丁小凤
- 作品数：37 被引量：36H指数：3
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省科技厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 抑制人TNFAIP1基因表达的siRNA及其应用
- 本发明公开了一种抑制人TNFAIP1基因表达的siRNA及其在宫颈癌细胞增殖研究中的应用。本发明以RNA干扰技术为基础，从GenBank获得人TNFAIP1基因的cDNA序列，设计并合成了靶向人TNFAIP1基因的一对s...
- 胡翔向双林甘诗泉刘宁莫莉桦丁小凤
- 文献传递
- 抑制人AP-2alpha基因表达的siRNA及其抗宫颈癌用途
- 本发明公开了一种抑制人AP-2alpha基因表达的siRNA及其在治疗宫颈癌中的用途。本发明利用生物数据库获得人AP-2alpha基因序列，设计一组能诱发人AP-2alpha的RNA干扰的siRNA，通过化学法合成一定量...
- 张健向双林丁小凤周建林胡翔韩梅周畅
- AP-2调控肿瘤恶性进展的新功能机制研究
- 2023年
- 恶性肿瘤是一种多基因多步骤的复杂疾病,遗传改变、表观修饰及肿瘤微环境是肿瘤生长、转移、耐药的重要原因.阐明关键分子(如非编码RNA和基因等)在不同阶段恶性肿瘤中交互作用机制一直是肿瘤学研究领域的热点和难点.因此研究肿瘤发生发展新机制有助于更新肿瘤致病机理,为肿瘤临床检测和治疗提供理论指导,也被生命科学、医学、药学、化学等学科领域广泛关注.
- 无丁小凤向双林胡翔周建林周畅韩梅张健
- 关键词：肿瘤微环境非编码RNA复杂疾病
- 骨髓间充质干细胞培养液促进STAT3磷酸化诱导Raw264.7细胞向M2型极化被引量：2
- 2020年
- 炎症性疾病的发生是当今临床医学攻克的重点。M1型巨噬细胞分泌炎症因子产生炎症,而M2型巨噬细胞分泌抑炎因子抑制炎症的发生。M1型巨噬细胞向M2型极化,则是从炎症状态转变成抑制炎症发生的状态,因此研究巨噬细胞向缓解炎症的M2型极化将有利于炎症性疾病的治疗。本研究利用骨髓间充质干细胞(BMSC)培养液处理已被脂多糖(LPS)诱导呈M1型的Raw264.7巨噬细胞,探究骨髓间充质干细胞培养液(BMSC-CM)对巨噬细胞向M2型极化的影响及其分子机制。提取来源于3周龄C57BL/6鼠的骨髓间充质干细胞;再收集BMSC-CM处理M1型的Raw264.7巨噬细胞;半定量PCR检测M1型标记基因[肿瘤坏死因子α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(INOS)]和M2型标记基因[精氨酸酶1(ARG-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)]mRNA表达以及白介素10(IL-10)mRNA表达水平;Western蛋白质印迹法检测信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)和磷酸化STAT3(p-STAT3)的表达。本研究发现,经过BMSC-CM培养后的M1型的Raw264.7巨噬细胞,其M2型相关指标ARG-1和TGF-β1 mRNA水平明显上升,并且IL-10 mRNA水平和p-STAT3蛋白水平也明显上升。这些结果说明,骨髓间充质干细胞培养液通过IL-10/STAT3信号通路促进STAT3磷酸化,诱导巨噬细胞Raw264.7细胞向M2型极化。
- 李志伟周号悦刘湘粤何漪丁小凤胡灵玉
- 关键词：骨髓间充质干细胞STAT3IL-10
- 稳定表达人Eps8基因的胶质瘤U251细胞系的建立被引量：1
- 2010年
- 应用亚克隆方法构建pEGFP-C3/Eps8真核表达载体,经测序鉴定后,用脂质体进行胶质瘤U251细胞的转染,应用G418筛选出稳定表达pEGFP-C3/Eps8和pEGFP-C3的细胞系,最后通过Western blot和荧光定位证明Eps8在U251细胞中过量表达。本实验成功建立了稳定转染Eps8的U251细胞系,为进一步研究Eps8基因在胶质瘤中的功能奠定了良好的实验基础。
- 周芳亮胡翔杨子剑韩梅丁小凤
- 关键词：真核表达载体U251细胞
- Hoxa家族基因在白血病中的表达及意义被引量：4
- 2018年
- 用流式细胞仪对骨髓细胞进行白血病细胞免疫分型,用RT-PCR方法主要检测了急性白血病样品中Hoxa1-13和Meis1基因的表达.结果表明在所有急性白血病患者中CD45和HLA-DR表达阳性,无T系抗原CD3表达,髓系抗原CD33和CD13阳性比例高(76%),B系抗原CD19阳性率为47%,而CD10和CD20阳性率为24%~29%.在急性白血病中Hoxa9和Meis1表达正相关,Hoxa6和Hoxa2表达大多呈现正相关,Hoxa1和Hoxa3在大多数样品中表达负相关.Hoxa3只在CD19阴性CD7阳性的急性白血病样品中表达.结果提示在急性白血病中Hoxa家族基因的表达异常,具有一定的表达相关性,并且免疫表型具有异质性,免疫抗原与Hoxa基因存在着一定的联系.
- 杨柳丁小凤胡翔彭城錡彭敏源
- 关键词：白血病RT-PCR免疫表型
- 功能化氧化石墨烯携带PD-L1 siRNA抑制肝癌细胞的恶性生物学行为
- 2023年
- 程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡配体1(PD-L1)信号通路主要参与免疫负调控作用,且在许多类型的肿瘤的恶性发展中具有关键作用。PD-L1的高表达可促进肝细胞癌(HCC)的侵袭,提高肿瘤复发的风险。另外,PD-L1常作为免疫检查点的阻断靶点,主要通过单抗将其中和,引发抗肿瘤免疫反应。因此,PD-L1是HCC免疫治疗中极具潜力的靶点之一。本文主要探究纳米级功能化氧化石墨烯(GO-PEI-PEG)携带PD-L1 siRNA对肝癌细胞的恶性生物学行为的影响。研究结果显示,将GO-PEI-PEG/PD-L1 siRNA转染至MHCC97H细胞后,细胞的增殖和迁移均被抑制,细胞周期阻滞在G1期,且细胞凋亡的数目增多。进一步研究发现,GO-PEI-PEG/PD-L1 siRNA对MHCC97H细胞的抑制作用是通过阻碍AKT信号通路激活实现的。这些试验结果表明,GO-PEI-PEG具备优秀的递送性能,携带PD-L1 siRNA可有效干扰PD-L1表达,进而抑制肝癌细胞的恶性生物学行为,这为治疗HCC提供了更安全、有效的递送新策略。
- 李志伟单丽红刘曦冉闵洋丁小凤李立民
- 关键词：氧化石墨烯PD-L1肝癌AKT信号通路
- 阿司匹林对人慢性粒细胞白血病细胞株K562的生长抑制作用被引量：8
- 2013年
- 为研究阿司匹林对人慢性粒细胞白血病细胞株K562生长的影响,采用光学显微镜和Hoechst 33258染色观察阿司匹林处理后细胞的形态和数目变化,显示阿司匹林促进K562细胞的凋亡.MTT法、细胞计数、软琼脂克隆形成实验、FACS和裸鼠成瘤实验在体外和体内检测阿司匹林对K562细胞增殖和存活的影响,发现阿司匹林明显抑制K562细胞的体外增殖和裸鼠体内成瘤能力.Western blot实验分析细胞信号通道下游基因的表达影响,显示β-catenin、STAT5A、PARP和NF-κB p65蛋白的表达量下调,而细胞周期抑制因子p21表达上调.这些结果提示阿司匹林从体外和体内抑制K562细胞的生长,其作用的机制复杂,可能影响β-catenin信号通道、JAK蛋白酪氨酸激酶/STAT5A信号通道、NF-κB信号传导通道和细胞周期的进程.
- 王芳妹杨子剑韩梅胡翔丁小凤
- 关键词：阿司匹林慢性粒细胞白血病细胞增殖
- GAS41蛋白的表达、抗体制备及其亚细胞定位被引量：3
- 2005年
- GAS41是新发现的与神经胶质瘤密切相关的基因。为了对该基因进行深入的功能研究,成功地将GAS41基因构建于原核表达载体pQE-N3,转化BL21(DE3)获得融合表达产物。对含融合蛋白的包含体进行溶解和复性,通过免疫新西兰大白兔获得兔抗GAS41多克隆抗体。采用Western印迹技术,用该抗体检测GAS41基因的原核和真核表达产物,证明该抗体有较好的针对GAS41蛋白的专一性,可用于对GAS41的结构和功能研究。同时,用该抗体通过荧光免疫细胞进行定位分析发现,GAS41蛋白均匀分布于COS7细胞的细胞核中,提示GAS41可能是一个重要的转录因子。
- 丁小凤胡翔张健
- 关键词：亚细胞定位
- EPS8蛋白的表达、多克隆抗体制备及其亚细胞定位被引量：3
- 2008年
- EPS8(EGFR pathwaysub strate 8)是epidermal growth factor receptor(EGFR)重要的激酶活性底物之一,近年有研究表明其与神经胶质瘤密切相关.为了对该基因进行深入的功能研究,成功地将EPS8基因构建于原核表达载体pGEX-4T-2,转化BL21(DE3)获得融合表达产物,用GST-EPS8(-10-230aa)免疫新西兰大白兔获得兔抗EPS8多克隆抗体.采用Western Blot,用该抗体检测EPS8基因的真核表达产物,证明该抗体有较好的针对EPS8蛋白的专一性,可用于对EPS8的结构和功能研究.同时,用该抗体通过荧光免疫细胞对4种神经胶质瘤细胞系进行定位分析发现,EPS8蛋白主要分布于胶质瘤细胞的细胞质中.
- 罗畅丁小凤孙一兵韩梅
- 关键词：亚细胞定位
