尚广东
- 作品数：65 被引量：98H指数：5
- 供职机构：南京师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程农业科学更多>>
- 一种大肠杆菌表达菌株及用其生产N-乙酰-D-神经氨酸的方法
- 本发明涉及一种基于基因组的酶催化合成N-乙酰-D-神经氨酸的方法。本方法采用的是将分别置于T7强启动子之下的来源于多形拟杆菌VPI-5482基因组中的异构酶基因BT0453和来源于大肠杆菌的醛缩酶基因nanA整合至大肠杆...
- 尚广东李玲严振亚石牡丹
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- 重组酶基因bet作为一种大肠杆菌异源蛋白表达融合标签的应用
- 本发明涉及一种将来源于lambda噬菌体的重组酶基因bet作为融合标签的方法。本方法是将来源于lambda噬菌体的重组酶基因bet作为融合标签。将六个组氨酸、bet基因、TEV酶切位点和一段填充片段等元件的核苷酸序列克隆...
- 尚广东凌文张青骆希杨瑶
- 文献传递
- 抗骨质疏松药物作用靶位分子水平研究进展被引量：3
- 2002年
- 随着全国人口老龄化进程的加快 ,骨质疏松症的防治对于全民身体素质的提高具有重要意义。分子生物学等技术的应用 ,使我们在细胞分子水平上对于骨质疏松症的形成机理有了更深入的理解。本文就近年来发现的成骨细胞和破骨细胞发育 ,分化 ,增殖以及发挥功能所涉及的新通路加以介绍 。
- 杨隽尚广东张月琴
- 关键词：骨质疏松成骨细胞破骨细胞药物作用靶位分子水平抗骨质疏松药
- 一种用于重组工程的大肠杆菌菌株
- 本发明涉及一株用于重组工程的大肠杆菌CGMCC No.3192及其变异体。该菌株是将行使重组工程的基因片段，即来源于大肠杆菌的阿拉伯糖操纵元的调节基因araC，阿拉伯糖操纵元的启动子pBAD，来源于λ噬菌体的重组酶基因r...
- 尚广东宋杰黄慧颖
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- 牲畜链霉菌一个调节基因的克隆及其顺式调控元件的研究被引量：1
- 2000年
- 依据原核生物中广泛存在的调节基因ｌｕｘＩ保守性区域的氨基酸序列设计引物，以牲畜链霉菌总 ＤＮＡ为模板， ＰＣＲ扩增出约１８０ｂｐ片段．以此为探针，与总 ＤＮＡ不同酶切产物进行杂交，最终获得外源基因克隆至 ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（－） ＥｃｏＲＩ－ＢａｍＨＩ位点的重组质粒 ｐＳＮ１．序列分析发现一个 １８００ ｂｐ的完整 ＯＲＦ，（Ｇ＋Ｃ）％为 ６９． ３％，命名为ｓｃｔＩ． ＯＲＦ上游有 ２４９ｂｐ的 ＡＴ富集区，下游有复杂的二级结构．凝胶滞留实验证明 ＡＴ富集区有特异性的ＤＮＡ结合蛋白，且在低温聚丙烯酰胺凝胶电泳时可见“ＤＮＡ弯曲”现象，提示此ＡＴ富集区为一顺式调控元件。
- 尚广东王以光
- 关键词：调节基因克隆顺式调控元件抗生素
- 大肠杆菌系列融合表达载体的构建被引量：3
- 2013年
- 许多异源蛋白在大肠杆菌内的表达是以不可溶、无生物学活性的包涵体形式存在,这为蛋白质的功能研究带来困难.融合表达是提高蛋白可溶性的有效方案之一.为构建通用型融合表达载体,本研究将5种常见的融合标签即突变型麦芽糖结合蛋白(mMBP)、小分子泛素样修饰蛋白(SUMO)、翻译起始因子(IF2-I)、氮源利用物质A(NusA)和谷胱甘肽转移酶(GST)以及3种伴侣蛋白(GroEL、DnaK和TF)分别克隆至pET30a(+),构建了系列融合表达载体.这些载体含有相同的克隆位点以及位于融合标签羧基端的烟草蚀刻病毒蛋白酶(TEV)的酶切位点.N-乙酰-D-葡萄糖胺2-异构酶基因hRnBP克隆到mMBP融合表达载体后,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测表明融合蛋白均得到了高效表达且几乎完全可溶,TEV酶切获得了预期的带型.全细胞偶联生成N-乙酰-D-神经氨酸实验发现mMBP-hRnBP的摩尔转化率较无mMBP标签的体系提高了近60%,证明了融合表达载体中融合标签的适用性.新型的原核融合表达载体为蛋白的融合表达、分离纯化及功能研究提供了更多的选择.
- 张飞飞王瑞青朱宇鹏马超尚广东
- 关键词：融合表达载体融合标签TEV
- 一种大肠杆菌细胞内蛋白酶剪切融合蛋白的方法
- 本发明涉及一种大肠杆菌细胞内蛋白酶剪切融合蛋白以分离目的蛋白的方法。所使用的宿主菌为通过重组工程方法将强启动子T7驱动的TEV蛋白酶基因整合至大肠杆菌表达宿主菌BL21(DE3)而获得。表达载体为将麦芽糖结合蛋白和填充片...
- 尚广东李玲骆希张青杨瑶
- 文献传递
- 恶臭假单胞菌KT2440高效电转化方法
- 本发明涉及恶臭假单胞菌KT2440(Pseudomonasputida KT2440)高效电转化方法。该方法是：以EM培养基，30℃培养菌体至OD <Sub>600</Sub>为0.6-0.75，3mM 4-羟乙基哌嗪乙...
- 尚广东陈莎莎杨圣勇
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- Amicoumacin类抗生素的研究进展被引量：4
- 2013年
- Amicoumacin类抗生素是由微生物产生的异香豆素类化合物,其化学结构独特,生物活性广泛,是微生物药物的重要来源。自1975年第一个明确化合物结构的amicoumacin类化合物报道至今,国内外尚无该类化合物研究进展的综述。针对国内外amicoumacin类化合物研究进展结合本课题组最新研究结果,本文首次对该类化合物产生菌来源、化合物结构、生物活性和生物合成途径等各方面进展进行了较全面的总结。
- 韩晓艳刘少伟王飞飞刘佳萌陈川胡辛欣蒋忠科游雪甫尚广东张玉彬孙承航
- 关键词：微生物化学结构生物活性
- 生技霉素稳定型基因工程菌的构建
- 利用温敏型质粒载体,运用同源重组技术将异戊酰基转移酶基因整合至螺旋霉素产生菌Streptomyces.spiramyceticus F21的染色体上,构建了稳定的生技霉素基因工程菌WSJ-1.将WSJ-1在不加压的情况下...
- 尚广东王以光戴剑漉
- 关键词：同源重组基因工程菌
- 文献传递
