李立新
- 作品数：85 被引量：247H指数：9
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- 脑源性神经营养因子促进神经干细胞在体内外的定向分化被引量：2
- 2007年
- 目的:观察脑源性神经营养因子促进神经干细胞在体内外条件下定向分化的作用,探索神经干细胞在体内外定向分化的规律。方法:实验于2006-09/2007-04在南京医科大学分子生物学实验室和动物实验中心完成。①体外研究:取孕14～16d的胚胎大鼠脑组织,以无血清培养基培养获得神经干细胞,随即分成两组进行体外研究。实验组(n=10),加入5%胎牛血清和20μg/L脑源性神经营养因子诱导其体外条件下定向分化,对照组(n=10),仅加入5%胎牛血清,用免疫荧光及流式细胞仪的方法来检测定向分化得到的神经元及其比例。②体内研究:参照Bavetta等的方法制作大鼠脊髓(T10)右半切4mm长块状缺损模型。实验组(n=10):注射移植溴脱氧尿苷标记的细胞密度为1×109L-1的神经干细胞悬液20μL。对照组(n=10):注射移植20μLPBS于模型动物中。12周后,行辣根过氧化物酶神经逆行示踪评价脊髓感觉和传导功能的恢复程度,并取损伤处脊髓组织行免疫组织化学染色,观察缺损处打入的神经干细胞的存活,分化和迁移情况。结果:参加体内实验的20只大鼠均进入结果分析。①体外条件下,两组神经干细胞定向分化后均得到微管相关蛋白2阳性神经元,并且实验组微管相关蛋白2阳性神经元的比例在分化后第3天达最高峰,约为60%,而同期对照组仅约为30%,差异有统计学意义(P<0.05)。②体内条件下,移植12周后,免疫组织化学染色显示:体内实验组损伤脊髓处可见溴脱氧尿苷标记的阳性细胞,且缺损处可见大量神经微丝相关蛋白和神经生长相关蛋白染色阳性的神经元,体内对照组则未见以上两种蛋白染色阳性的神经元。辣根过氧化物酶神经逆行示踪显示:体内实验组脑组织可见到部分辣根过氧化物酶标记阳性神经元,而体内对照组未见辣根过氧化物酶阳性神经元。结论:脑源性神经营养因子促进神经干细胞体内外条件下
- 黄保胜李立新谢青松田和平胡卫星傅震
- 关键词：神经干细胞脑源性神经营养因子神经元定向分化
- 脑源性神经营养因子促进bHLH基因的表达和神经干细胞的定向分化被引量：12
- 2006年
- 目的观察脑源性神经营养因子(BDNF)对bHLH基因表达和神经干细胞(NSCs)定向分化的影响,探索NSCs分化的机制。方法取孕14 d的胚胎大鼠脑组织,以无血清培养基培养获得NSCs,然后随机分为2组,实验组加入5％胎牛血清(FBS)和20 ng/mL BDNF诱导其定向分化,而对照组仅加5％FBS,用免疫荧光及流式细胞仪的方法来检测分化得到的神经元细胞及其比例,采用RT-PCR技术分析bHLH基因表达的动态变化。结果实验组MAP-2阳性神经元的比例在分化培养后第3 d达高峰,约为60％,而同期对照组仅为30％,差异有统计学意义(P<0．05)。分化后bHLH基因MASH-1、neumD和neurogenin2表达均高于分化前,相同时间段实验组bHLH基因的表达强于对照组(P<0．05)。结论BDNF促进了NSCs向神经元定向分化;bHLH基因参与了NSCs的定向分化过程,其高表达可能有利于NSCs向神经元方向分化。
- 谢青松李立新陶轶胡卫星黄保胜
- 关键词：神经干细胞神经元神经营养因子分化
- 经岩骨乙状窦前入路治疗斜坡区肿瘤
- 2003年
- 目的 介绍并讨论一种治疗斜坡区肿瘤的经岩骨后乙状窦前的手术入路。方法 对19例患者进行了该手术入路的手术治疗。结果 15例患者肿瘤全部切除 ,4例患者行大部切除术 ;2例患者术后发生脑脊液漏 ; 2例发生偏瘫 ; 4例患者有同侧动眼神经麻痹 ;未发生死亡病例。结论 该手术的主要优点 :对小脑及颞叶牵拉较轻 ,斜坡区暴露良好。
- 傅震耿晓增胡卫星刘宁鲁艾林程刚李立新
- 关键词：岩骨乙状窦颅内压肿瘤切除术良性肿瘤
- 三维CT肿瘤成像结合神经导航显微手术治疗脑深部肿瘤
- 李立新
- 肝细胞生长因子促进神经干细胞向神经元细胞方向的分化被引量：2
- 2006年
- 目的 观察肝细胞生长因子（HGF）对神经干细胞向神经元细胞方向分化的作用。方法 取孕14-17d的胚胎大鼠，分离其脑组织，以无血清培养基培养，得到神经干细胞后，加入HGF诱导其定向分化，以免疫细胞化学和流式细胞术的方法来鉴定分化得到的神经元细胞及其比例。结果 加入HGF和胎牛血清（FBS）的实验组镜下神经元细胞较仅加入胎牛血清的对照组多，流式细胞术计数分化成神经元细胞的比例为55．76％，而对照组阳性率为32．69％；镜下直接计数实验组NSE阳性神经元的比例为（53．34±2．81）％，而对照组仅（30．78±3．13）％（P〈0．05）。结论HGF具有促进神经干细胞向神经元细胞方向分化的作用。
- 陶轶李立新崔毓桂傅震胡卫星鲁艾林
- 关键词：神经干细胞分化肝细胞生长因子神经元细胞
- 再程序化脂肪干细胞体外定向神经分化效率和机制被引量：4
- 2012年
- 目的探讨再程序化脂肪干细胞（adipose—derived stem cells，ADSCs）体外定向神经分化的效率和机制。方法体外培养大鼠ADSCs并纯化、鉴定，将第3代ADSCs分为三组：未进行慢病毒介导基因转染ADSCs组（空白组）；不含神经元生成素-2（neurogenin-2，Ngn2）基因慢病毒空载体转染ADSCs组（空病毒组）；慢病毒载体介导Ngn2基因转染ADSCs组（Ngn2组）；各组细胞均用含细胞生长因子的诱导培养基诱导15d。免疫荧光检测各组细胞神经元特异性蛋白（NeuN）阳性表达以观察神经元分化效率；Western blot检测各组细胞Mash1、Hes1、Dll1蛋白表达水平的差异，探索分化机制。结果诱导培养基诱导15d后，Ngn2组、空病毒组、空白组阳性表达NeuN分别为90．12％、45．34％、40．26％，各组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。Western blot结果显示，Ngn2组Dll1蛋白表达水平明显高于空病毒组和空白组（P〈0．01），Mashl、Hesl蛋白表达水平明显低于空病毒组和空白组（P〈0．01）；空病毒组和空白组Dll1、Mash1和Hes1蛋白表达差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论再程序化ADSCs诱导后神经元分化的比例较单纯ADSCs提高近99％，再程序化ADSCs定向分化神经元机制可能是通过上调Dll1蛋白水平，同时下调Mash1、Hes1蛋白水平，抑制notch信号通路，从而促进细胞的定向神经分化。
- 钱腾达代学良陆晓诚陶轶李立新
- 关键词：脂肪组织干细胞神经元再程序化
- 骨髓间充质干细胞联合Janus激酶信号转导及转录激活因子通路抑制剂治疗大鼠脑缺血再灌注损伤被引量：4
- 2013年
- 目的观察大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）和Janus激酶信号转导及转录激活因子（JAK—STAT）信号通路抑制剂AG490联合移植对大鼠局灶性脑缺血／再灌注损伤的神经保护作用。方法制备大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型。按照随机数字表达分为5组，分别设为sham组、1％二甲基亚砜（DMSO）组、AG490组、BMSCs＋1％DMSO移植组、BMSCs＋AG490移植组。移植治疗后24h，Westernblot检测脑缺血再灌后磷酸化STAT3、肿瘤坏死因子（TNF）-α蛋白表达变化，原位末端转移酶标记（TUNEL）法检测大鼠脑缺血区细胞凋亡水平。移植治疗后分别于3、7、14d对每组大鼠进行神经缺陷症状评分，14d后处死大鼠，氯化三苯四唑（Trc）法染色后计算脑梗死体积，干湿重法称量脑含水量。结果ACA90可以明显抑制脑缺血再灌注后STAT3的磷酸化水平，并且降低脑梗死相关炎性分子TNF．仅的表达。BMSCs＋AG490移植组中大鼠脑缺血区细胞凋亡、脑梗死体积[（12．31±6．24）％]及脑含水量[（77．55±0．53）％]较其他各组明显降低（P〈0．05），移植14d后BMSCs＋AG490移植治疗组中大鼠Bederson神经缺陷症状评分为（1．63±n35）分，较其他各组改善明显（P〈0．05）。结论BMSCs联合ACA90移植疗法对脑缺血再灌注损伤有明显协同神经保护作用。
- 魏增华郝怀勇贺敏敏李永涛李立新
- 关键词：脑缺血再灌注损伤骨髓间充质干细胞移植
- 手术治疗海绵窦海绵状血管瘤的临床体会被引量：12
- 2006年
- 目的研究海绵窦海绵状血管瘤的于术治疗方法。方法回顾性分析1995-2004年收治的9例海绵窦海绵状血管瘤的临床资料,比较经改良翼点入路开颅显微手术和射频辅助显微手术这二种手术治疗方法的治疗结果。结果9例病人均行手术治疗,无手术死亡,其中经改良翼点入路开颅显微手术治疗6例,经改良翼点入路开颅射频辅助显微手术治疗3例。经改良翼点入路开颅显微手术和射频辅助显微手术的肿瘤全切率分别为1例(17％)和3例(100％),次全切除率分别为5例(83％)和0例(0％),次全切除病例中有2例因大出血而终止手术,术中平均出血量分别为3500ml和500ml,术后Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ等颅神经功能损害分别有4例(67%)和1例(33％)。结论经改良翼点入路开颅射频辅助显微手术出血少,肿瘤全切率高,是治疗海绵窦海绵状血管瘤的一种有效的手术方法。
- 李立新胡卫星傅震苗毅郭峰吴幼章鲁艾林顾培元程刚骆慧宋金海
- 关键词：海绵状血管瘤海绵窦
- 再程序化脂肪源性干细胞的制备及体外定向分化为神经元的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的制备再程序化脂肪源性干细胞以及探索诱导其定向分化为神经元的方法。方法体外培养脂肪来源干细胞(ADSCs),取纯化、鉴定过的第3代ADSCs接种于24孔板中并分A,B,C三组:A组为带有绿色荧光基因(GFP)的慢病毒载体介导Neurogenin2(Ngn2)基因转染的ADSCs,制备再程序化脂肪干细胞;B组为带有GFP的空载体病毒转染的ADSCs;C组为未进行慢病毒介导基因转染的ADSCs;转基因7d后加入含细胞生长因子诱导培养基诱导分化15d。光镜下观察各组细胞形态变化以及免疫荧光研究各组ADSCs诱导后定向分化为神经元的差异。结果与B组和C组相比,A组ADSCs转基因后再经诱导分化15d后绝大部分细胞类似神经元,胞体呈梭形或椭圆形,有两个或三个突起伸出,细胞表达神经丝蛋白NF、神经元特异性蛋白NeuN及神经元特异性烯醇化酯酶NSE比例大大提高。B组与C组的神经元分化效率,无显著差异,P>0.05。结论慢病毒介导Neurogenin2基因体外转染ADSCs可以制备出再程序化脂肪源性干细胞,诱导后具有更强的定向分化为神经元的能力。
- 钱腾达代学良陆晓诚陶轶李立新
- 关键词：脂肪源性干细胞神经元分化再程序化
- 甲基强的松龙和神经干细胞移植联合治疗大鼠脊髓损伤被引量：10
- 2002年
- 目的 观察甲基强的松龙和神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后神经结构修复和功能恢复的治疗作用并探讨其作用机制。方法 制备大鼠胸10脊髓损伤模型,体外培养、诱导分化大鼠神经干细胞,定量评价甲基强的松龙和神经干细胞移植对脊髓损伤后神经结构修复和功能恢复的影响。结果 与对照组相比,移植组明显地增强了生长相关蛋白（GAP-43）mRNA的表达,促进了乙酰胆碱转移酶（ChAT）阳性脊髓运动神经元的再生、神经结构的修复和下肢运动功能的恢复（P<0.05）。结论 甲基强的松龙和神经干细胞移植通过增强GAP-43mRNA的表达、运动神经元的再生而促进了脊髓损伤后神经结构的修复和功能的恢复,是急性脊髓损伤的一种有效的治疗方案。
- 李立新吴幼章胡卫星顾培元傅震徐启武
- 关键词：神经干细胞移植脊髓损伤
