周惠琼
- 作品数：65 被引量：373H指数：10
- 供职机构：广东省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金广东省科技计划工业攻关项目World Health Organization更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 广州市海珠区2012-2015年登革病毒分子流行病学分析被引量：7
- 2016年
- 目的 了解2012-2015年广州市海珠区流行的登革病毒分子特征及可能的传播来源.方法 收集2012-2015年登革热患者血清样本,分析登革热流行特征.筛选急性期血清,核酸阳性标本用于细胞培养分离毒株,RT-PCR扩增登革病毒E基因全长,测序并利用分子生物学软件进行生物特征和信息学分析.结果 2012-2015年区域内共报告病例6 260例,各年龄段均有发病,10月份为发病最高峰;选取发病5d内核酸检测阳性的血清样本48例,成功分离16株病毒,扩增测序获得E基因全长,比对发现2013年及2014年共11株分离株为同一种毒株,属于1型登革病毒G1型,与广州2009年分离株核苷酸同源性高达99.93％,与泰国流行株氨基酸同源性高达98.38％.2015年5个分离株为同一毒株属于2型登革病毒Cosmopolitan基因型,与印度流行株亲缘关系最近.结论 区域内近4年的1型登革病毒属于G1基因型,最可能来源于泰国.2型登革病毒属于Cosmopolitan基因型,可能来源于印度流行株.
- 郭鹏娟吴德张欢周惠琼谭锦花许少洪
- 关键词：登革热病毒基因
- 2008年广东省儿童手足口病病原学监测被引量：52
- 2009年
- 目的监测手足口病的病原体,为预防和控制肠道病毒感染提供依据。方法采集手足口病患儿的粪便、肛拭子、咽拭子、疱疹液进行RT-PCR定性,肠道病毒通用引物阳性的标本进行病毒分离;分离株用EV71和CA16的VP1基因的特异性引物进行RT-PCR鉴定。结果共收集患儿标本443份,肠道病毒通用引物阳性259份;做病毒分离256份,阳性150份,其中粪便158份,病毒分离阳性112份,阳性率为70.89%;肛拭子21份,病毒分离阳性10份,阳性率为47.62%;咽拭子65份,病毒分离阳性26份,阳性率为40.00%;疱疹液10份,病毒分离阳性2份,阳性率为20.00%。结论粪便、肛拭子、咽拭子、疱疹液的分离率有显著差异,粪便分离率最高;EV71和CA16是引起小儿手足口病的主要病原体,死亡病例全部是由EV71病毒引起。
- 郭雪郑焕英莫艳玲周惠琼刘冷柯昌文邓小玲
- 关键词：手足口病肠道病毒感染儿童
- 登革病毒IgM抗体酶联免疫诊断试剂盒
- 本发明涉及一种登革病毒抗体酶联免疫诊断试剂盒。本发明所述的试剂盒包括酶标记板、阴性对照血清、阳性对照血清、酶标记物、样品稀释液、浓缩洗涤液、底物显色液、终止液、封板胶，所述酶标记物包含羊抗人IgM-HRP；所述酶标记板上...
- 江立敏周惠琼郑夔柯昌文
- 文献传递
- 登革病毒IgM及IgG抗体诊断试剂盒的研制与应用
- 周惠琼江立敏顾耀亮郑夔柯昌文林锦炎梁文燕罗会明陈跃龙杨杏芬邓峰许小频谢雪妹何剑峰颜瑾
- 该项目主要对制约中国酶联免疫诊断试剂发展的抗原制备技术进行攻关，采用原核表达系统，克隆、表达并纯化出登革病毒1-4型特异性抗原，研制成功“登革病毒IgM抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)”和“登革病毒IgG抗体诊断试剂盒(酶联...
- 关键词：
- 关键词：登革病毒抗体诊断试剂盒抗原制备
- 一株新正黏病毒(龙川病毒)的鉴定及分子特征研究
- 2019年
- 2013年在中国广东省开展了虫媒病毒分布及其分子特征的研究,在广东省龙川县采集的致倦库蚊中分离到一株病毒,该病毒可以引起C6/36细胞的病理性效应。为了对该病毒进行鉴定,并对其分子特征进行研究,将病毒培养物用氯化铯进行梯度离心,负染电镜观察病毒的形态,提取并单引物等温扩增(SPIA)病毒RNA,利用Ion Torrent平台进行深度测序,获得的序列用CLC Genomic Wokbench 9.0软件进行拼接,本地BLAST进行分类比对。用MEGA软件登录GenBank,下载正黏病毒科代表株序列并绘制进化树,同时用ClustalW2软件与新毒株进行氨基酸同源性比对和编码框序列的分析。电镜观察结果显示该病毒呈球形,直径大小约100nm;深度测序共获得6个完整开放阅读框(Open reading fragment,ORF)的节段序列,5个节段(PB1、PB2、PA、NA、HA)的氨基酸序列与正黏病毒科的Quaranjavirus属病毒同源关系在26.38%~67.23%之间,其中PB1的同源性最高,PB2的同源性最低,未发现与其它病毒有同源关系。本研究在中国首次从蚊虫中分离并鉴定了一株新的虫媒病毒,属于正黏病毒科Quaranjavirus属的家族成员,命名为龙川病毒,这是中国国内首次报道从致倦库蚊中分离到龙川病毒。
- 张欣刘哲谈琦琪张欢周惠琼李柏生吴德曹玉玺王环宇梁国栋
- 关键词：致倦库蚊分子特征
- 3'端锚定随机引物检测与鉴定未知DNA病毒方法研究
- 2010年
- 目的建立一种用3'端锚定随机引物检测与鉴定未知DNA病毒核酸的方法。方法将本实验室分离到的1株DNA病毒分离物用过滤器过滤后,加入适当的核酸酶消化,提取消化物中的病毒核酸,分别用3'锚定随机引物RP1和RP2对上述病毒核酸进行PCR扩增,凝胶电泳并纯化该PCR产物,纯化后的PCR产物与T载体连接并转入JM109感受态细胞,蓝白斑筛选挑选阳性克隆进行测序,登录NCBI网站,利用BLAST软件进行序列比对和确认。结果凝胶电泳显示2种3'端锚定随机引物PCR产物大小均在500bp以上,并呈涂布状,RP1的PCR产物较RP2小;分别挑取RP1和RP2随机引物PCR产物克隆各7个,分别有6、2个克隆携带有目的病毒核酸片段,挑取上述8个阳性克隆进行测序,其中获得500bp以上的序列7条,500bp以下序列1条,其中最长的达741bp,最短的398bp;序列分析证实这些片段均与腺病毒2型同源性最高,同源性高达98%～99%。结论 RP1和RP2引物均能成功鉴定目标病毒,且RP1较RP2具有更高的扩增效率和敏感性。初步建立一种利用3'端锚定随机引物检测与鉴定未知DNA病毒的方法。
- 吴德莫艳玲周惠琼李晖黄平柯昌文
- 关键词：DNA引物逆转录-聚合酶链式反应
- 广东2003年末SARS患者冠状病毒抗原抗体动态特征分析被引量：1
- 2005年
- 目的 分析SARS IgG、SARS IgM、核壳蛋白 IgG抗体和核壳蛋白抗原的变化特点并探讨其意义。方法 采用酶联免疫方法对 2 0 0 3年末至 2 0 0 4年初新发 4例SARS病人的系列血清进行上述 4项的滴度检测。结果 在病人较早期的血清中可以检测到核壳蛋白抗原 ,随着抗体水平的升高 ,抗原含量迅速下降。抗体上升下降快 ,在最高水平维持时间短 ,并且除第 1例外 ,其余 3例的抗体滴度均小于 1∶1 0 0 ,核壳蛋白抗体变化规律与总的IgG抗体一致 ,但滴度更低。结论 抗体变化规律与前次流行不同 ,抗体水平变化快 ,应注意及时采集标本。抗原检测可作为一种实验室诊断依据。核壳蛋白抗体可考虑用于早期诊断。
- 李晖方苓周惠琼刁丽梅万卓越
- 关键词：SARS患者SARS病人酶联免疫方法抗原含量采集标本
- 中国18例输入性寨卡病毒感染者实验室检测结果分析被引量：6
- 2016年
- 目的：了解寨卡病例的排毒途径和时间，为寨卡病例的实验检测提供科学依据。方法收集寨卡病例不同时间的多类临床样本，用real-time RT-PCR方法对其进行核酸检测，阳性标本进行乳鼠颅内和细胞接种分离寨卡病毒，将获得的寨卡病毒利用二代测序方法进行全基因组测序，所测得的序列与GenBank中寨卡序列进行系统进化分析。结果18例感染者尿液、唾液和血清样本中寨卡病毒核酸阳性率分别为82.4%（14/17）、82.4%（14/17）和52.9%（9/17），尿液排毒的持续时间最长，其次是唾液和血液。9份阳性血清标本共分离到6株寨卡病毒，进化分析6条寨卡基因组序列均属于亚洲族系，来自萨摩亚与委内瑞拉的病毒位于不同的进化分支中。结论唾液、血清和尿液均可用于寨卡病例的日常检测，尿液和唾液的核酸检测率更高，阳性血清更容易分离到寨卡病毒。乳鼠和细胞均可用于寨卡病毒的分离，但乳鼠颅内接种的病毒分离率更高。
- 吴德张欢谈琦琪孙九峰周惠琼宁丹管大伟
- 关键词：唾液虫媒病毒尿液
- 登革病毒IgG抗体酶联免疫诊断试剂盒
- 本发明涉及一种登革病毒抗体酶联免疫诊断试剂盒。本发明所述的试剂盒包括酶标记板、阴性对照血清、阳性对照血清、酶标记物、样品稀释液、浓缩洗涤液、底物显色液、终止液、封板胶，所述酶标记物包含羊抗人IgG-HRP；所述酶标记板上...
- 江立敏周惠琼郑夔柯昌文
- 文献传递
- 2020年广东省诺如病毒感染性腹泻监测分子流行病学特征分析
- 2023年
- 目的了解2020年广东省诺如病毒感染性腹泻的分子流行病学特征。方法收集广东省2020年1—12月感染性腹泻监测数据及粪便样本,采用实时荧光定量PCR法鉴定样本中的诺如病毒,筛选出诺如病毒阳性样本进行PCR扩增和测序,序列拼接处理后对其进行分型分析,同时对病例数据进行流行病学特征分析。结果2020年1—12月共收集到广东省23家哨点医院感染性腹泻样本1415份,诺如病毒检出率为22.05%(312/1415)。不同月份及季度的诺如病毒检出率差异有统计学意义(均P<0.01),其中第4季度检出率最高,为44.16%(174/394),第2季度检出率最低,为8.64%(31/359)。不同地区、性别的感染性腹泻病例诺如病毒检出率差异均无统计学意义(均P>0.05),不同年龄组间的诺如病毒检出率差异有统计学意义(P<0.01)。基因分型分析表明2020年广东省诺如病毒感染性腹泻主要由诺如病毒GII型引起,占81.73%,其中以GII.2[P16]和GII.4[P31]为主,分别占70.47%、12.08%。结论诺如病毒是引起广东省感染性腹泻的主要病原之一。不同季度的诺如病毒流行型别有变化,GII.2[P16]逐渐成为2020年广东省诺如病毒优势型别。
- 梁玉凤方苓徐静李彩霞周惠琼柯昌文
- 关键词：诺如病毒感染性腹泻基因型分子流行病学
