活性为 1.0 2× 10 8IU/mg .
- 吴蕾甘一如林峰黄鹤
- 关键词：融合蛋白GST
- 固相片段缩合法制备胸腺素α_1的工艺被引量：3
- 2008年
- 以固相多肽合成（SPPS）为基础,应用固相片段合成方法制备胸腺素α1。系统考察了不同分段方法、缩合时间、反应溶剂、缩合剂及乙酰化的不同顺序对片段缩合反应的影响。通过试验确定了最佳合成工艺条件：采用三段（1-10、11-18和19-28）分别合成方式,以V（DMF）/V（DCM）等于3.0的混合溶液为反应溶剂,HATU为缩合剂,N末端氨基先乙酰化后进行片段间缩合的途径进行合成,多肽片段间缩合反应时间采用20.0 h。该条件下合成的胸腺素α1,粗品收率达64.3%,纯度达61.1%,与逐步合成法相比较,产物纯度提高了29.9%。
- 王炜张鸿鹏黄鹤
- 关键词：胸腺素Α1固相多肽合成
- 活性位点邻近的?-loop对胰蛋白酶热稳定性和活性的影响被引量：3
- 2017年
- 以猪源胰蛋白酶作为研究对象,尝试利用删除猪源胰蛋白酶活性位点邻近?-loop的方法来提高其热稳定性和活性。首先通过Gromacs v4.5.5分子动力学模拟软件,预测出了胰蛋白酶的柔性区Fragment 41~46(即?-loop所在区域)。然后根据删除?-loop结构中不同的氨基酸数目,确立了三个突变R1Q、K3Q及C5Q;通过重叠延伸PCR技术构建突变菌株,发酵表达后,进行了酶热稳定性和活性分析。结果表明,R1Q、K3Q及C5Q的活性在一定程度上均有提高,在热稳定性上R1Q和K3Q有所提高,C5Q有所下降,其中R1Q突变体酶的最高活性较野生型提高了1.42倍,同时,失活半衰期和最适反应温度较野生型也分别提高了213.3 min和11.8℃。实验结果证明,在删除该?-loop中的异亮氨酸后,得到了突变型R1Q酶,成功实现酶双功能的共同进化。该策略有潜力应用于其他工业酶分子的热稳定性和活性改造,为推动生物酶的工业化应用奠定基础。
- 杜坤甘一如黄鹤
- 关键词：热稳定性活性
- 基于TMS320VC5416 DSP的GSM通信实现
- 采用先进的GSM通信模块和计算机互连的终端系统,以TI公司的TMS320VC5416作为系统的控制及处理核心,本文介绍了一种通过发送相关的AT命令来实现GSM通信的方案。通信内容包括硬件测试、发送与接收PDU Mode短...
- 朱燕黄鹤何加铭曾兴斌
- 文献传递
- 高效表达人血小板因子4的基因工程菌及其构建方法
- 本发明公开了一种高效表达人血小板因子4的基因工程菌及其构建方法，所述工程菌的构建方法为：(1)人PF4基因的扩增；(2)PF4串联单位的扩增；(3)PF4多拷贝载体的构建；(4)构建多拷贝人PF4的基因工程菌。本发明构建...
- 黄鹤段毅涛吴伟王喆房振江甘一如
- 文献传递
