景宏丽
- 作品数：69 被引量：118H指数：5
- 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项农业部动物疫情监测与防治项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 流行性造血器官坏死病毒焦磷酸测序方法研究
- 2019年
- 为建立流行性造血器官坏死病毒的焦磷酸测序检测方法,本研究针对流行性造血器官坏死病毒ORF65基因的保守区域进行分析,设计扩增引物及测序引物,经PCR扩增后对PCR产物进行焦磷酸测序,通过对反应条件和反应体系的优化,成功建立了该检测方法。试验结果显示,该方法扩增基因片段长度为137 bp,焦磷酸测序长度为38 bp,能够特异性检测出流行性造血器官坏死病毒,最低核酸检测限为0.5 pg/μL,与常规PCR检测方法的符合率达100%。本研究建立的流行性造血器官坏死病毒焦磷酸测序检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为流行性造血器官坏死病毒的快速检测提供了一种可行方法。
- 王娜张旻张舟景宏丽任彤张利峰吴绍强
- 关键词：焦磷酸测序PCR
- 金鱼造血器官坏死病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3
- 2017年
- 金鱼造血器官坏死病毒(Goldfish haematopoietic necrosis virus,GFHNV)是一种可感染金鱼等鲤科鱼类,并可导致其死亡的疱疹病毒。为了快速检测病原,本研究根据GFHNV的主要衣壳蛋白(Major captor protein,MCP)序列中的一段保守基因序列,设计引物和Taq Man探针,建立了GFHNV特异性的实时荧光定量PCR检测方法 ;并利用PCR反应扩增出的MCP基因,制备了p UC-GFHNV重组质粒作为阳性对照。经试验,该方法检测限最低可达10个拷贝数的目的基因,而且与锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)、甲鱼虹彩病毒(Softshell turtle iridovirus,STIV)、流行性造血器官坏死病毒(Epizootic haematopoietic necrosis,EHNV)、斑点叉尾鮰病毒(Channel catfish virus,CCV)以及白斑综合症病毒(White spot syndrome virus,WSSV)等5种水生动物病毒无交叉反应。该方法具有简便、快速、敏感、特异等优点,为该病的诊断与病原检测提供了一个重要手段。
- 张旻王姝王娜景宏丽徐立蒲吴绍
- 关键词：鱼类病毒病实时荧光定量PCRTAQMAN探针
- 黄海希瓦氏菌胶体金免疫层析试纸条及制备方法
- 本发明公开一种可快速检测刺参“化皮病”病原菌——黄海希瓦氏菌的胶体金免疫层析试纸条及制备方法，有底板，在底板上从一端依次由上至下呈阶梯状地粘有样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜及吸水垫，所述金标垫上喷涂有胶体金标记的黄海希瓦氏...
- 李强李华刘志强叶仕根景宏丽
- 文献传递
- 黄海希瓦氏菌单抗介导间接ELISA快速检测技术的建立被引量：9
- 2010年
- 应用农业部海洋水产增养殖学重点实验室制备的特异性抗黄海希瓦氏菌Shewanella smarisflavi AP629单克隆抗体3D9作为一抗,以碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗鼠Ig作为酶标二抗,建立了仿刺参Apostichopusjaponicus"化皮病"病原菌——黄海希瓦氏菌AP629的间接ELISA快速检测方法,并进行了条件优化。结果表明:抗原的最佳包被浓度为107个/mL,一抗工作的最佳稀释度为1∶32,病原菌的检测灵敏度为5×105个/mL。该方法特异性强,与希瓦氏菌属其它种类、弧菌和气单胞菌等均无交叉反应。该方法的建立有助于快速准确地诊断由黄海希瓦氏菌AP629引起的仿刺参疾病。
- 景宏丽李强吴秋仙李华
- 关键词：仿刺参单克隆抗体间接ELISA
- 流行性造血器官坏死病病毒抗原捕获ELISA建立被引量：1
- 2017年
- 使用差速离心浓缩的病毒免疫山羊,获得高免血清并提取IgG,即为抗流行性造血器官坏死病病毒(EHNV)多克隆抗体。利用纯化的EHNV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,经有限稀释法亚克隆,获得杂交瘤细胞株。将杂交瘤接种小鼠诱生腹水获得单抗3A4。以抗EHNV多克隆抗体为捕获抗体,单抗3A4为检测抗体,使用HRP标记的羊抗鼠IgG作为酶标二抗,建立了EHNV的抗原捕获ELISA方法。该方法可检出103TCID_(50)的病毒液上清和0.0056!g的MCP重组蛋白。对纯化的GCRV、IHNV、IPNV、VHSV及SVCV病毒液进行检测,结果均为阴性,未发现交叉反应。本研究建立的EHNV抗原捕获ELISA方法,具有敏感、特异和重复性好的特点。通过应用于人工感染样品和临床样品的检测进一步证实了本检测方法的实用性。
- 刘宁高志强谷强张旻景宏丽江育林张利峰刘金华
- 抗大鲵虹彩病毒单克隆抗体及其制备与应用
- 本发明公开了一种抗大鲵虹彩病毒单克隆抗体及其制备与应用。该抗大鲵虹彩病毒单克隆抗体是由保藏号为CGMCC No.9709的杂交瘤细胞ADRV McAb 4C3分泌产生的。该杂交瘤细胞的制备方法为：利用蔗糖密度梯度离心纯化...
- 王娜张旻景宏丽吴绍强林祥梅江育林
- 一种抗原蛋白、其单克隆抗体或多克隆抗体及应用
- 本发明实施例涉及一种抗原蛋白、其单克隆抗体或多克隆抗体及应用，该抗原蛋白由N段到C段包括通过连接序列依次相连的鲤疱疹病毒2型ORF153蛋白的第45‑56位氨基酸、第76‑95位氨基酸、124‑145位氨基酸、176‑2...
- 王娜张旻景宏丽吕继洲吴绍强林祥梅
- 一种利用焦磷酸测序技术检测流行性造血器官坏死病毒的引物、试剂盒和检测方法
- 本发明公开了一种利用焦磷酸测序技术检测流行性造血器官坏死病毒的引物、试剂盒和检测方法。具体地，本发明涉及一组利用焦磷酸测序技术检测流行性造血器官坏死病毒的引物，包括如序列表中SEQ ID No.2和SEQ ID No.3...
- 王娜张旻李霆王彩霞景宏丽吴绍强张利峰江育林
- 文献传递
- 锦鲤肌肉细胞系及其体外培养的方法和应用
- 本公开涉及锦鲤肌肉细胞系及其体外培养的方法和应用。本公开特别涉及一种锦鲤肌肉细胞系，及其体外培养方法和应用。
- 景宏丽陈冬杰高隆英孔玉方王娜张旻吴绍强吕继洲
- 非洲猪瘟检测技术研究现状被引量：3
- 2021年
- 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是一种高致死率的猪传染病,早期检测诊断是疫情防控的有效手段。本文对近年来国内外非洲猪瘟的常用检测技术进行了综述,包括病毒分离、基于核酸水平的方法(主要包括实时荧光PCR、多重PCR、恒温扩增检测技术和数字PCR等)和基于蛋白水平的方法(主要包括酶联免疫吸附试验和免疫层析试纸条等)三个层面,以期为非洲猪瘟病毒的检测提供一定的技术支持和文献参考。
- 李晓琳李晓琳景宏丽袁向芬王云霄吴绍强吴绍强
- 关键词：非洲猪瘟病毒核酸蛋白
