吴宜琴
- 作品数：22 被引量：201H指数：8
- 供职机构：南京医科大学基础医学院微生物学系与免疫学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省教育厅自然科学基金World Health Organization更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 日本血吸虫感染大鼠血清特异性IgG及IgG2a IgG2c同型水平的动态观察被引量：13
- 2000年
- 目的观察日本血吸虫感染大鼠血清中虫卵和成虫特异性抗体同型 ＩｇＧ、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｃ的动态变化。方法ＥＬＩＳＡ。结果三种特异性抗体同型均有明显升高，巨变化趋势基本一致，于感染后第３～８周升高，约在１２周达高峰并维持至观察结束的第１４周。结论提示ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｃ在日本血吸虫感染的免疫中可能具有一定的作用。
- 俞小淙吴观陵吴宜琴张耀娟章子豪
- 关键词：日本血吸虫病IGG2A
- 一个定向克隆的日本血吸虫基因表达库被引量：21
- 1997年
- 作者应用定向克隆的方法，将从日本血吸虫成虫mRNA合成的cDNA片段，重组入噬菌体λgtllSfi－Not的EcoRⅠ和NotⅠ双酶切点之间。所构成的基因表达文库的库容量为3．13×106重组子。经含有IPTG及X－Gal的颜色选择平皿测定，重组效率为100％。应用抗体探针法已从一部分文库中筛选出25个阳性克隆。从阳性克隆的进一步分析以及应用特定基因引物的PCR扩增，目前已分离出4个具疫苗保护潜能的蛋白编码基因，从而表明文库的质量比较满意。
- 陈淑贞吴海玮张兆松吴宜琴
- 关键词：定向克隆日本血吸虫成虫
- PBL教学法在七年制医学微生物学授课中的应用与体会被引量：12
- 2007年
- 探讨医学微生物学的教学方法,在临床专业七年制学生中尝试PBL教学和传统教学,采用问卷调查和考试成绩相结合的形式进行教学效果的评估,PBL教学法在医学微生物学的教学中可获得良好的教学效果。
- 冯东举王迎伟刘英霞吴宜琴
- 关键词：微生物学PBL教学
- NF-κB抑制剂(PDTC)对大鼠抗胸腺细胞血清性肾炎系膜细胞凋亡、坏死及增生的影响被引量：7
- 2005年
- 目的:研究吡咯二硫氨基甲酸脂(PDTC)作为NF-κB核转录因子特异性抑制剂对大鼠系膜增生性肾炎,即抗胸腺细胞血清性肾炎(ATSN)系膜细胞(MC)凋亡、坏死及增生病变的影响。方法:利用兔抗大鼠胸腺细胞抗血清(ATS)复制大鼠ATSN模型,并将大鼠设为3组,即ATSN模型组、ATSN+PDTC处理组和正常对照组。实验40min、24h和7d分别取各组大鼠肾皮质切片用末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术和光镜、电镜、免疫组化方法检查其肾小球内NF-κBp65的表达和MC凋亡、坏死及增生病变。结果:ATSN模型组实验40min时肾小球内NF-κBp65即开始表达,与对照组之间有显著差别(P<0.01),24h表达进一步增多,第7d时达到较高水平。而ATSN+PDTC处理组7d时,不仅肾内NF-κBp65的表达明显低于ATSN模型组,且肾小球MC的增生及细胞外基质(ECM)的分泌也低于ATSN模型组,但用PDTC处理对ATSN大鼠其早期(40min及24h)MC的病变无抑制效应。结论:NF-κB特异性抑制剂PDTC对ATSN大鼠的肾小球继发增生病变有抑制作用。
- 徐静华王迎伟徐娟吴宜琴佟建霞孙彬
- 关键词：吡咯烷类NF-KB肾炎细胞凋亡
- 沉默TSP-1基因对亚溶解型C5b-9复合物诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响
- 2011年
- 目的:研究沉默血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)基因对于亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物诱导大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)增殖的影响。方法:设计合成针对TSP-1基因的发夹式siR-NA(small hair RNA,shRNA),并构建相应的表达质粒,将TSP-1 shRNA(shTSP-1)转染体外培养的大鼠GMC,再给予亚溶解型C5b-9刺激。以实时PCR和蛋白质印迹法检查各组GMC中TSP-1、细胞周期蛋白D2(cyclin D2)及增殖细胞核抗原(proliferative cell nuclear antigen,PCNA)的mRNA及蛋白表达情况。另用3H-胸腺嘧啶核苷酸掺入法(3H-thymi-dine incorporation,3H-TdR)和CCK-8(cell counting kit-8)方法分别检查GMC的DNA合成及细胞数量的改变。最后,观察各组GMC中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达情况。结果:使用shTSP-1沉默TSP-1基因,对于亚溶解型C5b-9刺激GMC后18 h诱导的cyclin D2和PCNA表达及DNA合成均无显著影响,但是shTSP-1能够抑制亚溶解型C5b-9刺激GMC 54 h时细胞数量的增加,同时能下调由亚溶解型C5b-9刺激GMC引起的α-SMA表达。结论:用shTSP-1沉默GMC中的TSP-1基因,可抑制亚溶解型C5b-9刺激GMC的增殖和α-SMA的合成,shTSP-1对GMC增殖的影响可能与其下调α-SMA的表达有一定关系。
- 吴宜琴车楠冯雪凤邱文王迎伟
- 关键词：肾小球系膜细胞血小板反应蛋白-1增殖Α-平滑肌肌动蛋白
- 日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30的建株及初步鉴定被引量：71
- 1991年
- 用感染8条日本血吸虫尾蚴,时间长达一年半的BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用兔抗日本血吸虫肠相关抗原和兔抗可溶性虫卵抗原免疫血清与细胞培养上清进行ELISA筛选阳性克隆,最终建立了分泌单克隆抗独特型抗体细胞株NP30。作者用一系列试验证明,NP-30是日本血吸虫肠相关抗原的内影象抗独特型抗体,有替代日本血吸虫虫源性抗原用于血清学诊断的可能性。
- 管晓虹仇镇宁马磊陶如华吴宜琴河清吴观陵赵慰先
- 关键词：血吸虫抗独特型抗体
- 日本血吸虫虫卵核糖核酸的提取及鉴定被引量：1
- 1997年
- 本文采用异硫氰酸胍－酚－氯仿一步法成功地提取了日本血吸虫虫卵总RNA，琼脂糖电泳结果呈现18S一条主带，与日本血吸虫成虫RNA的电泳结果一致。日本血吸虫虫卵RNA的抽提成功为虫卵cDNA库的构建以及虫卵有效抗原的筛选奠定了基础。
- 俞小淙张耀娟吴宜琴章子豪吴观陵赵慰先
- 关键词：日本血吸虫虫卵核糖核酸
- 中国大陆不同地域隔离群湖北钉螺基因组DNA的限制酶切长度差异被引量：17
- 1994年
- 为证实中国大陆湖北钉螺不同地理株的存在,制备了各地钉螺的基因组DNA,经限制性内切酶Bam HI和Pst I酶解后,置0.8%琼脂糖凝胶电泳,比较分析不同地域隔离群钉螺基因组DNA重复序列DNA的限制酶切长度差异.安徽、四川、云南、湖南、湖北、江苏、上海、福建、江西等9地隔离群钉螺的DNA酶切带型.主带基本一致;次带差异明显.以四川普格、云南巍山、江苏东台之间差异较大.湖北省的汉川、洪湖、荆州、石首、咸宁的钉螺酶切图谱基本一致.提示不同隔离群钉螺存在一定的同源和亲缘关系.在基因水平上的差异程度与隔离群之间距离和自然环境关系密切.在一定区域内的钉螺DNA相对稳定.
- 周晓农孙乐平徐秋洪青标吴中兴冯笑川陈淑贞吴宜琴吴观陵陆安生
- 关键词：湖北钉螺基因组DNA限制性内切酶
- 结核杆菌ESAT-6抗原及Flt3配体双表达核酸疫苗的构建与体外表达被引量：2
- 2007年
- 目的:构建可同时表达flt3配体(flt3-ligand,FL)和结核杆菌6kD早期分泌蛋白(ESAT-6)的重组pIRES质粒,并在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中表达,为进一步研究结核杆菌DNA疫苗提供实验基础。方法:采用PCR方法将FL和ESAT-6基因分别定向克隆入真核双表达载体pIRES。在酶切分析及序列测定后,用脂质体转染至GMC细胞,Westernblot鉴定其体外表达。结果:核酸序列测定证实重组质粒构建正确,该重组质粒在体外GMC细胞中能表达FL和ESAT-6两种蛋白。结论:成功构建了结核杆菌FL和ESAT-6双顺反子真核表达质粒,并在体外实现了共表达。
- 徐闻欢徐娟王迎伟陈霞高玲娟吴宜琴
- 关键词：结核杆菌核酸疫苗体外表达
- 单克隆抗独特型抗体NP30用于日本血吸虫病血清学诊断的研究被引量：5
- 1993年
- 本研究用单克隆抗独特型抗体NP30与日本血吸虫肠相关抗原(GAA)和可溶性虫卵抗原(SEA)检测了702份不同病期及正常人群中的血清抗体,结果显示,在急性感染时,NP30抗体的检出率为98％,与GAA(94％)和SEA(98％)的无差别。在慢性感染时NP30抗体的检出率为87％,与GAA(86％)的无差别,但低于SEA(98％)的。在正常人群中,上述3种的抗体假阳性率均为3％左右,无差别。NP30的抗体滴度几何均数在急性血吸虫感染时高于GAA的,低于SEA的,在慢性感染时低于后两者,提示NP30的抗体在血吸虫感染期间出现比较早,消退较快。上述结果提示,NP30可以替代虫源性抗原,用于日本血吸虫病诊断。
- 吴宜琴陶如华仇镇宁罗建平管晓虹吴观陵赵慰先
- 关键词：血吸虫血清抗体
