孟庆玲
- 作品数：20 被引量：151H指数：5
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 河北石家庄2005-2007年甲肝病毒流行株基因分型研究
- 戴二黑郭子杰卢建华刘玉珍侯军良曹治宸孟庆玲曹经瑗毕胜利
- 自发生物素化风疹病毒重组诊断抗原的制备被引量：4
- 2016年
- 目的 获取原核表达过程中自发生物素化的风疹病毒（Rubella Virus,RV）重组抗原E1（RV-E1）,并初步评价其抗原性.方法 将2×BirA酶底物（BSP）插入到RV-E1抗原优势表位区域aa 148-295的羧基端,硫氧还蛋白（Thioredoxin,TRX）插入到RV-E1的氨基端,密码子优化后全基因合成;在大肠埃希进行表达,并利用亲和层析和离子交换层析纯化获取生物素化的RV-E1抗原;利用Western Blotting技术对目的蛋白进行鉴定,并建立风疹病毒IgM抗体检测方法,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力.结果 获取高度均质的生物素化的可溶性RV-E1抗原,WB实验表明目的蛋白不但可以被RV-E1抗原和TRX抗原单克隆抗体识别,而且可以被标记HRP的链霉亲和素所识别.分别对50份风疹病毒感染阳性血清、阴性血清和健康人血清进行检测,发现一致性优异.结论 RV-E1诊断抗原携带BSP,可以在大肠埃希菌表达过程中自发共价结合生物素分子,并可以作为新型诊断抗原应用于生物素-亲和素ELISA血清学检测中.
- 苏秋东郭敏卓邱丰贾志远卢学新孟庆玲田瑞光高燕毕胜利伊瑶
- 关键词：原核表达
- 新疆伊犁2005年甲型肝炎病毒流行株基因分型研究被引量：12
- 2007年
- 为了解2005年新疆伊犁甲型肝炎病毒（甲肝病毒）流行株分子流行病学特征，收集了部分甲肝病人血清标本，用国际上通用的甲肝病毒结构区基因VP1—2A分型引物，经核酸提取，做RT-PCR，序列测定，对甲肝病毒基因进行分型研究，并对甲肝病毒在甲型肝炎（甲肝）病人血清中存在的时间进行了探讨。结果显示，甲肝病毒核苷酸序列变异在0～3．2％之间，分为不同的基因簇，但都属于1A亚型（同一基因亚型间核苷酸序列变异小于7．5％）;氨基酸序列几乎相同。甲肝发病8周后的病人血清中仍能检测到甲肝病毒。结果说明该流行区有多株甲肝病毒存在，其传染源可能有多个传播途径，当人群免疫水平较低时，可引起甲肝流行。甲肝病毒在病人血液中可存在较长时间。这些工作为今后进一步开展甲肝病毒溯源研究及有效控制甲肝病毒流行提供了理论和技术支撑。
- 曹经瑗孟庆玲李新兰张丽杰袁俊范德生王春玲王小平克里木.玛木提张丽文张勇毕胜利
- 关键词：甲型肝炎病毒基因型分子流行病学
- 乙型肝炎与载脂蛋白基因多态性相关性研究
- 2012年
- 目的探讨ApoAI-75Mspl、ApoB—Msp1、ApoCllI—Sst1、LRP5、ApoE基因多态性与乙型肝炎血清标志物不同模式之间的内在相关性。方法将乙型肝炎血清标志物不同模式分为9组，每组80人，共720人份，采用SnaPshot法检测上述基因的多态性，最后用测序法佐证检测结果的准确性。结果ApoAI-75Msp1、ApoE基因在乙型肝炎血清标志物不同模式之间差异有统计学意义（P〈0．05），ApoCIII-Sst1、ApoB．Msp1、LRP5基因则差异无统计学意义（P〉0．05）。结论ApoAI-75Msp1、ApoE基因多态性与乙型肝炎血清标志物不同模式有相关性，ApoCIII-Sstl、ApoB—Msp1、LRP5与乙型肝炎血清标志物不同模式无相关性。
- 尹志农周新鄢盛恺王俊文孟庆玲刘薇
- 关键词：载脂蛋白类基因
- 不同标本中甲型肝炎病毒核酸检测方法的建立及应用
- 2008年
- 目的建立水、贝类、血液及唾液中甲型肝炎病毒核酸RT—PCR检测方法。方法加入一定量甲肝病毒到贝类、水、血液及唾液标本中，贝类经研磨后，PEG沉淀浓缩；水直接经PEG沉淀浓缩：以上标本及血液、唾液标本用Trizol试剂提取核酸，套式RT-PCR检测甲肝病毒核酸。引物位于甲肝病毒结构区VPI-2A区。结果病毒培养液中能检测到0．1TCID50甲肝病毒；水、血清及唾液中能检测到1TCID50甲肝病毒；毛蚶中能检测到1-10TCID50甲肝病毒。某地甲肝病毒污染的水及患者血清标本中检测到了甲肝病毒核酸，并进行了序列分析比对。结论本研究建立的不同标本中甲型肝炎病毒核酸RT-PCR检测方法，敏感、特异、快速，具有广泛的应用价值，将为甲肝的溯源研究及分子流行病学研究打下理论基础及提供技术支撑.
- 孟庆玲郭子杰曹经瑗毕胜利
- 关键词：肝炎病毒甲型病毒检测逆转录聚合酶链反应
- 戊型肝炎病毒TaqManReal—timeRT—PCR法的建立及应用被引量：2
- 2012年
- 目的建立灵敏、特异、稳定的戊型肝炎病毒（HEV）TaqManReal—timePCR检测方法。方法根据GenBank中的HEV相关序列，选取HEV基因组ORF2的保守区域设计合成特异性引物和探针，建立TaqManHEVReal—timeRT—PCR检测体系，评价体系的特异性、敏感度和稳定性，并应用于临床样本的检测。结果本研究建立的HEVReal—timeRT—PCR检测体系最低检测极限达到10个拷贝／反应，重复性实验c￡值的变异系数（CV）最大为1．53％，并且该体系能特异检测出戊肝临床样本中的HEV，其拷贝数从1．87×104拷贝／ml到8．12×106拷贝／ml不等。结论成功建立特异性强、灵敏度高的HEVReal—timeRT-PCR检测方法，应用于临床样本检测时取得了良好效果，为HEV分子病原学诊断打下基础。
- 孟庆玲邱丰沈立萍毕胜利
- 关键词：逆转录聚合酶链反应
- 河北石家庄2005-2007年甲肝病毒流行株基因分型研究
- 2009年
- 目的了解石家庄地区甲型肝炎病毒（HAV）流行株基因型特征，为HAV溯源研究打下基础。方法收集了2005--2007年石家庄地区部分甲肝患者急性期血清标本，用HAV结构．非结构区VP1—2A基因引物，经核酸提取，RT-PCR，序列测定，对HAV进行基因分型分析。结果石家庄地区2005--2007年HAV流行株VP1-2A区核苷酸序列同源性为95％～100％，都属于IA亚型；该区氨基酸序列几乎相同。结论石家庄地区存在有多株甲肝病毒流行株，同一株甲肝病毒可以存在不同地区，同一地区可以检测到相同或不相同的HAV毒株。为今后进一步开展甲肝病毒分子流行病学研究及有效控制HAV流行提供了理论和技术支撑。
- 戴二黑郭子杰卢建华刘玉珍侯军良曹治宸孟庆玲曹经瑗毕胜利
- 关键词：基因型逆转录聚合酶链反应
- 新疆和田2006年甲肝病毒流行株基因分型研究被引量：3
- 2009年
- 目的了解2006年新疆和田甲型肝炎病毒（HAV）流行株基因型特征，为HAV溯源研究打下基础。方法收集了新疆和田部分甲肝病人血清标本，用HAV结构．非结构区基因VPI-2A引物，经核酸提取，RT-PCR，序列测定，对HAV进行基因分型研究。结果新疆和田VP1—2A区HAV核苷酸序列变异为0％-3．9％，分为不同基因簇，但都属1A亚型；VP1-2A区氨基酸序列只有0—2个差异。与已发表的2005年新疆伊犁部分甲肝病毒流行株基因有相同序列或同源性较高。结论和田有多株甲肝病毒存在，本研究流行可能有多个传染源，多个传播链，在人群免疫水平较低时，引起甲肝流行。结果表明HAV分子流行病学方法在HAV流行株遗传变异及溯源研究中，以及控制HAV流行中具有重要作用。
- 阿依古丽·伊尔哈力曹经瑗艾德尔·艾力文前杨世平库热席孟庆玲李新兰毕胜利
- 关键词：基因型流行病学分子
- 基因优化对基因工程丁型肝炎小抗原蛋白表达和纯化的影响
- 2012年
- 目的探讨基因优化对基因工程丁型肝炎（丁肝）小抗原蛋白表达和纯化的影响。方法依据GenBank上的丁肝小抗原原始基因，参照大肠埃希菌优势密码子谱进行优化；再分别将优化前后的两组基因进行常规原核表达，用SDS—PAGE电泳比较目的蛋白表达量及优势表达方式；进一步以柱层析进行纯化，再以Image Lab软件分析SDS-PAGE电泳条带，比较两组目的蛋白的纯度。结果SDS-PAGE显示，两组表达的目的蛋白均与预期相对分子质量大小一致，优化基因组的蛋白表达量高于原始基因组，且更倾向于可溶性表达；经柱层析纯化后，前者的目的蛋白纯度也明显高于后者，可达96．3％。结论基因优化可提高基因工程丁肝小抗原蛋白表达量，增加可溶性蛋白的比例；且表达产物更易纯化至较高纯度以供诊断使用。
- 丁军颖孟庆玲郭敏卓伊瑶苏秋东卢学新邱丰毕胜利
- 关键词：基因肝炎丁型
- 应用痘苗病毒载体表达的重组甲肝抗原特性的研究
- 2011年
- 目的 探讨以痘苗病毒载体表达的甲肝病毒培养合适的细胞系和重组病毒灭活以及甲肝病毒抗原保存条件.方法 将构建成功的表达甲肝抗原的重组痘苗病毒分别接种于K4、143、HEL、Hep-2和Vero等细胞,用ELISA测定重组甲肝抗原的表达产量和不同方法灭活重组病毒后的抗原活性.结果 在K4、143和HEL细胞表达重组甲肝抗原的产量略优于Hep-2和Vero细胞,重组病毒经β-丙内酯和甲醛灭活后,甲肝抗原活性不变,制备的重组甲肝抗原稳定性好.结论 痘苗病毒表达载体可以提高甲肝抗原表达效率,具有十分广阔的应用前景.
- 赵洪兰邱丰孟庆玲伊瑶田瑞光鲁健曹经瑗毕胜利
- 关键词：痘苗病毒肝炎甲型酶联免疫吸附测定
