杨丽君
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 室温放置4 h对样本尿蛋白质组分析的影响被引量：1
- 2019年
- 目的探讨用医院检验科尿常规检查剩余的尿液样本开展尿蛋白质组分析,以便充分利用资源。方法同一个体尿液样本采集后分别采用立即冻存和室温下放置4h后冻存于-80℃备用。尿液样本分别进行聚丙烯酰胺凝胶电泳、二维凝胶电泳和液相色谱串联质谱分析,对比两种尿液样本采集方法对尿蛋白质组分析的影响。用点杂交免疫印迹法分析了室温放置4h尿液样本(n=150)中胞质非特异性二肽酶(CNDP2)蛋白在结直肠癌(CRC)患者与健康对照尿液中的含量。结果立即冻存和经室温放置4h后冻存的尿液样本的主要蛋白条带、数量和位置无明显差异;从中分别鉴定了(1204±50,n=3)个和(1155±7,n=3)个尿蛋白质,以及(7501±661,n=3)条和(6940±182,n=3)条多肽,两组样本间无差异。尿蛋白CNDP2在结直肠癌患者尿液中含量显著高于健康对照(P<0.001)。结论采集后立即冻存和室温放置4h后冻存尿液样本的尿蛋白质组分析无明显差异。医院检验科尿常规检查剩余的尿液样本可用于尿蛋白质组分析。CNDP2在结直肠癌患者尿液中含量升高,是结直肠癌候选的尿蛋白标志物。
- 杨丽君郭正光景宗攀孙玉琳孙伟赵晓航
- 关键词：二维凝胶电泳
- 人IgA／IgM Fc受体(hFcα／μR)的真核表达及功能研究
- 目的:近来研究发现一种既可以结合IgM,又可以结合IgA的新型人Fc受体(hFcα／μR)。目前没有发现与hFcα/μR有同源性的其他蛋白,因此将其归为单基因家族。本实验室已在大肠杆菌中表达了hFcα/μR 的膜外区全长...
- 杨丽君付莹王睿张伟
- 文献传递
- ANGPTL8在大鼠着床后雌激素短暂缺乏胎盘中的表达及其对人脐静脉内皮细胞功能的影响
- 2021年
- 目的研究血管生成素样蛋白8(ANGPTL8)在着床后雌激素缺乏下对胎盘和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)功能的影响。方法在大鼠妊娠6.5 d~8.5 d(GD 6.5~GD 8.5)时按照每只0.16 mg·kg^(-1)·d^(-1)的剂量给实验组(n=20)灌胃来曲唑建立着床后短暂雌激素缺乏模型,对照组(n=20)予以相同剂量的5%羧甲基纤维素钠。在GD 8.5和GD 19.5时分别取胚胎着床点组织和胎盘组织。,使用Real-time PCR检测组织中Angptl8 mRNA的表达、Western blot检测组织中ANGPTL8蛋白的表达;HUVECs培养在含不同浓度(0、1、2、4、8 nmol/L)的重组ANGPTL8的培养液中,使用划痕实验检测HUVECs的迁移功能、Transwell实验检测HUVECs的侵袭功能、成管实验检测HUVECs的成管功能。结果(1)在GD 8.5时,实验组着床点Angptl8 mRNA的表达水平显著高于对照组(P<0.05),而在GD 19.5时两组间胎盘组织Angptl8 mRNA的表达无显著差异(P>0.05)。在GD 8.5和GD 19.5两个时间点实验组着床点和胎盘组织中ANGPTL8蛋白的表达水平均显著高于对照组(P<0.05)。(2)细胞实验发现,ANGPTL8对HUVECs的迁移、侵袭和成管产生了抑制作用,并呈现浓度依赖性(P<0.05)。结论大鼠胚胎着床后短暂雌激素缺乏后胎盘ANGPTL8的上调抑制胎盘血管内皮的正常功能。
- 祝立权孙明明梁敏刁天杨丽君杨丽君刘婷婷张欣鲁聪刘婷婷徐祥波贺斌
- 关键词：胎盘人脐静脉内皮细胞迁移血管生成
- 人Fcα/μR和Poly Immunoglobulin Receptor多克隆抗体的制备及鉴定
- 2009年
- 目的:制备抗人Fcα/μR和Poly Immunoglobulin Receptor(pIgR)的多克隆抗体。方法:在Escherichia coli中分别表达人Fcα/μR的EC12和pIgR的D1结构域,均以包含体形式存在。从SDS-PAGE中切胶纯化,免疫新西兰兔,制备多克隆抗体。ELISA法检测抗体效价,Western blot法检测抗体的特异性,抗原柱吸收交叉和纯化多抗。结果:抗体滴度分别是1∶6 4000和1∶25 6000,经Western blot检测特异性良好,抗人Fcα/μR和pIgR的多抗相互没有交叉。结论:在E.coli中成功表达了人Fcα/μR的EC12结构域和pIgR的D1结构域,并制备了无交叉的多克隆抗体,为进一步研究其功能和相互关系奠定基础。
- 杨丽君张伟
- 关键词：多克隆抗体
- 人Fcα/μR的表达与功能的初步研究
- 人Fcα/μR是IgA和IgM的Fc受体,能与多聚体IgM/IgA结合,因此可能在系统免疫和粘膜免疫中都有重要的作用。其基因位于1号染色体1q32,毗邻其它FcR基因,包括Poly Immunoglobulin Rece...
- 杨丽君
- 关键词：FC受体跨膜蛋白蛋白表达毕赤酵母
- 文献传递
- HPV 58 L1改造基因的表达及其VLP产物抗血清制备被引量：2
- 2009年
- 高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)慢性持续性感染是诱发宫颈癌的主要病因.体外表达的HPV主要衣壳蛋白(L1)可自组装成病毒样颗粒(virus-like particle,VLP),免疫后可诱导产生型别特异性中和抗体,有效保护机体免受同型病毒的感染,因此可望预防病毒感染及感染相关的宫颈癌等病变.HPV58是诱发我国妇女宫颈癌的主要高危型病毒之一,目前尚无针对HPV58的疫苗问世.本研究联合采用多种策略对HPV 58 L1野生型基因进行改造,获得HPV 58 L1改造基因,命名为HPV 58 mL1,用杆状病毒-昆虫细胞表达系统进行HPV 58 mL1的表达,CsCl密度梯度离心法纯化获得HPV58 mL1重组蛋白,电镜分析结果显示,重组蛋白形成直径约55 nm的VLP.皮下免疫新西兰兔和豚鼠,ELISA检测显示,免疫动物产生高滴度针对HPV 58 mL1 VLP的抗血清,免疫斑点印迹检测显示,抗血清是针对VLP表面表位的.本研究表达了均一性好的HPV 58 mL1 VLP,并获得两个种属的HPV 58 mL1 VLP抗血清,为进一步研究有效预防HPV 58感染的疫苗打下基础.
- 范东升张婷彭清林杨丽君许于飞张然许雪梅
- 关键词：病毒样颗粒基因改造抗血清
