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刘安元: 作品数：27 被引量：144H指数：4; 供职机构：南华大学医学院病原生物学研究所更多>>; 发文基金：湖南省教育厅科研基金国家自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学经济管理更多>>

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GFP-hDaxx融合蛋白高表达抑制活化巨噬细胞分泌TNFα: 2003年; 目的　研究GFP -hDaxx融合蛋白 (GFP -hDaxx)即时高表达对激活巨噬细胞分泌TNFα的影响。方法　将GFP -hDaxx真核细胞表达载体pEGFP hDaxx转染巨噬细胞 ,用荧光显微镜观察GFP -hDaxx在巨噬细胞内的表达与定位。通过hDaxx在巨噬细胞内的即时高表达 ,测定LPS诱导激活巨噬细胞后 ,在 0 .5、4、1 2h时 ,活化巨噬细胞分泌细胞因子TNFα的含量。结果　GFP -hDaxx在巨噬细胞内即时高表达且定位于细胞核。GFP -hDaxx在巨噬细胞内的高表达 ,使LPS诱导活化的巨噬细胞分泌TNFα量明显降低 (在 4h及 1 2h时与对照组差异有显著性 ,P <0 .0 0 1 )。结论　hDaxx即时高表达降低活化的巨噬细胞分泌TNFα。; 何爱桃唐旭红周艺杨露清刘安元万艳平; 关键词：巨噬细胞 TNFΑ

hDaxx融合蛋白高表达降低活化巨噬细胞分泌IL-1β: 2004年; 目的　研究GFP -hDaxx融合蛋白 (GFP -hDaxx)即时高表达对激活巨噬细胞分泌IL - 1 β的影响。方法　将GFP -hDaxx真核细胞表达载体pEGFP/hDaxx转染巨噬细胞 ,利用Westernblotting检测表达产物。通过hDaxx在巨噬细胞内的即时高表达 ,测定LPS刺激巨噬细胞后 0 .5h、4h、1 2h时 ,活化巨噬细胞分泌细胞因子IL - 1 β的含量。结果　pEGFP/hDaxx在巨噬细胞内成功表达GFP -hDaxx融合蛋白。GFP -hDaxx在巨噬细胞内的高表达 ,使LPS诱导活化的巨噬细胞分泌IL - 1 β量明显降低 (在4h及 1 2h时与对照组差异有显著性 ,P <0 .0 0 1 )。结论　hDaxx即时高表达降低活化的巨噬细胞分泌IL - 1 β。; 余敏君钟飞刘安元朱翠明万艳平; 关键词：HDAXX 巨噬细胞 IL-1Β

hDaxx高表达抑制地塞米松诱导的HeLa细胞凋亡: 2005年; 目的　利用真核表达载体pEGFP/hDaxx在HeLa细胞中高表达hDaxx ,研究hDaxx对HeLa细胞凋亡的影响。　方法　将pEGFP/hDaxx转染HeLa细胞,Western -blotting鉴定GFP -hDaxx融合蛋白的表达,荧光显微镜观察GFP -hDaxx融合蛋白在细胞内的表达及定位,用地塞米松诱导HeLa细胞凋亡,细胞用Giemsa染色后,观察细胞形态变化并计算HeLa细胞凋亡率。　结果　GFP -hDaxx融合蛋白在HeLa细胞中成功表达并定位于细胞核。地塞米松对照组与pEGFP对照组凋亡率无显著性差异(P >0 .0 5 ) ,而pEGFP/hDaxx组凋亡率显著降低(P <0 .0 1) ,即hDaxx即时高表达降低地塞米松诱导的HeLa细胞凋亡率。　结论　Daxx为调控蛋白,GFP -hDaxx融合蛋白在HeLa细胞中表达并定位于细胞核,且hDaxx即时高表达抑制地塞米松诱导的HeLa细胞凋亡。; 刘安元谭立志万艳平吴移谋刘传爱余敏君; 关键词：HDAXX HELA细胞凋亡

Caski细胞内Daxx与HPV16 E2蛋白的结合作用: 2015年; 目的研究人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白在Caski细胞内与Daxx的相互作用,探讨它们在HPV16所致宫颈癌发生发展中的作用。方法利用间接免疫荧光染色技术观察HPV16 E2和Daxx在Caski细胞中的分布或共定位;通过免疫共沉淀试验和免疫印迹分析HPV16 E2与Daxx在Caski细胞内的相互作用。结果在Caski细胞内,Daxx和HPV16 E2主要分布于胞浆,少数分布于胞核,且两种信号在细胞浆内有一定的共存;抗E2抗体能沉淀Daxx,反之抗Daxx抗体同样能够沉淀HPV16 E2。结论 HPV16 E2与Daxx在Caski细胞存在直接的相互作用。; 刘越唐双阳刘安元蔡恒玲安振刘志敏万艳平; 关键词：人乳头瘤病毒16型 CASKI细胞 E2蛋白

GFP-hDaxx融合蛋白在巨噬细胞中的表达与定位被引量：3: 2003年; 目的　构建GFP -hDaxx融合蛋白真核表达载体pEGFP/hDaxx并在巨噬细胞中表达 ,为研究hDaxx对巨噬细胞凋亡及分泌活性的影响提供实验基础。　方法　将hDaxxcDNA片段亚克隆入载体pEGFP ,构建GFP -hDaxx融合蛋白真核表达载体。将质粒pEGFP/hDaxx转染巨噬细胞 ,Westernblotting鉴定表达产物 ,荧光显微镜观察GFP -hDaxx融合蛋白在细胞内的表达与定位。　结果　成功构建了GFP -hDaxx融合蛋白真核表达载体pEGFP/hDaxx ,GFP -hDaxx融合蛋白在巨噬细胞中表达并定位于细胞核。　结论　pEGFP/hDaxx在巨噬细胞中即时高表达GFP; 谭立志刘传爱刘安元万艳平; 关键词：HDAXX 巨噬细胞

HPV16 E6蛋白与hDaxx的相互作用及其对HeLa细胞凋亡的影响被引量：2: 2008年; 目的:研究HPV16 E6(human papillomavirus type16 E6)蛋白与hDaxx(human death domain associated protein)的相互作用及其对HeLa细胞凋亡的影响,为探索HPV16 E6蛋白的致癌机制提供实验依据。方法:构建pGADT7-E6和pGBKT7-hDaxx重组载体,利用酵母双杂交系统检测HPV16 E6蛋白与hDaxx的相互作用,并用Western印迹法检测二者在酵母菌中的表达。将E6与hDaxx的真核表达载体共转染HeLa细胞,用5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导凋亡,FCM法检测凋亡率。结果:E6蛋白与hDaxx在细胞内存在相互作用。共转染pcDNA3.1(-)/E6和pcDNA3.1(-)/hDaxx的HeLa细胞,随pcDNA3.1(-)/hDaxx转染量的增加凋亡率上升,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:HPV16 E6蛋白与hDaxx在细胞内相互作用,hDaxx过表达可提高表达E6蛋白的HeLa细胞对5-FU的敏感性,且这种关系存在剂量依赖性。E6蛋白可能通过和hDaxx的相互作用抑制细胞凋亡。; 王鑫朱翠明刘安元尹卫国李金丽蔡恒玲万艳平; 关键词：HELA细胞双杂交系统技术细胞凋亡

人巨细胞病毒IE1蛋白促进巨噬细胞分泌IL-1β、TNF-α及凋亡被引量：1: 2008年; 为了研究HCMV IE1-GFP融合蛋白瞬时高表达对巨噬细胞分泌活性及其凋亡的影响,将真核表达载体pEGFP/IE1转染至巨噬细胞(Mφ),转染48h后,用荧光显微镜观察GFP-IE1融合蛋白或GFP的表达与定位。ELISA法检测细胞培养上清中IL-1β或TNF-α的含量以及用RT-PCR检测其mRNA的表达情况,并收集Mφ经PI染色后流式细胞术(FCM)检测其凋亡率。结果发现,GFP-IE1融合蛋白在Mφ内瞬时表达且定位于细胞核,GFP定位于整个细胞中。GFP-IE1融合蛋白在Mφ内瞬时高表达使Mφ分泌IL-1β和TNF-α量及其mRNA表达量均增加且Mφ凋亡率明显上升,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),而GFP表达对Mφ分泌及其凋亡无影响(P>0.05)。HCMV IE1瞬时高表达可上调Mφ分泌细胞因子IL-1β和TNF-α并促进Mφ凋亡。; 刘安元陈琳万艳平陈熙朱翠明余敏君曹清香; 关键词：巨噬细胞 IL-1Β TNF-Α 凋亡

硕士研究生培养模式构建研究——以南华大学研究生教育为例: 本文简述了国内外研究生培养模式的发展史：学徒式培养模式、专业化模式、协作式培养模式、教学式培养模式;并分析了南华大学研究生教育现状及特点，并探讨了构建硕士研究生培养模式的思路。; 周晓东樊华刘锋刘安元张良久; 关键词：研究生教育教育质量课程设置; 文献传递

16S rDNA技术在鼻咽癌患者和正常人咽部细菌组成中的比较研究被引量：4: 2009年; 目的比较分析鼻咽癌患者和正常人咽部标本中的细菌种类和比例,探讨细菌感染和鼻咽癌的关系。方法选择1 1例初次确诊的鼻咽癌患者以及1 1例与鼻咽癌患者年龄和性别匹配的健康对照者,两组1年内均未使用抗生素、化疗等药物。提取咽拭子中的细菌总DNA,针对1 6 S rDNA保守区设计通用引物进行PCR扩增,PCR产物克隆到T载体,在转化的白色克隆中随机挑选1 0 0个左右进行测序。将获得的1 6 S rDNA序列与网上已公布的1 6 S rDNA序列进行Blast比对,分析克隆群中细菌的种类和比例。结果1 1例鼻咽癌患者中9例结核分枝杆菌和奈瑟菌占优势菌群;另2例排第四和第五位,而在1 1例健康对照者中未发现结核分枝杆菌和奈瑟菌。鼻咽癌患者与健康对照者的菌群分布明显不同。结论用1 6 S rDNA技术发现鼻咽癌患者与正常人咽部细菌组成存在较大的差异,结核分枝杆菌和奈瑟菌感染可能与鼻咽癌相关。; 江青山肖建华刘安元沈宝茗; 关键词：RDNA 鼻咽癌咽拭子

hDaxx基因转染抑制地塞米松诱导的巨噬细胞凋亡: 2004年; 利用真核表达载体pEGFP/hDaxx在巨噬细胞中高表达hDaxx ,研究hDaxx对巨噬细胞凋亡的影响。将pEGFP/hDaxx转染巨噬细胞 ,Westernblot鉴定Daxx的表达 ,荧光显微镜观察GFP hDaxx融合蛋白在细胞内的表达及定位 ,用地塞米松诱导巨噬细胞凋亡 ,细胞用Giemsa染色后 ,观察细胞形态变化并计算巨噬细胞凋亡率。结果显示 :GFP hDaxx融合蛋白在巨噬细胞中成功表达并定位于细胞核 ,且GFP hDaxx融合蛋白不影响Daxx的特异性 ;地塞米松对照组与pEGFP对照组凋亡率无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,而pEGFP/hDaxx组凋亡率显著降低 (P <0 0 1) ,即hDaxx即时高表达降低地塞米松诱导的巨噬细胞凋亡率。Daxx为调控蛋白 ,GFP hDaxx融合蛋白在巨噬细胞中表达并定位于细胞核 ,且hDaxx即时高表达可抑制地塞米松诱导的巨噬细胞凋亡。; 刘安元万艳平谭立志吴移谋余敏君; 关键词：HDAXX 巨噬细胞凋亡

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