单文鲁
- 作品数：18 被引量：101H指数：7
- 供职机构：新疆农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 利用SPA-固相免疫电镜技术快速诊断犬细小病毒性肠炎
- 王正党王林卿单文鲁
- 关键词：细小病毒肠炎犬病电子显微镜分析免疫技术
- 野马鼻肺炎病毒的分离鉴定被引量：13
- 1999年
- 从新疆昌吉州吉木萨尔野马饲养繁殖中心送检的野马病料中分离到１株病毒，我们对其进行了鉴定。该病毒株在ＢＨＫ－２１细胞上连传６代出现典型的细胞病变，用适应ＢＨＫ－２１细胞的病毒接种鸡胚成纤维细胞、乳豚鼠肾原代细胞、豚鼠睾丸细胞均出现程度不同的细胞病变。在电镜下可见到典型的马鼻肺炎病毒粒子。病毒对５－碘脱氧尿核苷、氯仿、乙醚等敏感。在ｐＨ３．０下失活，５６℃３０ｍｉｎ灭活。病毒能被马鼻肺炎病毒标准阳性血清所中和。病毒接种乳豚鼠出现典型致死性肝炎。结果表明，所分离病毒为马鼻肺炎病毒，并将该毒株定名为ＰＨ９３－１。
- 单文鲁杜建晁群芳吐尔逊.克里木冉多良任有才贾立群施远翔
- 关键词：野马马鼻肺炎病毒病毒
- 新疆幼畜和人非典型轮状病毒的调查和鉴定被引量：8
- 1995年
- 自１９８４至１９９４年１０年间，在新疆采集了绵羊、山羊羔、仔猪、犊牛、骆驼羔和鸡的粪样１９５９份，以及住院腹泻婴幼儿、无症状新生儿和成人腹泻的粪样２５５份，共２２１４份。用ＰＡＧＥ法检测了这些粪样中的轮状病毒和非典型轮状病毒。按Ｓａｉｆ电泳型分组法，检出的各组轮状病毒是：Ａ组２７６份，在成人腹泻和驼羔中未检出；Ｂ组２６份，都是从羊羔和仔猪中检出；Ｃ组２２份，都是从仔猪中检出；Ｄ组２份，在鸡中检出；似Ｅ组１份，从仔猪中检出。取检出的各组非典型轮状病毒９株，即羊羔Ｂ组２株（ＫＢ－６３和ＬＢ－６０），仔猪Ｂ组４株（ＭＰＢ－１、２，ＳＰＢ－３、４），仔猪Ｃ组２株（ＳＰＣ－１１、ＺＰＣ－１２），仔猪似Ｅ组１株（ＭＰＢ－５），口服接种剥夺初乳的本种动物，接种后１２－１６小时动物都发生急性水样腹泻，并检出大量病毒。对这９株病毒和１株成人腹泻轮状病毒（ＡＤＲＶ），用ＥＬＩＳＡ和对流免疫电泳检测Ａ、Ｂ组组抗原，结果ＡＤＲＶ、羊羔Ｂ组、仔猪Ｂ组和似Ｅ组共８株病毒都只有Ｂ组组抗原。用Ａ、Ｂ组轮状病毒生物素核酸探针斑点杂交分别检测８株和１０株病毒，血清学检测为Ｂ组者都只与Ｂ组有杂交信号。Ｃ组的两株则既无Ａ、Ｂ组组抗原，也不与Ａ、Ｂ?
- 王正党单文鲁黄嘉驷张福萍刘明军
- 关键词：轮状病毒
- 鸡传染性法氏囊病超强毒Gx及其致弱株基因组B节段的克隆和序列分析被引量：13
- 2005年
- 用蛋白酶K法分离提取了鸡传染性法氏囊病病毒强毒株Gx及其致弱株Gt的病毒核酸dsRNA ,应用随机引物将RNA反转录成cDNA ,以此为模板用长距离一步法扩增出全长基因B节段 ,将其克隆入PMD18_T载体 ,进行了测序 ,并用DNAStar软件进行序列分析。测序结果表明 ,克隆的Gx株B节段全长为 2 82 7bp ,与超强毒参考株UK6 6 1的同源性为 88 2 % ,与强毒参考株Harbin_1株的同源性达 96 3% ;克隆的Gt株B节段全长为 2 82 7bp ,与弱毒参考株P2的同源性达 99 5 %。而Gx株与Gt株B节段的核苷酸的同源性只有 89 8% ;vvIBDV_Gx。
- 包晓玮张厚双高宏雷付朝阳彭志伟单文鲁王笑梅
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒
- 抗犬细小病毒高免血清的制备和应用被引量：7
- 1993年
- 应用差速离心和密度梯度平衡离心技术从患 CPV 性肠炎的犬粪便和肠内容物中提纯的 CPV 抗原接种犬,制备了高效价的抗血清。用该血清共治疗78头病犬,治愈率达82%(64/78).实践表明,自制的高免血清对患 CPV性肠炎的病犬具有治疗和控制疾病发展的作用,特别是早期病例,仅用抗血清即可治愈,对中期病犬结合支持和对症疗法可大大提高治愈率,有很高的应用价值。
- 符子华赵有礼王正党单文鲁
- 关键词：犬病细小病毒免疫血清
- 鸡传染性法氏囊病超强毒Gx及其致弱株基因组B节段的克隆和序列分析
- 在蛋白酶K法分离提取了鸡传染性法氏囊病病毒强毒株Gx及其致弱株Gt的病毒核酸dsRNA,应用随机引物将RNA反转录成cDNA,以此为模板用长距离一步法扩增出全长基因B节段,将其克隆入PMD18-T载体,用DNAStar软...
- 包晓玮张厚双高宏雷付朝阳彭志伟单文鲁王笑梅
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒克隆
- 文献传递
- 新疆马鼻肺炎的血清学调查被引量：5
- 2003年
- 对新疆 11个地、州的 2 1个县 (市 )的 2 82 1份血清样品用微量补体结合试验进行了马鼻肺炎血清学调查。结果 ,仅在吉木萨尔县和奇台县境内检出 2 5份阳性血清。调查表明 ,虽然在新疆境内存在马鼻肺炎 。
- 单文鲁陶虹多里坤阿依吐拉李清源沈勇
- 关键词：血清学调查
- 新城疫病毒F48E9感染CEF细胞特异性表达基因的筛选鉴定
- 2005年
- 分别以NDVF48E9和LaSota株感染鸡胚成纤维细胞,于感染后8h提取NDV感染CEF细胞总RNA,通过mR NA差异显示技术筛选病毒感染诱导表达的特异性基因。主要方法是先以锚定引物经反转录后,然后以9～10bp随机引物为上游引物,以锚定引物Oligod(T)18为下游引物,进行PCR扩增,PCR产物采用8%的尿素变性PAGE胶电泳进行分离鉴定。对于特征性差异带进行第二次PCR扩增,克隆后测定其核苷酸序列。结果我们发现数个差异条带,选取差异带在500bp以内的条带,经测序后显示经NDVF48E9感染后,有一条差异条带特异性表达的基因所编码的蛋白与Receptor(TNFRSF)_interactingserine_threoninekinase2有47%同源,是一个新基因,其蛋白功能不明确,有可能和细胞的凋亡有关。
- 杨新艳刘培欣曹殿军闫丽辉孙建宏单文鲁
- 关键词：DDRT-PCR新城疫病毒鸡胚成纤维细胞基因表达
- 非洲猪瘟间接ELISA诊断试剂盒的研究被引量：30
- 2000年
- 用带有编码非洲猪瘟病毒衣壳蛋白Ｐ７２ 基因的重组杆状病毒（Ｂａｃｐ７２）作载体，在ｓｆ９细胞中表达并得到重组Ｐ７２蛋白，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ可得到分子量在 ７２ｋＤａ左右的电泳带。用标准阳性非洲猪瘟血清对 Ｐ７２蛋白进行 ＥＬＩＳＡ检测，证明该蛋白具有生物学活性。用Ｐ７２作为间接法的包被抗原，对ＥＬＩＳＡ反应条件进行了优化。确定最佳包被液为ＰＢＳ（ｐＨ７．２）、最佳封闭液为１％ＰＣＴ、最佳血清稀释液为４％ＰＥＧ６０００／ＰＢＳ、最佳冲洗液为０．５Ｍ ＮａＣｌ／０．５％Ｔｗｅｅｎ－２０／ＰＢＳ（ｐＨ７．２）。本实验反应体系采用５０μｌ的微量法，可节约试剂及抗原。反应在２小时内即可完成，达到了快速诊断的目的。包被了抗原并用封闭液封闭后的酶标板密封后保存于－２０℃的冰箱中，至少可以保存５个月。阻断试验和交叉试验表明ＥＬＩＳＡ法有良好的特异性。间接ＥＬＩＳＡ比Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法具有更高的灵敏性。血清学调查没有得到阳性结果，与我国实际情况相符。用Ｂａｃｐ７２表达的非洲猪瘟病毒Ｐ７２蛋白抗原作为间接ＥＬＩＳＡ的检测抗原来检测非洲猪瘟血清具有快速、简单、无感染的特点。本实验为非洲猪瘟ＥＬＩＳＡ检测试剂盒的最终组装提供了实验依据。
- 蒋正军马世东蔡丽娟单文鲁王树双尹燕博龚振华李葳宣华
- 关键词：非洲猪瘟ELISA
- 套式PCR分型检测马鼻肺炎病毒的方法研究被引量：2
- 2000年
- 马鼻肺炎病毒亚型１和亚型２被重新分类并命名为马疱疹病毒１型（ＥＨＶ－１）和马疱疹病毒４型（ＥＨＶ－４）。聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术可应用于检测并区分ＥＨＶ－１和ＥＨＶ－４。选择编码ＥＨＶ－１和ＥＨＶ－４的糖蛋白Ｂ（ｇＢ）基因作为引物。外侧引物为ＥＨＶ－１和ＥＨＶ－４ ＤＮＡ共有的核苷酸序列。内侧引物分别为ＥＨＶ－１或ＥＨＶ－４ ＤＮＡ特有的核苷酸序列。将琼脂免疫扩散试验检测为阴性的７１份马血清样品进行ＰＣＲ检测，其中检出３份血清为阳性，并确诊为ＥＨＶ－１型。结果表明，套式ＰＣＲ的灵敏度比一般ＰＣＲ提高１００倍左右，从而建立了一种快速、敏感、特异的检测并区分ＥＨＶ－１和ＥＨＶ－４的方法，确诊了从新疆普氏野马上分离的ＰＨ９３－１株为ＥＨＶ－１型。
- 易新萍单文鲁
- 关键词：套式PCR
