徐小雅
- 作品数：24 被引量：38H指数：4
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：上海市卫生局青年科研基金国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生核科学技术文化科学经济管理更多>>
- 雌激素水平对大豆苷原(DAI)促成大鼠骨细胞分化作用的影响
- 2015年
- 目的 观察基础雌激素（estrogen）水平对大豆苷原（daizein,DAI）促成骨细胞分化作用的影响。方法采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,通过培养液中添加17β-雌二醇改变培养微环境（包括空白对照）雌激素水平,应用MTT法和对硝基苯磷酸盐（p-nitropheny-phosate,PNPP）法检测细胞增殖率和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性,应用real-time PCR法检测其雌激素受体α（ERa）、雌激素受体β（ERβ）和过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR）γ的mRNA水平变化,研究雌激素基础水平变化对DAI促成骨细胞分化作用的影响。结果 培养环境中雌二醇水平升高致DAI的促分化作用减弱。其中100nmol/L DAI组ALP比活性较对照组的增幅由雌激素补充前的23%分别降至8%（17β-雌二醇为100pmol/L）和-11%（17β-雌二醇为1 000pmol/L）,显示基础雌激素水平对DAI促分化的拮抗作用。为避免培养液中血清雌激素的可能影响,进一步采用去激素血清培养（含2%去激素胎牛血清）。此时补充17β-雌二醇至100pmol/L,DAI各剂量组细胞ALP比活性较对照组明显增加（16%~21%,P〈0.05）。继续补充雌激素至1 000和10 000pmol/L时,其作用反而减弱。该结果显示,DAI促成骨细胞分化作用与雌激素基础水平有关,低雌激素状态（≤100pmol/L）可增强其作用。为进一步探索其作用机制,我们初步观察了雌激素（100pmol/L）和DAI（100nmol/L）单独或联合作用下成骨细胞ERa、ERβ和PPARγ受体表达变化。结果显示,100pmol/L 17β-雌二醇明显上调ERβ表达,并部分抵抗DAI下调ERβ的作用。结论 DAI的促成骨分化作用与基础雌激素水平有关,低雌激素（≤100pmol/L）状态有利于DAI的促分化作用,而雌激素水平升高可减弱其促分化作用。
- 丁巧灵王金凤徐小雅周轶金慰芳王洪复高建军
- 关键词：雌激素
- 局部辐照大鼠血清对成骨细胞增殖分化的影响
- 2014年
- SD大鼠胫骨部位30 Gy照射2周和12周后处死,取血离心得血清;酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞。采用MTT和PNPP法观察不同血清对成骨细胞增殖和分化的影响;用流式细胞仪观察成骨细胞周期变化;用Realtime PCR方法观察成骨细胞CyclinD、CyclinE、p21和p53的表达。结果显示:辐照2周和12周的大鼠血清抑制成骨细胞增殖,对成骨细胞ALP的表达无明显影响;辐照2周和12周的大鼠血清增加G1期成骨细胞比例,减少S期和G2期细胞比例;辐照2周大鼠血清抑制成骨细胞CyclinD和CyclinE的表达;12周大鼠血清促进成骨细胞p21和p53的表达,抑制成骨细胞CyclinE的表达。局部辐照大鼠血清通过抑制成骨细胞CyclinD和CyclinE表达,上调p21和p53的表达持续阻滞细胞于G1期抑制成骨细胞增殖。
- 周轶邹琼丁巧灵高建军金慰芳徐小雅
- 关键词：电离辐射大鼠血清成骨细胞
- 氟中毒对体外培养破骨细胞数量及骨吸收功能的影响被引量：4
- 2011年
- 目的 观察氟中毒对体外培养破骨细胞数量及骨吸收功能的影响,探讨其作用机制.方法 机械分离法作用于新生SD大鼠四肢长骨,于TC199培养液（含10%胎牛血清）中获得破骨细胞和骨髓基质细胞.将破骨细胞接种于96孔培养板和象牙片培养,而骨髓基质细胞接种于6孔培养板培养,分别于2 h后换液并染氟（氟化钠）,对照组、低氟组、中氟组、高氟组染氟剂量分别为0、2.5×10-5、5.0×10-5、10.0×10-5mol/L.培养2、5d后对培养板中破骨细胞进行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,光镜下计数破骨细胞数量;培养5 d后象牙片经1%甲苯胺蓝染色,光镜下分析破骨细胞骨吸收陷窝面积.骨髓基质细胞染氟作用8 h后提取总RNA,实时荧光定量PCR法检测细胞核因子κβ受体活化因子配体（RANKL）和骨保护素（0PG）mRNA表达水平.结果 ①体外培养2 d时,对照组、低氟组、中氟组、高氟组破骨细胞数量分别为（337.5 4-70.5）、（447.5 ±43.4）、（472.9±34.8）、（475.3±24-3）个/孔,各染氟组明显高于对照组（P均〈0.05）;体外培养5 d时,对照组、低氟组、中氟组、高氟组破骨细胞数量分别为（92.5±22.1）、（123.0±26.4）、（135.5 ±22.2）、（136.9 ±23.0）个/孔,各染氟组明显高于对照组（P均〈0.05）.②体外培养5 d时,对照组、低氟组、中氟组、高氟组破骨细胞骨吸收陷窝面积分别为（0.088±0.030）、（0.100 ±0.018）、（0.152±0.015）、（0.242±0.031）mm2/片,中氟组和高氟组明显高于对照组（P均〈0.05）.③对照组、低氟组、中氟组、高氟组骨髓基质细胞RANKL/OPG mRNA表达比值分别为100.00±56.02、144.95±97.21、223.25 ±184.48、193.98 ±137.93,中氟组和高氟组明显高于对照组（P均〈0.05）.结论 氟中毒可引起体外培养破骨细胞数量增多,促进其细胞分化及骨吸收活性,该作用可能与其上调 RANKL/OPC,mRNA表达比值有关.
- 杜光喻茂娟徐小雅金慰芳高建军
- 关键词：氟化物中毒细胞培养技术骨保护素
- 体外局部大剂量辐射对大鼠骨髓间充质干细胞分化的影响被引量：1
- 2009年
- 介绍了30 Gyγ射线局部照射大鼠股骨头部位,观察辐射对骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化的影响。辐照2周后取股骨进行骨髓间充质干细胞培养,经细胞诱导液诱导后进行碱性磷酸酶染色,油红O染色,CD31免疫荧光鉴定,同时RT-PCR检测Cbf-α1、PPAR-γ、VEGF-a和KDR的表达。大剂量辐射抑制BMSCs向相关细胞的分化,降低其Cbf-α1、PPAR-γ、VEGF-a和KDR的表达。诱导可促进体外培养BMSCs向成骨细胞、脂肪细胞和血管内皮细胞的分化,照射组Cbf-α1、PPAR-γ、VEGF-a和KDR mRNA水平明显上调,其中PPAR-γ和VEGF-a表达水平接近对照组。体外大剂量辐射抑制BMSCs向成骨细胞、脂肪细胞、内皮细胞分化,给予一定诱导,辐射损伤的BMSCs体外分化能力可以部分恢复,其相关基因的表达恢复明显,但其向成熟成骨细胞、脂肪细胞和内皮细胞分化的数目依然较少。
- 徐小雅金慰芳高建军周轶
- 关键词：骨髓间充质干细胞过氧化物酶体增殖物激活受体Γ血管内皮生长因子
- 大豆苷原(DA)对成骨细胞雌激素受体(ER)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的调节作用及其受雌激素的影响(英文)被引量：4
- 2012年
- 目的研究大豆苷原(daidzein,DA)对成骨细胞雌激素受体(estrogen receptor,ER)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)表达的调节作用,并观察雌激素对这种调节的影响。方法小鼠成骨细胞MC3T3-E1体外低血清(α-MEM,含2%FBS)培养,分别用0.1和10μmol/L的DA处理,采用实时定量PCR或Western blot分析细胞ERα、ERβ和PPARγ的表达变化。加入浓度均为0.1μmol/L的ER拮抗剂ICI182780或PPARγ拮抗剂GW9662,观察ER和PPARγ在DA调节中的作用。为观察雌激素的影响,采用无血清培养,在10nmol/L 17β-雌二醇(E2)条件下研究DA对细胞受体表达的作用。结果 DA抑制体外培养成骨细胞ER表达,而刺激其PPARγ表达。0.1和10μmol/L的DA分别下调ERα蛋白水平44%和38%(P<0.05),下调ERβ蛋白水平50%(P<0.05)和31%(P<0.05),上调PPARγ74%和78%(P<0.05)。ICI182780可阻断DA对ERα转录水平的抑制作用,DA对成骨细胞ERβmRNA水平的下调无统计学意义(P=0.087 4);GW9662可阻断DA对PPARγ表达的上调作用,提示成骨细胞ER和PPARγ参与自身表达调节。在10nmol/L 17β-雌二醇条件下,DA对无血清培养的成骨细胞ERα转录水平的抑制作用由28.0%～29.6%(P<0.05)增强至74.0%～82.8%(P<0.01),其对ERβ表达的抑制作用也明显增强,而对PPARγ的上调作用几乎丧失。结论 DA可通过调节ERs和PPARγ等受体表达间接影响成骨细胞的药物反应,雌激素可明显影响DA的受体调节作用。DA对细胞受体表达的调节作用可能是其对成骨细胞时间相关双相调节的重要机制之一。
- 王立芳徐小雅周轶王金凤金慰芳王洪复张绍芬高建军
- 关键词：成骨细胞雌激素
- 辐射对骨髓间充质干细胞增殖分化及相关基因表达的影响被引量：3
- 2009年
- 为观察大鼠局部大剂量辐射后,骨髓间充质干细胞增殖分化及相关基因的表达,以137Csγ射线对大鼠股骨头部位局部照射,吸收剂量为30Gy,剂量率为0.83Gy/min,照后两周取股骨头进行骨髓间充质干细胞(BMSCs)培养,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)绘制生长曲线及进行集落计数,RT-PCR检测Cbf-α1,PPAR-γ,VEGF-a和KDR的表达。骨髓间充质干细胞大剂量辐射后细胞增殖能力明显降低,集落形成数目减少;Cbf-α1,PPAR-γ,VEGF-a和KDR的表达均降低,其中Cbf-α1,PPAR-γ,VEGF-a表达降低幅度分别达18.98%,9.46%和57.34%,与对照组相比差异显著(p<0.05)。故体外大剂量局部辐射明显损伤骨髓间充质干细胞,使其增殖分化及相关基因的表达降低。
- 徐小雅金慰芳高建军周轶盛辉
- 关键词：骨髓间充质干细胞过氧化物酶体增殖物激活受体Γ
- 辐照骨髓淋巴细胞对成骨细胞的影响被引量：1
- 2014年
- 探索辐照后骨髓淋巴细胞对成骨细胞增殖分化的影响。采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,密度梯度离心法获取大鼠骨髓淋巴系细胞,137Csγ-射线辐照淋巴细胞和成骨细胞,剂量6 Gy,分组为0 Gy成骨细胞+0 Gy淋巴细胞(0OB0L),0 Gy成骨细胞+6 Gy淋巴细胞(0OB6L),6 Gy成骨细胞+6 Gy淋巴细胞(6OB6L),共培养6 h后,取各组淋巴细胞与正常成骨细胞共培养,MTT和PNPP法观察其对成骨细胞增殖和分化的影响,Real time PCR方法观察成骨细胞ALP、OCN、RANKL和OPG的基因表达变化。结果显示,辐照骨髓淋巴细胞抑制成骨细胞分化,成骨细胞ALP和OCN的表达显著降低,RANKL的表达增高,RANKL/OPG的比值则显著升高。辐照后的骨髓淋巴细胞抑制成骨细胞分化并且可能通过改变RANKL/OPG的比值进而影响破骨细胞的功能。
- 邹琼丁巧灵徐小雅周轶金慰芳高建军
- 关键词：淋巴细胞成骨细胞增殖分化共培养电离辐射
- CBP-P300抑制剂在肠道损伤疾病中的应用
- 本发明公开了CBP‑P300抑制剂在预防和/或治疗放射引起的肠道疾病中的应用，其应用包括CBP‑P300抑制剂在制备预防和/或治疗肠道损伤疾病的药物的用途，还公开了一种用于预防和/或治疗放射引起的肠道损伤的药物和一种用于...
- 华国强饶欣欣高建军徐小雅周轶
- 文献传递
- 电离辐射致股骨头坏死早期病理特点和机制研究
- 本文对电离辐射致股骨头坏死早期病理特点和机制进行了研究。结果表明：30Gy以上大剂量单次局部照射股骨头部位可造成放射性股骨头坏死，骨组织病理改变主要表现为空骨陷窝增加。空骨陷窝随时间的变化与照射剂量有关，并随时间延长呈确...
- 徐小雅
- 关键词：股骨头坏死电离辐射
- 文献传递
- 成纤维生长因子(FGF)23基因沉默对甲状旁腺激素(PTH)促成骨细胞分化作用的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究内源性成纤维生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)对甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)促成骨细胞分化作用的影响。方法采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,应用小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术(RNAi)沉默成骨细胞FGF23表达,应用MTT法和PNPP法检测细胞增殖和碱性磷酸酶(alkaline phosphates,ALP)活性,应用real-time RT-PCR法检测其FGF23、ALP和骨钙素(osteocalcin,OCN)等基因mRNA水平,研究PTH对培养成骨细胞和FGF23基因沉默细胞的作用。结果 rhPTH1-34对培养成骨细胞增殖促进作用明显,分化促进作用弱。1×10-10～1×10-8mol/L rhPTH1-34作用3天,细胞增殖率增加31.6%～50.5%(P<0.05),而细胞比活性未见明显改变。同时其ALP和OCN转录水平轻度上调,分别较对照组增加35%(P<0.05)和16%(P>0.05)。rhPTH1-34上调成骨细胞FGF23mRNA水平(4倍),该作用可被针对FGF23特异的shRNA转染所抑制。FGF23基因沉默后PTH促分化作用明显增强,其ALP和OCN mRNA水平分别较对照组增加1.8倍(P<0.05)和5.8倍(P<0.05),显示内源性FGF23对PTH促分化的干扰作用。结论内源性FGF23可能参与PTH促分化作用的调节,FGF23上调可干扰PTH的促成骨细胞分化作用。
- 王金凤徐小雅丁巧灵周轶金慰芳王洪复高建军
- 关键词：RNA干扰(RNAI)
