顾林
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- Thanatin突变体在大肠杆菌中的表达及纯化被引量：4
- 2007年
- 目的:在大肠杆菌中克隆表达thanatin突变体(Th-T)蛋白并纯化。方法:PCR合成Th-T基因并克隆到pET32a载体的BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点之间,构建Th-T原核表达载体(pET32a-Th-T)并转化到大肠杆菌BL21融合表达,通过正交实验优化表达条件,His-Bind介质纯化。考察经酶切纯化后的重组Th-T对4种供试菌的最低抑制浓度。结果:菌体在LB培养基(pH6.5)培养4.5 h,IPTG 0.4 mmol.L-1诱导7 h,Th-T融合蛋白大量可溶性表达,经药敏试验证明纯化的重组Th-T具有预期的抗菌活性。结论:本研究为通过大肠杆菌体系表达重组Th-T抗菌药物奠定了基础。
- 顾林文良柱吴国球徐寒梅沈子龙
- 关键词：THANATIN突变体大肠杆菌融合蛋白纯化药敏试验
- 重组死亡素裂殖酵母工程菌发酵的研究
- 2005年
- 在裂殖酵母基本培养基的基础上,通过正交设计.优化了培养基6个组分;优化后的培养基,摇瓶发酵,目的蛋白产量在26-51 mg/L之间,发酵罐的批次发酵,产量在51-102 mg/L之间。
- 钱坤吕正兵文良柱周玉燕顾林沈子龙
- 关键词：裂殖酵母正交设计发酵
- 蜂毒肽与死亡素杂合肽(MT)在大肠杆菌中融合表达的研究被引量：7
- 2006年
- 人工合成的蜂毒肽与死亡素的杂合肽DNA序列,经聚合酶链式反应(PCR)扩增后得到带有BamHI和XhoI限制性酶切位点的序列.将此基因克隆至载体pET-32a,成功构建了重组质粒pET32a-MT.测序验证后转化大肠杆菌BL21(DE3),37℃IPTG诱导,获得高效表达,融合蛋白经Ni柱亲和纯化后用肠激酶切下杂合肽,杯碟法检验酶切产物具有抑菌活性。
- 文良柱张家骊钱坤顾林徐寒梅沈子龙
- 关键词：蜂毒肽抑菌
