孙聪 作品数:16 被引量:18 H指数:3 供职机构: 第四军医大学唐都医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省科技攻关计划 国家杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
microRNA-15a模拟物对人关节软骨细胞增殖与凋亡的影响 被引量:7 2013年 目的:近年来研究表明,关节软骨细胞凋亡在骨关节炎发病过程中起到了重要的作用,本文旨在探讨microrna-15a模拟物对于原代人膝关节软骨细胞增殖与凋亡的影响。方法:取人外伤性截肢后的膝关节软骨,采用双酶消化法分离获得人膝关节软骨细胞,并进行体外培养,通过甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色进行软骨细胞鉴定。将培养的软骨细胞传代后取第1代细胞,分为实验组和对照组,实验组采用mir-15a模拟物(has-mir-15a mimics)转染软骨细胞,上调软骨细胞内mir-15a的表达量;对照组分为阴性对照组、空白对照组。采用MTT法测定细胞增殖曲线,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果:原代细胞中细胞呈多角形、圆形与梭型,贴壁生长;甲苯胺蓝染色胞质呈深蓝色,Ⅱ型胶原染色胞质呈黄褐色,为特异性染色。经统计学分析,实验组与对照组相比增殖速率明显下降(P<0.05)。实验组凋亡率(7.13%±0.57)与阴性对照组凋亡率(2.66%±0.15)相比明显增高(P<0.05)。结论:采用双酶消化法成功分离并培养具有生物学特性的原代人膝关节软骨细胞,通过转染mir-15a模拟物外源性增加关节软骨细胞内mir-15a表达量可显著促进其凋亡并抑制其增殖,为阐明骨关节炎发病机制提供了新的理论依据,为临床治疗提供了新的靶点。 颜世举 靳雷 肖春 王鑫 孙聪 张开亮 裘秀春 马保安 范清宇关键词:软骨细胞 骨关节炎 细胞增殖 CXCR4在脊索瘤组织中的表达及其临床意义 2013年 目的:探讨脊索瘤组织中CXCR4的表达情况,并分析其在脊索瘤侵袭和复发中的作用及临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测42例脊索瘤及16例骨样骨瘤患者标本中CXCR4的表达,并分析其与侵袭复发的关系。结果:脊索瘤组织中CXCR4的阳性表达率为80%(34/42),而在骨样骨瘤中的表达率为12.5%(2/16),两者比较有显著差异(P<0.01),在正常脊索组织中无表达。CXCR4的表达与脊索瘤患者的性别、年龄无关(P>0.05);而与脊索瘤有无复发有关(P<0.05)。结论:CXCR4可能在脊索瘤细胞侵袭、复发的过程中起重要作用,为进一步的研究奠定基础。 刘云燕 裘秀春 张殿忠 郭明君 孙聪 文艳华 马琼 范清宇关键词:脊索瘤 趋化因子受体4 免疫组织化学 复发 解析PBL临床教学中教师教学观念转变及角色定位 被引量:6 2013年 在临床PBL教学中教师的定位是导演,学生是主演;教师转变传统教学观念及方法,对达成以学生为主体、问题为中心的核心目的,体现PBL在教学内涵、目的、形式、评估、效果等诸多方面的优势至关重要。PBL过程中教学相长,相辅相成,教师是学习者,也是合作者。高瞻远瞩,一专多能,教师应具备教育国际化的眼光和能力,注重全面素质提高。 周勇 杨彤涛 孙聪 钱树 袁一方关键词:PBL 教师 临床教学 人microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒载体的构建及对人骨肉瘤细胞系SOSP-9607生物学特性的影响 目的 通过构建携带针对microRNA-194的shRNA载体及过表达载体,包装慢病毒,感染人骨肉瘤细胞系SOSP-9607,改变细胞内microRNA-194基因的表达水平,研究microRNA-194对细胞增殖、凋亡... 韩康 赵廷宝 卞娜 蔡成魁 颜世举 王鑫 肖春 孙聪 杨静 杨彤涛 周勇 马保安关键词:慢病毒 骨肉瘤 PBF在骨肉瘤中的表达及其临床意义 目的 探讨PBF(Papillomavirus Binding Factor)在骨肉瘤组织中的表达与临床病理特征之间的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测70例骨肉瘤组织,30例骨软骨瘤及10例正常组织中PBF的表达.结... 孙聪 谢晓晨 刘云燕 张伟 徐奎 文艳华 杨连甲 廖博 周勇试用期医学毕业生向医生转变过程中的突出矛盾及对策 2013年 试用期医学毕业生与患者之间以及与指导教师之间的矛盾,直接影响其获取足够的相关专业知识与技能而成为医生。司法、教育、医学部门应完善修订相关法律规定;建立完善试用期医学毕业生培养组织机构,制定培养组织方案,确定培养评价标准;建设分享功能强大的临床技能模拟培训中心;保证稳固持续的师承关系等,均是解决这两个矛盾的对策。 杨彤涛 周慧 张小平 孙聪 袁一方 钱澍 周勇关键词:医生 人microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒载体的构建及对人骨肉瘤细胞系SOSP-9607生物学特性的影响 2014年 目的:通过构建携带针对microRNA-194的shRNA载体及过表达载体,包装慢病毒,感染人骨肉瘤细胞系SOSP-9607,改变细胞内microRNA-194基因的表达水平,研究microRNA-194对细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,为探索microRNA-194作为骨肉瘤生物治疗的新靶点提供理论和实验依据。方法:构建沉默及过表达microRNA-194的慢病毒载体;获得稳定感染的细胞株,改变细胞增殖相关生物学特性。结果:PCR及测序结果证实重组慢病毒表达质粒构建正确,过表达及抑制过表达重组慢病毒的滴度分别为1.5×108TU/ml及4×108TU/ml;microRNA-194沉默的人骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞增殖速度相较于其对照组明显上升;过表达microRNA-194的SOSP-9607细胞增殖速度显著下降(P<0.01)。MicroRNA-194沉默的人骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞凋亡率相较于其对照组明显下降,过表达microRNA-194的SOSP-9607细胞凋亡率显著上升(P<0.01)。与对照组比较,过表达microRNA-194的SOSP-9607细胞周期G0/G1细胞比例显著增加,G2/M期细胞比例显著减少,S期细胞比例显著减少(P<0.01)。结论:成功构建了microRNA-194过表达及抑制过表达慢病毒表达载体;miR-194的表达水平对SOSP一9607细胞的增殖和凋亡造成显著影响。MicroRNA-194可能成为骨肉瘤治疗的潜在新靶点,但该基因对骨肉瘤发生发展的作用及其机制尚待进一步研究。 韩康 赵廷宝 卞娜 蔡成魁 颜世举 王鑫 肖春 孙聪 杨静 杨彤涛 周勇 马保安关键词:慢病毒 骨肉瘤 PBF在骨肉瘤中的表达及其临床意义 被引量:1 2013年 目的:探讨PBF(papillomavirus binding factor)在骨肉瘤组织中的表达与临床病理特征之间的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测70例骨肉瘤组织、30例骨软骨瘤及10例正常组织中PBF的表达。结果:骨肉瘤标本中PBF表达的阳性率是89%(62/70),而在骨软骨瘤标本中表达的阳性率是10%(3/30),两者比较P<0.01。PBF蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤体积及病理分型无关(P>0.05),而与临床Ennecking分期、有无转移有关(P<0.05)。结论:PBF的表达可能在骨肉瘤的发生发展及转移过程中起到重要作用,并可能作为骨肉瘤诊断的特异性指标。 孙聪 谢晓晨 刘云燕 张伟 徐奎 文艳华 杨连甲 廖博 周勇关键词:骨肉瘤 免疫组织化学 人microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒载体的构建及对人骨肉瘤细胞系SOSP-9607生物学特性的影响 目的 通过构建携带针对microRNA-194的shRNA载体及过表达载体,包装慢病毒,感染入骨肉瘤细胞系SOSP-9607,改变细胞内microRNA-194基因的表达水平,研究microRNA-194对细胞增殖、凋亡... 韩康 赵廷宝 卞娜 蔡成魁 颜世举 王鑫 肖春 孙聪 杨静 杨彤涛 周勇 马保安MicroRNA-194过表达与抑制表达慢病毒载体的构建及对骨肉瘤细胞转染与筛选的方法学研究 2014年 目的:构建针对人microRNA-194过表达及抑制表达的慢病毒表达载体,寻找与探讨感染人骨肉瘤细胞系SO-SP-9607和U2-os的最佳步骤和方法。方法:利用PCR方法调取相应目的基因进行酶切,经电泳回收后与目的基因进行连接,产物转化细菌感受态细胞,对克隆进行PCR鉴定和测序对比分析后,构建相应microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒表达载体;在人骨肉瘤细胞系SO-SP-9607和U2-os转染及筛选过程中,根据不同阶段及浓度设定相应实验组,并设相应对照组。倒置显微镜观察转染效率,筛选情况,进行比较。结果:PCR及测序结果证实重组慢病毒表达质粒构建正确。过表达及抑制表达重组慢病毒的滴度分别为1.5×108TU/ml及4×108TU/ml。感染复数(multiply of infection,MOI)值测定,实验组及对照组转染效率无明显差异,获得MOI值及感染时间数据。通过新的综合设计,经筛选后获得转染效率满意的目的克隆细胞。结论:成功构建了microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒表达载体,并通过新的综合考虑设计,对人骨肉瘤细胞系SO-SP-9607和U2-os进行转染和筛选后,可较快和较高效率获得满意目的细胞。 韩康 赵廷宝 卞娜 蔡成魁 颜世举 王鑫 肖春 孙聪 杨静 杨彤涛 周勇 马保安关键词:慢病毒 骨肉瘤 嘌呤霉素