施勤
- 作品数：21 被引量：21H指数：3
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际原子能机构基金江苏省医学领军人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生哲学宗教更多>>
- 抗人CD154单克隆抗体及其应用
- 本发明涉及抗人CD154单克隆抗体1B1和4F1，其制备方法以及基于这些单克隆抗体配对制备的可溶性人CD154酶联检测试剂盒。本发明进一步涉及使用所说的试剂盒定性和定量检测人生物学样品中存在的可溶性人CD154，借以诊断...
- 张学光樊一笋施勤
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- 鸢尾素缓解棕榈酸对骨髓间充质干细胞的成骨抑制被引量：2
- 2024年
- 背景:鸢尾素是肌肉细胞在运动时从跨膜蛋白FNDC5中分离出来的肌因子,具有诱导白色脂肪组织褐变的功能,但是其对脂毒性引起的成骨分化的影响及机制尚不清楚。目的:探究鸢尾素对棕榈酸诱导的骨髓间充质干细胞成骨能力的影响及作用机制。方法:CCK-8检测不同浓度棕榈酸对小鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响,以及鸢尾素对棕榈酸存在条件下骨髓间充质干细胞增殖的影响;鸢尾素和棕榈酸预处理24 h后,对小鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导分化,在成骨诱导培养第7天进行碱性磷酸酶染色,qRT-PCR检测成骨相关基因的表达,Western blot检测AMPK/BMP2/SMAD信号通路相关蛋白的表达,第21天进行茜素红染色,检测成骨差异。结果与结论:①CCK-8结果提示骨髓间充质干细胞的扩增与棕榈酸的浓度呈反比,但在0.02 mmol/L浓度时,棕榈酸对骨髓间充质干细胞扩增无显著影响,鸢尾素质量浓度在0.1-20μg/L范围内时,不影响骨髓间充质干细胞增殖;②碱性磷酸酶染色及茜素红染色结果显示,棕榈酸抑制骨髓间充质干细胞成骨分化能力,鸢尾素能改善棕榈酸诱导的骨髓间充质干细胞成骨抑制,qRT-PCR结果显示,棕榈酸可以引起成骨相关基因下调,而鸢尾素可以抑制这一趋势;③Western bolt结果显示,相较于单纯棕榈酸干预组,鸢尾素处理后增强了骨髓间充质干细胞中AMPK/BMP2/SMAD信号通路传导。该研究发现了鸢尾素能够改善棕榈酸预处理骨髓间充质干细胞的成骨分化能力并提出了具体的机制可能是由AMPK/BMP/SMAD信号通路介导的。
- 张元澍何旭薛源金叶盛汪凯施勤芮永军
- 关键词：骨髓间充质干细胞棕榈酸
- 一种骨髓去分化间充质干细胞的培养方法
- 本发明公开了一种骨髓去分化间充质干细胞的培养方法。其中包括：从人骨髓中经Ficcol分离培养获得间充质干细胞，待细胞处于生长对数期，直至细胞密度达到70%-80%时，弃去间充质干细胞培养基，更换成骨诱导培养基进行培养3-...
- 施勤杨惠林张慧
- 文献传递
- 一种促进软骨损伤修复的共交联双网络水凝胶支架的制备方法
- 本发明属于生物医用材料领域，具体涉及一种促进软骨修复、生长的共交联双网络水凝胶支架的制备方法。包括如下步骤：（1）GelMA的制备；（2）可光交联HSNGLPL多肽的制备；（3）水凝胶支架的制备：将GelMA和可光交联H...
- 施勤潘国庆崔文国鞠晓晶顾巧丽
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- 3D打印不同孔径钛合金支架修复兔股骨缺损:600μm孔径更有利于骨整合被引量：4
- 2021年
- 背景:多孔钛合金的微孔结构不但能为成骨细胞的增殖与迁移提供充分的空间,而且能增强间充质干细胞的成血管作用,影响成骨基因的表达和成骨细胞分化,是骨整合的重要因素。目的:分析不同孔径3D打印多孔钛合金支架修复兔股骨外髁骨缺损的骨整合能力。方法:将20只新西兰兔40条后腿随机分为A、B、C、D组,制备股骨外髁5 mm×5 mm骨缺损模型,A、B、C组分别植入200,600,1000μm孔径多孔钛合金支架,D组不植入材料。术后4,8周拍摄X射线片,观察植入物有无移位、脱出及植入物周围是否存在骨溶解、骨坏死等现象;术后8周时,Micro-CT检测股骨标本骨小梁厚度、骨小梁数量、骨小梁相对体积、骨表面积密度、骨小梁分离度,组织学观察骨整合情况。实验方案经苏州大学动物实验伦理委员会批准。结果与结论:①X射线片显示,内植物位置良好,无明显移位和脱落,材料周围骨形成良好,未见骨溶解、骨坏死等现象;②Micro-CT检测显示,3组植入物的孔隙内及植入物周围均不同程度地有骨组织存在,B组微孔的骨小梁数量及骨表面积密度高于A、C组(P<0.05),A组微孔的骨小梁厚度大于B、C组(P<0.05);③甲苯胺蓝染色显示,B组几乎所有表层微孔内均有新生骨组织长入,部分新生骨延伸进入支架的深层孔隙中,与多孔结构结合紧密,形成机械交锁;A、C组仅有少量表层微孔存在新生骨组织长入,深层孔隙无明显的新生骨质形成,新生骨与植入物结合较差;④结果表明相对于200,1000μm孔径,600μm孔径3D打印多孔钛合金支架更有利于新骨形成。
- 王庆翁益平刘宏伟张文施勤张润泽蒋俊锋王彩梅
- 关键词：孔径钛合金新骨形成3D打印骨缺损
- 携载盐酸吉西他滨聚乳酸纤维膜可抑制骨肿瘤的生长被引量：1
- 2018年
- 背景:盐酸吉西他滨是一种水溶性抗癌药,可诱导肿瘤细胞凋亡,但其在体内存在释放过快等缺点。目的:观察载携盐酸吉西他滨聚乳酸静电纺丝纤维膜对人骨肉瘤细胞株MG-63生长的影响。方法:分别制备聚乳酸静电纺丝纤维膜(对照组)与携载盐酸吉西他滨的聚乳酸静电纺丝纤维膜(实验组),并进行表征。将两组纤维膜分别浸泡于DMEM低糖培养基中,3,5,7 d取释放上清液。将第5代骨肉瘤细胞株MG-63接种于96孔板,每孔均加入含体积分数15%胎牛血清的DMEM低糖培养基,分7组培养,其中3组分别加入实验组3,5,7 d的释放上清液,另3组分别加入对照组3,5,7 d的释放上清液,以不加入释放上清液的为阴性对照组,培养3 d后,CCK-8法检测细胞增殖,RT-PCR检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达。结果与结论:(1)实验组与对照组纤维膜纤维丝平滑均一,表面没有明显的颗粒,两种纤维膜的纤维直径、接触角、拉伸强度比较差异无显著性意义;(2)CCK-8结果显示,与阴性对照组比较,对照组不同时间点的释放上清液对骨肉瘤细胞株MG-63的增殖无影响;与阴性对照组比较,实验组不同时间点的释放上清液可抑制骨肉瘤细胞株MG-63的增殖(P<0.05),并且随着释放上清液时间的延长,抑制作用越来越明显;(3)RT-PCR结果表明,与相同时间点对照组释放上清液比较,实验组释放上清液可增加细胞Bax mR NA表达,降低Bcl-2mR NA表达;(4)结果表明携载盐酸吉西他滨的聚乳酸静电纺丝纤维膜,可持续抑制人骨肉瘤细胞MG-63的增殖,促进其凋亡。
- 刘星志相宜鞠晓晶崔文国崔文国
- 关键词：骨肉瘤水溶性药物盐酸吉西他滨国家自然科学基金
- 制备负载细胞可注射微球及体外评价被引量：1
- 2022年
- 背景:利用生物材料作为细胞载体能够提供3D培养微环境,支持细胞活力和功能,并有可能扩大细胞治疗的数量和治疗效果,因此寻找一个合适的生物材料显得十分重要。目的:制备可注射甲基丙烯酰化明胶多孔水凝胶微球,探究其生物相容性及负载细胞用于组织工程的潜力。方法:利用微流控技术制备可注射甲基丙烯酰化明胶多孔水凝胶微球,表征微球的微观形貌与硬度。分别采用正常培养基(对照组)与微球浸提液(实验组)培养MC3T3-E1细胞,利用CCK-8法检测细胞增殖,活死细胞染色法检测细胞存活。将微球与CD3^(+)T细胞共培养,以单独培养的CD3^(+)T细胞为对照,光学显微镜下观察微球是否对T细胞活化产生影响,Dapi染色观察微球负载T细胞的形态,流式细胞术验证与微球共培养是否对CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞的比例产生影响。结果与结论:①倒置显微镜下可见,冻干前后的微球均保持高度分散且大小均一,直径大小满足可注射条件;扫描电镜下可见,冻干后的微球为多孔结构,孔隙均匀分布;微球的弹性模量为(9.76±2.04)kPa。②CCK-8检测与活死细胞染色显示,两组MC3T3-E1细胞的增殖趋势与增殖活性无明显差别。③光学显微镜下可见,培养2 d时微球未引起CD3^(+)T细胞的活化,也未干预CD3^(+)T细胞的活化,CD3^(+)T细胞分布于微球表面及孔隙内。④流式细胞术检测显示,微球未影响CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞的比例。⑤结果表明,通过微流控技术制备了一种可注射甲基丙烯酰化明胶多孔微球,其具有良好的生物相容性且不会对细胞产生不利影响,是一种在组织工程中具有广阔应用前景的生物材料。
- 何家辰刘畅陈迟迟施勤
- 关键词：微流控多孔微球可注射T细胞
- 肥胖小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化被引量：2
- 2022年
- 背景:骨髓间充质干细胞分化受到多种因素的影响,肥胖小鼠骨髓间充质干细胞具有更佳的成骨分化能力。目的:探究正常饮食小鼠与高脂饮食诱导的肥胖小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的差异。方法:将4-6周龄Balb/c小鼠随机分为正常饮食组和高脂饮食组,饲养20周后,通过全骨髓培养法得到骨髓间充质干细胞,成骨诱导7 d后进行碱性磷酸酶染色以及qRT-PCR检测成骨相关基因的表达,成骨诱导14 d后进行茜素红染色。高脂饲养20周后,Micro-CT分析股骨骨量的变化,小鼠股骨切片进行苏木精-伊红染色。结果与结论:①与正常饮食组小鼠相比,高脂饮食饲养20周后小鼠体质量显著增加;②与正常饮食组小鼠骨髓间充质干细胞相比,高脂饮食组小鼠骨髓间充质干细胞中碱性磷酸酶阳性表达和钙结节数目显著增加,成骨相关基因碱性磷酸酶、骨桥蛋白和RUNT相关转录因子2表达水平升高;③Micro-CT重建和骨形态参数量化结果显示,与正常饮食组小鼠相比,高脂饮食组小鼠骨量显著增加,其中骨密度、骨体积分数、骨面积与骨体积比值、骨小梁厚度和骨小梁数目均显著增加,而骨小梁分离度显著减小,苏木精-伊红染色显示高脂饮食组小鼠股骨内含有较多的骨小梁;④结果表明,肥胖小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化能力增强,进一步导致小鼠的骨密度、骨小梁厚度和骨小梁数目显著增加,骨量显著升高。
- 陈迟迟张雨张雨施勤
- 关键词：干细胞骨髓间充质干细胞高脂饮食肥胖成骨诱导成骨分化小鼠
- 重组人CD40配体对SKOV3卵巢癌细胞生长特性的影响
- 目的:观察重组人可溶性CIM0配体(srhCD40L)对卵巢癌细胞株SKOV3增殖、表面抗原变化、细胞周期、凋亡及肿瘤坏死因子受体相关因子(Tumor necrosis factor receptor associate...
- 刘艳施勤
- 文献传递
- 抗人OX40L单克隆抗体制备及应用
- 本发明涉及肿瘤坏死因子超家族成员的结合蛋白质或多肽，更具体地说，本发明涉及抗人OX40L单克隆抗体9H10、4C12和1E7，其制备方法以及这些单克隆抗体在抑制混合淋巴细胞反应、刺激T细胞增殖、诱导树突状细胞分化成熟、刺...
- 张学光王勤陈永井施勤
- 文献传递
