徐希
- 作品数：11 被引量：9H指数：2
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金温州市科技局资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 构建含自杀基因TK的慢病毒载体质粒
- 目的:构建含自杀基因TK的慢病毒载体质粒。方法:采用分子克隆技术从质粒tgCMV/HyTK中扩增得到目的基因HSV1-TK,用EcorⅠ和SacⅡ双酶切纯化的PCR产物,在T4-DNA连接酶作用下于室温将其连接于经Eco...
- 徐希俞康
- 关键词：自杀基因慢病毒分子克隆
- 文献传递
- 树突状细胞对移植小鼠慢性移植物抗宿主病作用的前期研究
- 目的：
探讨小鼠树突状细胞对供者淋巴细胞输注诱导的慢性GVHD和GVL效应的影响，为临床预防和治疗慢性GVHD同时保留GVL作用探索新的思路。通过供鼠淋巴细胞输注诱导小鼠慢性GVHD，并在此基础上荷瘤建立慢性GVH...
- 徐希
- 关键词：慢性移植物抗宿主病抗白血病作用树突状细胞自杀基因动物模型
- 文献传递
- 氢醌对人骨髓单个核细胞组蛋白去乙酰化酶的影响被引量：2
- 2016年
- 目的观察氢醌对人骨髓单个核细胞组蛋白去乙酰化酶（HDAC）活力、HDAC1和HDAC2 mRNA表达水平影响，以及加入HDAC抑制剂曲古抑菌素（TSA）作用10h，HDAC活力、HDAC1和HDAC2 mRNA表达水平变化。方法采集正常人骨髓制备单个核细胞悬液，分0h对照组、氢醌3h组、氢醌6h组、氢醌12h组、氢醌24h组、氢醌＋曲古抑菌素10h组、氢醌10h组，收集各组骨髓单个核细胞，提取细胞核蛋白和RNA，应用去HDAC试剂盒检测酶活力变化，实时荧光定量PCR检测HDAC1和HDAC2 mRNA表达水平。结果氢醌3、6、12h组HDAC酶活力分别为0h对照组的1．31、1．53、1．148倍，差异有统计学意义（P〈0．05）。RT-PCR结果显示，除了氢醌24h组，氢醌3、6、12h组HDAC1 mRNA表达量分别为0h对照组的1．173、1．901、2．348倍，差异有统计学意义（P〈0．05）。与对照组比较，氢醌3h组和氢醌24h组HDAC2 mRNA表达量的差异无统计学意义（P〉0．05），氢醌6h组和氢醌12h组的HDAC2 mRNA表达量分别为0h对照组的1．426、1．766倍，差异有统计学意义（P〈0.05）。HQ与TSA作用骨髓单个核细胞10h结果显示，与氢醌10h组比较，氢醌＋曲古抑菌素10h组的HDAC活力降低25．6％，差异有统计学意义（P〈0．05）；与对照组比较，氢醌＋曲古抑菌素10h组的HDAC活力升高13．0％，差异有统计学意义（P〈0.05）。RT-PCR结果显示，HQ与TSA作用骨髓单个核细胞10h，氢醌＋曲古抑菌素10h组比氢醌10h组的HDAC1 mRNA表达水平下降26．9％，HDAC2 mRNA表达水平下降19．3％，与对照组的差异均有统计学意义（P〈0．05）。氢醌10h组及氢醌＋曲古抑菌素10h组的HDAC2 mRNA和HDAC1 mRNA表达水平均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论在一定时间范围内，氢醌作用骨髓单个核细胞，HDAC活力，HDAC1和HDAC2 mRNA表达水平增加；HDAC抑制剂TSA可以降低氢醌引起的HDAC活力以及HDAC1�
- 洪莉莉俞康颜情贤徐希施益芬葛杭萍
- 关键词：组蛋白类去乙酰化酶酶抑制剂
- 来氟米特预防小鼠异基因骨髓移植后aGVHD的实验研究
- 2010年
- 目的 评估来氟米特（LEF）对小鼠异基因骨髓移植（allo-BMT）术后急性移植物抗宿主病（aGVHD）的预防作用.方法 以SPF级雄性C57BL/6（H-2b）为供鼠,雌性BALB/C（H-2d）为受鼠,建立allo-BMT/aGVHD动物模型,并将大鼠随机分为：A组（模型对照组）、B组（环孢菌素A组,剂量为10 mg·kg^-1·d^-1）、C组（LEF组,剂量为10 mg·kg^-1·d^-1）,同时根据临床表现、病理组织学检查、平均生存时间评估各组aGVHD的严重程度.结果 B组和C组受鼠平均生存时间均较A组显著延长（均P〈0.01）,B组和C组间平均生存时间的差异均无统计学意义（均P〉0.05）;B组和C组受鼠的aGVHD临床表现和病理改变均较A组明显减轻.结论 LEF可有效预防小鼠allo-BMT术后出现的aGVHD,并可减轻其症状和病理损害程度,同时显著延长平均生存时间.
- 梁彬江松福庄强蔡芳芳徐希俞康
- 关键词：来氟米特急性移植物抗宿主病异基因骨髓移植小鼠
- 小鼠半相合供者淋巴细胞输注诱导慢性移植物抗宿主病模型的建立
- 2013年
- 目的建立一个稳定可靠的半相合供者淋巴细胞输注诱导慢性移植物抗宿主病(chronic graft-versus-host dis-ease,cGVHD)动物模型,为allo-HSCT(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation)中cGVHD研究提供理想的技术平台。方法以雄性BALB/c(H-2d)为供鼠,雌性CB6F1(BALB/c×C57BL/6 F1,H-2d/b)为受鼠,输注不同剂量的供鼠脾细胞诱导不同程度的小鼠慢性移植物抗宿主病。根据存活期、临床和病理积分标准判断cGVHD程度。结果输注不同量的脾细胞后,各组受鼠均不同程度的诱导出cGVHD,以6×107和8×107组观察到典型的cGVHD临床和病理改变。其发生时间多集中在供鼠脾细胞输注后25～50天,临床表现以皮肤改变、体重减轻、弓背为主,病理损害以肝脏尤为明显。临床积分和病理积分与对照组均有统计学差异。6×107和8×107组各时间点临床积分无统计学差异。结论以6×107和8×107供鼠脾细胞输注,可以成功诱导出动物慢性移植物抗宿主病模型。为进一步研究慢性移植物抗宿主病提供技术平台和奠定实验学基础。
- 洪莉莉徐希颜情贤俞康
- 关键词：小鼠慢性移植物抗宿主病动物模型
- 慢病毒介导的自杀基因对树突状细胞的杀伤作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨慢病毒介导的自杀基因胸腺激酶(TK)对小鼠树突状细胞(DC)的杀伤作用。方法构建含自杀基因TK的慢病毒载体质粒,转染树突状细胞后通过更昔洛韦激活自杀基因使细胞死亡。结果阳性重组质粒酶切及测序鉴定与预期结果相符,成功构建其真核表达载体。收集含自杀基因的慢病毒,测其效价为2×109TU/ml,达到实验要求。慢病毒转染树突状细胞后,观察树突状细胞的形态、大小及数量与对照组比较无明显差异,经流式细胞仪检测绿色荧光蛋白(GFP)表达率为96.43%。CCK-8法检测发现,树突状细胞随着更昔洛韦药物浓度的增加,细胞凋亡率逐渐上升。药物浓度100μg/ml作用时间48h时,为药物对细胞的最佳杀伤作用时间;更昔洛韦该药物对正常的树突状细胞未发现有毒性作用。结论慢病毒介导的自杀基因TK对小鼠树突状细胞具有显著的杀伤作用。
- 程婷婷徐希葛杭萍陈枫煜梁彬俞康
- 关键词：树突状细胞自杀基因慢病毒更昔洛韦
- 榄香烯对B细胞淋巴瘤Raji细胞株的体内外抑制作用被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨榄香烯对B细胞淋巴瘤Raji细胞株的体内外作用。方法:不同浓度的榄香烯体外作用Raji细胞不同时间,CCK-8法检测增殖抑制作用,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,DAPI染色进行细胞核形态学分析,PI单染色法检测细胞周期改变;动物实验观察榄香烯体内抑瘤作用。结果:榄香烯对Raji细胞生长具有明显的抑制作用,呈量效和时效关系;榄香烯能诱导Raji细胞凋亡,呈量效关系;DAPI染色显示榄香烯作用Raji细胞具有凋亡细胞核的特征性核形态;细胞周期分析显示G0/G1期细胞相对增多、S期和G2/M期细胞均相对减少;榄香烯明显抑制Raji细胞在SCID小鼠体内增殖。结论:榄香烯对Raji细胞具有明显的增殖抑制作用,其机制可能是通过G0/G1期阻滞导致细胞凋亡发挥效用的。
- 徐希庄彦章圣辉俞康
- 关键词：榄香烯RAJI细胞动物实验
- 榄香烯对K562细胞株的体内外抑制作用被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨榄香烯对慢性粒细胞白血病急变的细胞K562株的体内外作用。方法:不同浓度榄香烯体外作用K562细胞不同时间,CCK-8法检测体外增殖抑制作用,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,DAPI染色进行细胞核形态学分析,动物实验观察榄香烯对K562的体内抑制作用。结果:榄香烯对K562细胞生长具有明显的抑制作用,呈量效和时效关系;榄香烯能诱导K562细胞凋亡,呈量效关系;DAPI染色显示榄香烯诱导K562细胞并显示特征性的凋亡细胞核形态;榄香烯明显抑制K562细胞在SCID小鼠体内增殖。结论:榄香烯主要通过诱导细胞凋亡,发挥对K562细胞明显的增殖抑制作用。
- 庄彦徐希章圣辉俞康
- 关键词：榄香烯K562细胞白血病动物实验
- 小鼠慢性移植物抗宿主病荷瘤模型的建立被引量：2
- 2013年
- 目的通过供鼠淋巴细胞输注诱导小鼠慢性GVHD,并在此基础上荷瘤建立慢性GVHD的GVL模型,为研究慢性GVHD和GVL作用奠定基础。方法以雄性BALB/c(H-2d)为供鼠,雌性CB6F1(BALB/c×C57BL/6 F1,H-2d/b)为受鼠,通过尾静脉输注8×107/个脾细胞诱导小鼠慢性移植物抗宿主病,在输注25天后,受鼠随机分组,通过尾静脉或腹腔或皮下方式接种P815肿瘤细胞,构建慢性GVHD荷瘤模型,用于研究慢性GVHD的同时研究GVT作用。结果 3种荷瘤方式均可形成荷瘤。尾静脉方式可形成小鼠白血病模型,符合人类疾病特点,成功构建慢性GVDH荷瘤的GVL模型。结论成功建立小鼠慢性移植物抗宿主病荷瘤模型。
- 颜情贤徐希洪莉莉俞康
- 关键词：慢性移植物抗宿主病小鼠
- 小鼠半相合供者淋巴细胞输注诱导慢性移植物抗宿主病模型的建立
- 目的:建立小鼠慢性移植物抗宿主病模型,为进一步研究慢性移植物抗宿主病奠定基础。方法:以雄性BALB/c(H-2d)为供鼠,雌性CB6F1(BALB/c×C57BL/6 F1,H-2d/b)为受鼠,输注不同剂量的供鼠脾细胞...
- 徐希俞康
- 关键词：慢性移植物抗宿主病动物模型
- 文献传递
