孔璐
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 大肠杆菌链长控制基因ddsA原位替换及多基因共表达对辅酶Q_(10)合成能力的影响被引量：2
- 2009年
- 目的强化大肠杆菌合成辅酶Q10(CoQ10)的能力。方法利用途径工程的基本原理,对大肠杆菌辅酶Q生物合成途径中链长控制基因ispB进行遗传操作,并强化表达该途径中多个功能基因。结果首次成功用来自Gluconobacter suboxydans的十聚异戊二烯焦磷酸合成酶基因ddsA原位替换大肠杆菌染色体上ispB基因,构建得到原位替换株JKL;同时强化表达CoQ生物合成途径的相关基因,发现在ubiCA和ddsA协同表达的重组菌pDCA/JKL中CoQ的合成能力比JKL提高了2.3倍,CoQ10合成量提高了2.5倍。检测该重组菌中ubiA的转录水平,发现其mRNA相对拷贝数是对照JKL的125倍。结论成功获得的重组大肠杆菌在降低内源性CoQ8合成能力的同时具备合成较长侧链CoQ10的能力,且通过强化表达相关基因使合成CoQ10的能力得到了提高。
- 孔璐傅楠叶江吴海珍张惠展
- 关键词：大肠杆菌辅酶Q10QRT-PCR
- 大肠杆菌CoQ生物合成基因的表达特征
- 大肠杆菌CoQ生物合成途径中isopB基因是链长控制基因，编码八聚异戊二烯焦磷酸合成酶。本课题通过异源十聚异戊二烯焦磷酸合成酶编码基因ddsA原位替换大肠杆菌染色体上ispB基因，首次成功构建得到原位替换株JKL，使大肠...
- 孔璐
- 关键词：大肠杆菌COQ降解机制
- 基因替换及多基因共表达强化大肠杆菌辅酶Q_(10)的合成能力
- 2008年
- 为了强化大肠杆菌合成辅酶Q10(CoQ10)的能力,对大肠杆菌进行了相关的基因操作。通过敲除大肠杆菌染色体上的聚八异戊二烯焦磷酸合成酶基因ispB,并导入来自Gluconobactersuboxydans的聚十异戊二烯焦磷酸合成酶基因ddsA,使大肠杆菌具有CoQ10合成能力的同时降低了内源性辅酶Q8(CoQ8)的合成。采用双质粒共表达系统,对CoQ生物合成途径中多个功能基因进行了强化表达,构建得到的重组大肠杆菌CoQ的合成能力、CoQ10合成的专一性都有明显改善,其中ubiCA和ddsA基因的协同表达效果最为明显,CoQ的合成能力比对照提高了65%,而CoQ10的合成量也提高了1.1倍。
- 傅楠叶江吴海珍孔璐张惠展
- 关键词：大肠杆菌基因缺失辅酶Q
