宋玫
- 作品数：8 被引量：217H指数：5
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 微囊化基因修饰细胞复合组织工程真皮构建及其对创面愈合的影响被引量：5
- 2005年
- 目的探讨微囊化神经生长因子(nerve grow th factor,NGF)基因修饰的N IH 3T 3细胞复合组织工程真皮的可行性及其对急性创面愈合的影响。方法构建分泌型NGF真核表达质粒pcDNA 3.1+/NGF并导入N IH 3T 3细胞,筛选出稳定表达的细胞株,将此细胞包入海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊中培养。以Ⅰ、Ⅲ型胶原为基质、人成纤维细胞和制备好的微囊为种子细胞,用组织工程皮肤培养系统构建复合微囊的组织工程真皮,体外培养1周后行羟脯氨酸(hydroxypro line,Hyp)测定,EL ISA法测定其分泌功能,组织形态学观察。以猪背部急性全层创面为模型,按移植物不同分为5组:NGF-N IH 3T 3微囊真皮组(A组)、N IH 3T 3微囊真皮组(B组)、空囊真皮组(C组)、NGF(5 ng/m l)+胶原膜组(D组)和空白对照组(E组),观察创面再上皮化及愈合速度和愈合时间。结果转NGF基因微囊复合组织工程真皮后体外培养6周,仍稳定分泌NGF(124.32 pg/m l),体外培养1周后,组织工程真皮中NGF-N IH 3T 3微囊组Hyp含量为69.68±6.20 m g/g,较空白对照组增加约2倍以上。移植治疗急性创面,A组平均愈合时间为25±2 d,B组为34±3 d,C组为34±2 d,D组为33±2 d,E组为40±3 d,A组创面愈合时间平均至少缩短约10 d,提高了创面愈合的速度。结论将分泌NGF微囊复合组织工程真皮后可提高组织工程真皮的质量,并促进急性创面的愈合。
- 胡昭华陈绍宗金岩雄鹰王为马小军宋玫
- 关键词：组织工程真皮微囊基因转染神经生长因子创面愈合
- 封闭负压引流技术对失感觉神经支配创伤愈合中Bcl-2与NGF/NGFmRNA表达的影响被引量：29
- 2004年
- 目的 研究封闭负压引流技术 (vacuum assistedclosure ,VAC)对失感觉神经支配的创面愈合过程中Bcl 2与NGF表达的影响。方法 将 80只SD大鼠随机分成四组 (每组 2 0只 ) ,即实验组(T组 ) :施加VAC的失去神经支配创面 ;对照组 1(C1) :未施加VAC的失去神经支配的创面 ;对照组2 (C2 ) :施加VAC的正常神经支配的创面 ;对照组 3(C3) :未施加VAC的正常神经支配的创面。T、C2组施加间断性VAC每日 3次 ,负压 80mmHg。伤后 1、3、6、9、12d ,四组同时取材 ,采用免疫组化和原位杂交检测各组各时间点Bcl 2与NGF/NGFmRNA表达。结果 在伤后C2组、C3组Bcl 2与NGF/NGFmRNA表达明显 ,水平逐渐升高 ,至第 9天达最高 ,然后降低 ,C2组较C3组Bcl 2和NGF/NGFmRNA维持相对高的状态 (P <0 .0 5 )。T、C1组创缘和肉芽组织中Bcl 2与NGF/NGFmRNA表达相对C2、C3组处于较低水平 (P <0 .0 5 )。结论 VAC通过增强创面组织抑制凋亡相关基因蛋白的表达 ,影响内源性NGF表达 ,具有明显的促进创面愈合的作用。
- 汤苏阳陈绍宗胡昭华宋玫曹大勇吕晓星
- 关键词：封闭负压引流技术创伤愈合免疫组化法原位杂交法
- 微囊化转NGF基因3T3细胞修复大鼠周围神经损伤的实验研究被引量：12
- 2005年
- 目的 探讨微囊化转NGF基因 3T3细胞移植促进神经再生的可行性。方法 带有小鼠NGF基因的质粒pcDNA3 1+ NGF经FuGENETM6转染NIH 3T3细胞 ,用APA(海藻酸钠 多聚赖氨酸 海藻酸钠 )微胶囊包埋后 ,进行体外培养 ,定期检测微囊化细胞活性和NGF分泌量变化。同时 ,将转基因细胞移植于大鼠坐骨神经切断吻合处 ,于手术后 4、8、12周检测神经再生和功能恢复结果。结果 微囊化转NGF基因 3T3细胞在体外培养条件下可存活 3个月并能稳定表达 ,移植于损伤坐骨神经的微囊化转NGF基因细胞组再生神经密度大 ,排列有序 ,吻合口瘢痕少 ,单核细胞浸润少 ,水肿轻 ,动作电位幅值和传导速度显著增大 ,坐骨神经功能指数明显升高。结论 微囊化转NGF基因3T3细胞移植可显著促进神经再生和降低异体细胞移植免疫反应。
- 宋玫陈绍宗韩骅雄鹰
- 关键词：微囊化转基因细胞移植神经再生
- 微囊化转染神经生长因子基因细胞移植在周围神经再生中的作用被引量：1
- 2006年
- 目的探讨应用免疫隔离技术进行转染神经生长因子(NGF)基因的3T3细胞移植促进周围神经损伤后再生的可行性。方法采用海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微胶囊包埋NGF-3T3细胞并进行培养;制备坐骨神经横断损伤SD大鼠模型,96只SD大鼠随机分A组(微囊化NGF-3T3细胞组)、B组(空胶囊组)、C组(转染NGF的3T3细胞组)和D组(阴性对照组)。分别采用神经干动作电位(NAP)、神经传导速度(NCV)和坐骨神经功能指数(SFI)检测坐骨神经功能恢复情况。结果微囊化NGF-3T3细胞培养后保持活性和增殖能力,将具有分化潜能的大鼠嗜铬细胞瘤细胞与其共培养,7d时细胞胞体分化成多边形或锥形,形成突起;培养10d左右NGF分泌量最高,达269pg/ml;培育50d仍然保持在208pg/ml。移植术后4、8及12周时,A组大鼠的NAP及NCV均大于B、C、D组(P<0.05),而B、C、D三组之间无显著性差异(P>0.05);A组大鼠的SFI恢复情况优于B、C、D组(P<0.05),而B、C、D三组之间无显著性差异(P>0.05)。结论微囊化NGF-3T3细胞在体外培养一定时间后,仍保持增殖能力和生物活性,移植到大鼠周围神经损伤局部后可长时间存活,并通过持续分泌NGF起到促进周围神经修复的作用。
- 雄鹰王为宋玫于炜婷郭昕马小军陈绍宗
- 关键词：微胶囊转染细胞移植周围神经损伤
- 封闭式负压引流技术对人慢性创面血管生成的影响被引量：162
- 2004年
- 目的:研究封闭式负压引流技术(Vacuum-AssistedClosure,VAC)对人慢性创面治疗前后血管生成犤血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF),CD34犦的影响。方法:对5例慢性创面患者给予持续性VAC治疗(-15.96kPa压力),分别于吸引前以及吸引后1,3,5,7d切取创缘组织,采用免疫组织化学技术,检测VEGF,CD34表达及其标记指数、微血管密度的变化。结果:负压吸引前,VEGF在创缘组织真皮浅层血管内皮细胞中偶见阳性表达,随VAC时间的延长,真皮层中血管内皮细胞、成纤维细胞出现VEGF阳性表达,标记指数增加(F=41.819,P<0.05)。CD34在VAC治疗后表达的微血管密度,明显增强(F=21.691,P<0.05)。结论:VAC能明显增强在创缘组织真皮浅层血管内皮细胞、成纤维细胞的增殖和微血管密度,促进慢性创面肉芽组织生长。
- 曹大勇陈绍宗汤苏阳胡昭华宋玫吕晓星
- 关键词：封闭式负压引流技术创面血管生成VAC手术
- 小鼠NGF基因真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达被引量：7
- 2003年
- 目的 :构建小鼠 β NGF基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH 3T3细胞系中NGF的表达情况。方法 :用基因重组技术 ,将小鼠 β NGF的成熟cDNA序列及其前导序列 ,克隆到真核表达载体 pcDNA3.1+中 ,用限制性内切酶酶切鉴定重组体。利用脂质体FuGENETM6方法 ,转染NIH 3T3细胞。转染后 72h ,用G4 18筛选阳性克隆并培养至 2 0d。对阳性克隆培养上清中NGF的表达用Westernblot分析并观察该上清中NGF对PC12细胞突起生长的作用。结果 :β NGF基因在NIH 3T3细胞中获得表达。阳性克隆培养上清能促进PC12细胞突起生长。结论 :重组真核表达载体 pcDNA3.1+/NGF构建成功 ,NGF蛋白在NIH 3T3细胞中表达 ,并具有良好的生物学活性 。
- 宋玫陈绍宗
- 关键词：Β-神经生长因子真核表达载体基因转染
- 微囊化NGF基因修饰NIH3T3细胞移植对慢性创面愈合的影响被引量：1
- 2005年
- 目的探讨微囊化转NGF基因NIH3T3细胞移植作用于慢性缺血性创面的方法及其对创面愈合的作用。方法将转NGF基因的NIH3T3细胞包入APA(海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠)微囊中培养备用,分别采取创面NGF微囊悬液局部注射法、NGF微囊复合组织工程真皮法、NIH3T3微囊局部注射法、NGF(5ng／ml)局部注射法、胶原膜法等应用于大鼠背部缺血性创面模型,以空白创面为时照,观察创面再上皮化、愈合速度及愈合时间。结果两种微囊应用方法均可促进创面上皮化速率,提高创面愈合的速度,与对照组相比差异显著(p<0．05),其中以微囊复合组织工程真皮法效果最为明显。结论应用转NGF基因微囊可促进慢性缺血性创面的愈合。
- 胡昭华陈绍宗金岩雄鹰王为马小军宋玫
- 关键词：微囊基因转染神经生长因子
- 神经生长因子对人血管内皮细胞增殖作用的研究被引量：11
- 2003年
- 目的:研究神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)对人血管内皮细胞(Human vascular endothelial cell,HEVC)增殖作用的影响。方法:将NGF作用于体外培养的HEVC304,利用酶联免疫反应检测其增殖率,利用免疫组织化学的方法检测对增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达和标记指数。结果:NGF作用组较对照组其细胞增殖率明显增加(P<0.001),NGF中和抗体组其细胞增殖率下降明显(P<0.05)。NGF作用组较对照组能明显增加HEVC对PCNA的表达和PCNA标记指数(P<0.05),NGF中和抗体组其PCNA表达和PCNA标记指数明显减少(P<0.05)。结论:NGF能明显促进HEVC的增殖。
- 汤苏阳陈绍宗曹大勇宋玫胡绍华吕晓星
- 关键词：神经生长因子人血管内皮细胞细胞增殖血管生成增殖细胞核抗原
