姚利晓
- 作品数：85 被引量：277H指数：9
- 供职机构：西南大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家高技术研究发展计划中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 检测柑橘铁螯合还原酶家族基因的方法
- 本发明公开了一种检测柑橘铁螯合还原酶家族基因的方法，包括步骤：1)选取1年生的资阳香橙、卡里佐枳橙和枳的实生苗用作组织表达分析的材料；2)提取各实生苗根、茎、叶组织的RNA；3)以步骤2)提取的RNA为模板，反转录合成c...
- 姚利晓陈善春何永睿许兰珍雷天刚邹修平彭爱红
- 文献传递
- 柑橘溃疡病抗性相关转录因子CitMYB20的功能被引量：2
- 2020年
- [目的]了解柑橘不同品种CitMYB20对柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri,Xcc)和外源植物激素的应答情况,评价转基因植株对柑橘溃疡病的抗性,验证CitMYB20的生物学功能.[方法]根据柑橘基因组序列设计引物,PCR法同源克隆柑橘溃疡病抗性品种金弹金柑(Fortunella japonica)和敏感品种枣阳小叶枳(Poncirus trifoliata)的CitMYB20基因序列和启动子序列,利用在线软件PlantCARE对启动子序列进行顺式作用元件预测.以针刺法对金弹金柑和枣阳小叶枳离体叶片接种柑橘溃疡病菌,用外源激素水杨酸、茉莉酸甲酯和乙烯利处理金弹金柑和枣阳小叶枳的叶片,在处理的不同时期收集材料,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CitMYB20的表达水平.分别构建CitMYB20的过表达载体和抑制表达载体,根癌农杆菌法转化枳上胚轴,随机摘取转基因株系成熟叶片进行柑橘溃疡病离体抗性评价.[结果]金弹金柑和枣阳小叶枳中CitMYB20(GenBank登录号分别为MN689609和MN689608)序列高度保守,相似度达到99%;两者的启动子序列(GenBank登录号分别为MN689611和MN689610)虽然都具有脱落酸和茉莉酸甲酯的响应元件,但金弹金柑中还具有水杨酸响应的顺式作用元件,而枣阳小叶枳中缺少该元件.在体外接种柑橘溃疡病菌5 d时,金弹金柑成熟叶片中CitMYB20表达量显著上升,达到对照的2.5倍;而枣阳小叶枳叶片CitMYB20在整个接菌周期内表达量未发生显著变化.外源激素处理时,CitMYB20对水杨酸和茉莉酸甲酯的响应相似,即在金弹金柑中呈现出先升高后降低的趋势,而在枣阳小叶枳中表达量降低,随后又恢复正常.乙烯利处理时,CitMYB20在金弹金柑中表达量略有下降,在枣阳小叶枳中表达量先升后降.遗传转化共获得7株过表达植株和5株抑制表达植株,转基因植株与对照植株相比在形态发育上未见明显差异.CitMYB20过表达植株能够在一定程度上减弱柑橘溃�
- 姚利晓范海芳张庆雯何永睿许兰珍雷天刚彭爱红李强邹修平陈善春
- 关键词：柑橘溃疡病过表达
- CjFRO2在转基因枳中的整合与表达被引量：2
- 2011年
- 三价铁螯合物还原酶(Ferric-chelator reductase,FCR)在植物对三价铁的吸收过程中起着关键作用,导入外源三价铁螯合物还原酶基因是改良植物耐缺铁能力的有效途径。香橙(Citrus junos Sieb.ex Tanaka)是目前表现最好的柑橘耐缺铁砧木之一,在铁胁迫时,香橙三价铁螯合物还原酶基因(CjFRO2)在根尖表皮细胞中高效表达,根系三价铁还原活性显著增强。以枳[Poncirus trifoliata(L.)Raf.]上胚轴为材料,利用根癌农杆菌介导法将CaMV 35S-CjFRO2基因表达单元导入枳基因组中,拟通过CjFRO2基因在转基因枳中的组成型表达,提高转基因枳的铁吸收能力。经过PCR检测,Southern杂交分析,获得4个单拷贝的转CjFRO2基因枳株系PF2、PF3、PF5和PF8。Real-TimePCR分析表明,CjFRO2基因在4个转基因枳株系中都能有效表达,并在其无性繁殖后代中也能够稳定表达。为培育耐缺铁优良柑橘砧木新品种奠定了基础。
- 刘小丰彭爱红许兰珍雷天刚姚利晓何永睿陈善春
- 关键词：香橙
- 一种柑橘CsGSTU18基因及其应用
- 本发明公开了一种柑橘CsGSTU18基因及其应用，所述柑橘CsGSTU18基因是柑橘溃疡病的感病基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示或者在SEQ ID NO：1所示核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或几个核苷酸且...
- 李强傅佳黄馨喻奇缘杨雯樊捷张晨希线宝航何永睿陈善春姚利晓
- 东方田鼠清洁级种群的建立和抗日本血吸虫病机制研究
- 林矫矫高诚魏梅雄谢建云傅志强刘金明邢正弘柏熊蒋守富李浩潘漪清石耀军邵伟娟何艳燕倪丽菊姚利晓王胜昌孙军吴祖立陆珂沈志敏潘彩娥刘雄伟蔡幼民王长江
- 该项目引进了洞庭湖东方田鼠（长江亚种），宁夏青铜峡东方田鼠（指名亚种）和黑龙江金山屯东方田鼠（东北亚种），进行驯化，在此基础上建立了清洁级东方田鼠种群。该项目观察了日本血吸虫在东方田鼠体内的发育与消亡情况，证实了东方田鼠...
- 关键词：
- 关键词：东方田鼠日本血吸虫抗病机制
- 枳PtMLP1启动子的克隆和表达分析
- 2023年
- 【目的】基因工程是柑橘品种改良的一种重要手段。本研究基于枳根消减文库中主要乳胶蛋白基因PtMLP1片段,克隆根特异启动子序列,为研究外源基因在柑橘根组织的特异表达奠定基础。【方法】同源克隆PtMLP1及启动子序列。利用ExPASy、PSIPRED、SWISS-MODEL等在线软件对PtMLP1编码蛋白的理化特征、二级结构和三级结构进行生物信息学分析,利用PlantCARE数据库对PtMLP1启动子的顺式作用元件进行预测。实时荧光定量PCR法对PtMLP1在不同树龄枳根和叶中的表达进行分析。构建PtMLP1启动子与GUS标记基因的融合载体,利用根癌农杆菌转化法转化枳上胚轴,GUS染色观察标记基因的表达部位。【结果】枳PtMLP1含2个外显子和1个内含子,开放阅读框长471 bp。PtMLP1蛋白由156个氨基酸组成,分子量17.63 kDa,等电点5.49,含Bet v I功能域。其二级结构含3个α-螺旋和7个β-折叠,三级结构包含一个保守疏水基结合位点和一个富含甘氨酸的回环结构。5′端1666 bp的上游调控序列不仅有TATA-box、CAAT-box等启动子结构的核心元件,还具有多个根组织特异表达元件,以及TGACG-motif、P-box和ABRE等激素应答相关的顺式作用元件。3′端非翻译区具有加尾信号AATAAA。该基因在1月龄苗、6月龄苗、20年生成年枳根中的表达量分别是叶中的46.34、74.82、110.25倍。构建启动子的融合表达载体pBI121-ProPtMLP1::GUS,获得枳转基因植株。PtMLP1启动子驱动GUS在转基因枳幼苗根中特异表达,GUS在3个转基因枳株系的根中表达量分别为叶中表达量的124.78、11.53和7.76倍。【结论】获得柑橘主要乳胶蛋白PtMLP1及启动子序列,该启动子可驱动标记基因在柑橘根组织特异表达。
- 姚利晓苏娟郭兴茹李凤龙何永睿邹修平陈善春
- 关键词：GUS
- 日本血吸虫生长发育相关基因的筛选、分析及功能研究
- 林矫矫冯新港程国锋苑纯秀傅志强刘金明石耀军金由辛蔡幼民周元聪金亚美姚利晓朱传刚陆珂李浩夏艳勋孙安国陶丽红赵晓宇张慧杨柳
- 依据血吸虫的一些重要生物学特征，如血吸虫雌雄合抱是雌虫发育成熟、产卵的基础，童虫是血吸虫在终宿主体内早期发育的虫体阶段，虫卵是血吸虫病最重要的致病原和传染源，一些在血吸虫不同发育阶段特异或差异表达的基因或蛋白可能在血吸虫...
- 关键词：
- 关键词：日本血吸虫功能基因生长发育
- 资阳香橙根cDNA全长文库的构建及EST分析
- 以资阳香橙根RNA为材料，采用SMART技术构建了cDNA全长文库并对其质最进行了鉴定。结果显示，该文库的库容量为4.8×105 pfu·mL-1，重组率为93％，文库插入片段大小主要集中在0.5～1.0 kb。从文库中...
- 王金萍姚利晓李凤龙何永睿陈善春
- 关键词：表达序列标签EST分析
- 文献传递
- 黄龙病菌胁迫下‘锦橙’CsCalS5表达和胼胝质沉积的初步分析被引量：3
- 2021年
- 胼胝质合成酶是控制胼胝质合成的关键酶,在植物生长发育和抗逆胁迫中具有重要作用。克隆并分析‘锦橙’胼胝质合成酶基因CsCalS5及其启动子序列,实时荧光定量PCR检测CsCalS5的组织表达模式以及植物生长调节剂、黄龙病菌和柑橘溃疡病菌的诱导表达模式,并通过组织切片观察感染黄龙病和柑橘溃疡病‘锦橙’叶脉胼胝质的沉积。结果显示,CsCalS5启动子序列中含有脱落酸和病原菌的响应元件;CsCalS5编码1952个氨基酸含有保守结构域FKS1和β-1,3-葡聚糖合成酶功能域的跨膜蛋白;CsCalS5在‘锦橙’的茎中高表达,且受脱落酸的诱导;黄龙病菌侵染后叶脉韧皮部的胼胝质沉积明显,患病叶片CsCalS5的表达量是健康对照的4.02倍;柑橘溃疡病菌侵染叶片后,叶脉韧皮部胼胝质沉积无明显增加,且CsCalS5的表达量与健康对照无显著差异。综上,黄龙病菌可能通过上调‘锦橙’CsCalS5的表达促进韧皮部胼胝质的沉积,从而增强其防御能力,且这种抗性可能受到脱落酸的调控。
- 张庆雯祁静静谢宇谢竹彭蕴李强彭爱红邹修平何永睿陈善春姚利晓
- 关键词：柑橘黄龙病
- 日本血吸虫信号转导蛋白Sjwnt-4基因的克隆、表达及应用
- 本发明公开了利用RACE技术从日本血吸虫19天童虫中首次扩增到一个Wnt家族基因，序列分析表明该基因的完整编码框含1311bp，编码436个氨基酸，理论分子量49.6kD。同源性分析结果表明，该基因的氨基酸序列具有典型W...
- 林矫矫陶丽红苑纯秀姚利晓傅志强冯新港刘金明石耀军王欣之贾人初
- 文献传递
