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自克隆技术在工业啤酒酵母改良中的研究概况被引量：3: 2006年; 自克隆技术由于具有生物安全的优点,已成为对工业微生物、尤其是食品微生物进行遗传修饰的首选技术,简要介绍了自克隆技术在工业啤酒酵母菌种改良中的研究概况。; 王肇悦张峰何秀萍张博润; 关键词：啤酒酵母菌种改良

具有α-淀粉酶分泌活性以及低双乙酰产量的啤酒酵母工程菌的构建被引量：4: 2008年; 扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)因具有较强的α-淀粉酶以及葡聚糖酶活性,使其在以淀粉为唯一碳源的培养基上能够良好的生长。从其基因组中克隆了α-淀粉酶的编码区,构建了由酵母磷酸甘油酸激酶基因(PGK1)启动子、酿酒酵母α-因子信号序列以及扣囊复膜酵母α-淀粉酶基因编码序列组成的基因表达盒。将该表达盒插入到质粒pPLZ-2的ILV2基因序列内部,使其两翼具有ILV2基因的同源区。将该表达盒通过同源重组的方式整合到啤酒酵母工业菌株YSF-5的α-乙酰乳酸合成酶(AHAS)基因ILV2内部。在以淀粉为唯一碳源的培养基上进行转化子的筛选。通过多对引物PCR、α-淀粉酶活性以及AHAS活性分析对转化子进行鉴定,得到一株具有α-淀粉酶分泌表达活性、较低AHAS活性,并且发酵液中双乙酰产量也相对较低的啤酒酵母工程菌。该菌株在非选择压力条件下连续培养50代后仍然保持其遗传稳定性。还对pH、温度以及金属离子对该转化菌株的α-淀粉酶活性的影响进行了研究。由于所构建的菌株不含有非酵母来源的DNA,所以生物安全性相对较高,对酵母育种以及啤酒生产工业都具有较为重要的意义。; 张峰王肇悦刘楠何秀萍张博润; 关键词：Α-淀粉酶双乙酰

具有α-淀粉酶活性以及低AHAS活性的啤酒酵母工程菌的构建: 根据文献报道的Saccharomycopsis fibuligeraα-淀粉酶基因的序列克隆了该基因的编码区，为达到该基因的高效表达克隆了酵母磷酸甘油酸激酶启动子(PGKlp)。由于有关文献已报道，该基因在酿酒酵母中表达...; 张峰; 关键词：Α-淀粉酶乙酰乳酸合成酶

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张峰