文良柱
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- Thanatin突变体在大肠杆菌中的表达及纯化被引量：4
- 2007年
- 目的:在大肠杆菌中克隆表达thanatin突变体(Th-T)蛋白并纯化。方法:PCR合成Th-T基因并克隆到pET32a载体的BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点之间,构建Th-T原核表达载体(pET32a-Th-T)并转化到大肠杆菌BL21融合表达,通过正交实验优化表达条件,His-Bind介质纯化。考察经酶切纯化后的重组Th-T对4种供试菌的最低抑制浓度。结果:菌体在LB培养基(pH6.5)培养4.5 h,IPTG 0.4 mmol.L-1诱导7 h,Th-T融合蛋白大量可溶性表达,经药敏试验证明纯化的重组Th-T具有预期的抗菌活性。结论:本研究为通过大肠杆菌体系表达重组Th-T抗菌药物奠定了基础。
- 顾林文良柱吴国球徐寒梅沈子龙
- 关键词：THANATIN突变体大肠杆菌融合蛋白纯化药敏试验
- 死亡素在裂殖酵母中的表达被引量：6
- 2005年
- 目的:在裂殖酵母中表达死亡素。方法:通过PCR方法人工合成死亡素基因,构建重组表达载体pRHZ41Tha,转化到裂殖酵母中,杯碟法检验表达产物活性。结果:重组载体构建成功并且转化到酵母中,外源基因在转化子中得到了表达,表达产物具有抑菌活性。结论:本研究成功构建了具有抑菌活性的表达产物,为进一步将死亡素研制成添加剂和药物奠定了一定的基础。
- 钱坤吕正兵文良柱沈子龙
- 关键词：裂殖酵母抑菌
- 血管生成抑制多肽及其制备方法和应用
- 本发明涉及生物工程领域，具体涉及一类高效抑制血管生成多肽及其制备方法和用于抗肿瘤药物的应用。本发明通过对内皮抑素的第6－49氨基酸进行修饰，修饰后的多肽具有比内皮抑素更强的体内抗肿瘤活性及肿瘤靶向性。
- 徐寒梅沈子龙文良柱
- 文献传递
- 死亡素突变体TH1在裂殖酵母中的分泌表达被引量：1
- 2007年
- 通过PCR方法人工合成带有K28信号肽的死亡素突变体基因,构建了重组表达载体pRHZ-41-k28Th1,转化到裂殖酵母中进行表达,发酵液中检测到与TH1理论分子量一致的多肽分子,微量稀释法检验表达产物具有抑菌活性,并计算了粗产物对4种供试菌的最低抑菌浓度。
- 文良柱钱坤徐寒梅沈子龙
- 关键词：裂殖酵母抑菌
- 血管生成抑制多肽及其制备方法和应用
- 本发明涉及生物工程领域，具体涉及一类高效抑制血管生成多肽及其制备方法和用于抗肿瘤药物的应用。本发明通过对内皮抑素的第6-49氨基酸进行修饰，修饰后的多肽具有比内皮抑素更强的体内抗肿瘤活性及肿瘤靶向性。
- 徐寒梅沈子龙文良柱
- 文献传递
- 重组死亡素裂殖酵母工程菌发酵的研究
- 2005年
- 在裂殖酵母基本培养基的基础上,通过正交设计.优化了培养基6个组分;优化后的培养基,摇瓶发酵,目的蛋白产量在26-51 mg/L之间,发酵罐的批次发酵,产量在51-102 mg/L之间。
- 钱坤吕正兵文良柱周玉燕顾林沈子龙
- 关键词：裂殖酵母正交设计发酵
- 蜂毒肽与死亡素杂合肽(MT)在大肠杆菌中融合表达的研究被引量：7
- 2006年
- 人工合成的蜂毒肽与死亡素的杂合肽DNA序列,经聚合酶链式反应(PCR)扩增后得到带有BamHI和XhoI限制性酶切位点的序列.将此基因克隆至载体pET-32a,成功构建了重组质粒pET32a-MT.测序验证后转化大肠杆菌BL21(DE3),37℃IPTG诱导,获得高效表达,融合蛋白经Ni柱亲和纯化后用肠激酶切下杂合肽,杯碟法检验酶切产物具有抑菌活性。
- 文良柱张家骊钱坤顾林徐寒梅沈子龙
- 关键词：蜂毒肽抑菌
