伊瑶
- 作品数：69 被引量：172H指数：7
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 自发生物素化风疹病毒重组诊断抗原的制备被引量：4
- 2016年
- 目的 获取原核表达过程中自发生物素化的风疹病毒（Rubella Virus,RV）重组抗原E1（RV-E1）,并初步评价其抗原性.方法 将2×BirA酶底物（BSP）插入到RV-E1抗原优势表位区域aa 148-295的羧基端,硫氧还蛋白（Thioredoxin,TRX）插入到RV-E1的氨基端,密码子优化后全基因合成;在大肠埃希进行表达,并利用亲和层析和离子交换层析纯化获取生物素化的RV-E1抗原;利用Western Blotting技术对目的蛋白进行鉴定,并建立风疹病毒IgM抗体检测方法,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力.结果 获取高度均质的生物素化的可溶性RV-E1抗原,WB实验表明目的蛋白不但可以被RV-E1抗原和TRX抗原单克隆抗体识别,而且可以被标记HRP的链霉亲和素所识别.分别对50份风疹病毒感染阳性血清、阴性血清和健康人血清进行检测,发现一致性优异.结论 RV-E1诊断抗原携带BSP,可以在大肠埃希菌表达过程中自发共价结合生物素分子,并可以作为新型诊断抗原应用于生物素-亲和素ELISA血清学检测中.
- 苏秋东郭敏卓邱丰贾志远卢学新孟庆玲田瑞光高燕毕胜利伊瑶
- 关键词：原核表达
- PD—L1重组蛋白的表达及生物学活性分析被引量：1
- 2009年
- 目的构建细胞程序死亡因子1配体1（PD—L1）的重组表达质粒，在原核系统中表达并分析其生物学活性。方法经密码子优化后合成PD—L1全基因序列，构建硫氧还原蛋白．pET43b／（PD．L1）重组表达质粒并在大肠埃希菌中表达；用ELISA验证表达产物与其受体结合的生物学活性。结果正确构建了PD—L1重组表达质粒及其大肠埃菌基因工程菌，能稳定、高效地表达目的蛋白，相对分子质量为47×10^3，目的蛋白能与其受体特异性结合。结论成功获得有生物学活性的PD-L1重组蛋白，为研制单克隆抗体及其与病毒感染慢性化的关系提供基础条件。
- 沈立萍陈斯勇边涛伊瑶王锋邱丰毕胜利
- 关键词：密码子细胞死亡重组蛋白质类硫氧还蛋白
- 四种乙肝病毒表面抗原ELISA诊断试剂的评价被引量：5
- 2006年
- 目的对四种国内乙肝病毒表面抗原诊断试剂进行评价。方法用四种试剂分别对标准品和未知血清进行检测,用几种常用诊断试验评价方法对检测结果进行分析和比较。结果四种试剂对标准血清的检测结果较好,A、B两种试剂的总符合率为100%,另两种的总符合率也在90%以上,其中B试剂有较好的精密性。δ值比较显示A和B两种试剂有较好的诊断特性。四种试剂在一定的抗原浓度范围内都有良好的线性关系。针对于未知样本的检测中,四种试剂与采用电发光法的罗氏诊断试剂有较好的一致性。结论国内主要厂家的HBsAgELISA诊断试剂具有较高的检测效能。在实际工作中,可以通过常用的诊断试剂筛选实验,经统计分析后筛选出较高效能诊断试剂用于检测。
- 贾志远余陶田瑞光伊瑶毕胜利
- 关键词：诊断试剂
- 中国不同地区庚型肝炎病毒5′非编码区基因异质性分析
- 1999年
- 为分析庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）５′非编码区（５′ＵＴＲ）基因的异质性，确定中国不同地区ＨＧＶ主要流行株的特点及其分布，本研究对来自江西、湖南、河南、河北、甘肃等地９株ＨＧＶ５′ＵＴＲ区进行基因扩增与序列测定。通过对５′ＵＴＲ区１５４个核苷酸区段的序列进行分析，并与文献报导的其它２５株（１６株中国ＨＧＶ、９株国外代表株）相应区段进行比较与系统树分析，结果表明：（１）中国不同地区ＨＧＶ５′ＵＴＲ区基因存在一定异质性，但不存在明显的地区分布差异；（２）对３４株ＨＧＶ５′ＵＴＲ区的系统树分析，可分为３组，存在明显的地理分布特征；（３）绝大多数（除１株外）中国ＨＧＶ分离株皆分在第三组，并可分为二个亚组。
- 闻守宾谭文杰伊瑶詹美云
- 关键词：庚型肝炎病毒
- 乙酰胆碱酯酶抑制剂对乙型肝炎细胞凋亡的抑制作用
- 2008年
- 目的为了抑制乙型肝炎时大量细胞凋亡，以内毒素诱导Vero细胞损伤建立凋亡模型，探讨乙酰胆碱酯酶抑制剂他克林、多奈哌齐对内毒素诱导Vero细胞凋亡的作用。方法用光学显微镜观察细胞形态学改变，CCK-8检测分析细胞损伤状况，DNA Ladder检测细胞凋亡DNA断裂特征性条带。结果光学显微镜观察、CCK-8检测和DNA Ladder检测显示内毒素400、500μg／ml能够诱导Vero细胞凋亡；他克林和多奈哌齐与内毒素同时处理Vero细胞后，他克林10μmol／L能够抑制由内毒素500μg／ml诱导的Vero细胞凋亡，而多奈哌齐则无此抑制作用。结论内毒素能够诱导Vero细胞凋亡，用于建立Vero细胞凋亡模型；他克林对内毒素诱导的Vero细胞凋亡具有一定的抑制作用，多奈哌齐则无此作用。
- 黄晶伊瑶毕胜利陈斯勇王传跃
- 关键词：乙型细胞凋亡内毒素他克林多奈哌齐
- 诊断用丁肝抗原的基因优化及其蛋白表达、纯化和鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的获取有生物活性的丁肝抗原蛋白，探讨其作为诊断试剂的应用价值。方法经密码子优化，合成人工编码的丁肝抗原基因序列；以M48作为表达载体，构建带有硫氧还蛋白的重组表达质粒；在大肠埃希氏菌中经IPTG诱导表达；以亲和层析纯化并以ELISA鉴定该蛋白。结果酶切鉴定构建的质粒正确；SDS—PAGE结果显示表达和纯化的外源蛋白与预期相对分子质量大小一致；ELISA鉴定该蛋白有与丁肝抗体特异性结合的活性。结论成功获得有生物活性的可供诊断用的丁肝抗原蛋白，为丁肝诊断试剂的研发奠定了基础。
- 丁军颖郭敏卓伊瑶苏秋东卢学新邱丰毕胜利
- 关键词：基因硫氧还蛋白
- 表达甲型肝炎病毒抗原的重组痘苗病毒(VMS11 HAV25)的免疫原性被引量：5
- 1992年
- 甲型肝炎(甲肝)病毒基因全部开放读码框架cDNA重组于痘苗病毒天坛株DNA的HindⅢM片段,获得了重组痘苗病毒VMS11HAV25。用10~7PFU或10~8PFU病毒量皮内免疫家兔,能诱生甲肝病毒抗体,其滴度与免疫剂量、免疫次数及间隔有关。组织培养中和试验表明,该抗体具有中和甲肝病毒的能力。VMS11HAV25的免疫效果似优于本实验室已报道的另一株甲肝病毒基因重组于TK区的重组痘苗病毒Re41。
- 郭可謇高峰伊瑶刘崇柏王晓洁阮力朱既明
- 关键词：重组痘苗病毒免疫原性甲肝病毒
- b型流感嗜血杆菌D蛋白原核可溶性表达研究被引量：1
- 2013年
- 目的通过原核表达系统可溶性表达重组D蛋白，为多糖结合疫苗的制备提供蛋白载体。方法将HibCMCC株基因组DNA中去除信号肽的hpd基因片段插入pET43．1a表达质粒，转化人感受态大肠埃希菌BL21（DE3），IPTG诱导表达。表达的重组蛋白，经过硫酸铵沉淀和DEAE阴离子交换柱层析纯化后，用WesternBlot的方法鉴定其免疫反应原性。结果表达的重组蛋白以可溶性形式存在，表达量约占菌株总蛋白的44％，经过初步纯化后的重组蛋白可以和Hib抗血清发生特异性反应。结论成功构建了D蛋白重组表达质粒，并在原核细胞中以可溶性形式表达出具有良好免疫反应原性的D蛋白。
- 尹梦梦苏秋东郭敏卓寸怡娜普元倩贾志远杨景然汤洋廖国阳伊瑶毕胜利李卫东
- 关键词：蛋白质
- 甲型肝炎重组痘苗病毒(VMS11HAV25)的构建及其某些生物学性质被引量：6
- 1992年
- 将5′端经过剪切的甲型肝炎病毒全部开放读码框架cDNA连接于痘苗病毒晚期启动子P11下游,重组于痘苗病毒天坛株的HiodⅢM片段Spb Ⅰ位点获得了重组病毒VMS11HAV25。对其生物学性质的研究表明,该重组病毒诱生痘苗抗体的能力、对鸡红细胞的血凝性质、空斑大小及对温度的稳定性等均与原天坛株相同。重要的区别是,重组病毒在家兔皮内和小鼠脑内的毒力都比原天坛株低约1个对数。病毒在人胚肺二倍体细胞连续传15代的表达水平与传代早期者相同。连续传20代后提取病毒DNA做Southern blot杂交表明,甲型肝炎病毒基因仍稳定地存在于原插入位置。
- 高峰郭可謇阮力伊瑶刘崇柏朱既明
- 关键词：重组痘苗病毒毒力甲肝病毒
- 丁型肝炎病毒内蒙株的原核表达及抗原性分析
- 目的：获得表达量高、抗原性强的基因工程重组抗原。检测不同地区的丁肝患者血清，初步验证其抗原性及在检测不同地区丁肝血清方面的差异。
方法: 从内蒙某丁肝患者血清中提取丁肝病毒，经RT-PCR与PCR，使用PET4...
- 杨英超伊瑶赵红兰张文英陈斯勇毕胜利
- 关键词：丁型肝炎病毒抗原性原核表达试剂盒生物制品
- 文献传递
