段骞
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- C3d分子多表位DNA疫苗体液免疫应答的增强作用被引量：3
- 2007年
- 目的研究C3d分子对多表位DNA疫苗体液免疫应答的增强作用。方法通过PCR方法合成多表位HME基因,分别插入真核表达载体pcDNA3.1和pcDNA3.1-3C3d,构建多表位DNA疫苗pcDNA3.1-HME和pcDNA3.1-HME-3C3d,经肌肉注射免疫小鼠,ELISA检测小鼠特异性抗体水平。结果经免疫的小鼠均能产生针对各表位的特异性IgG抗体,且pcDNA3.1-HME-3C3d免疫组小鼠的抗体水平明显高于pcDNA3.1-HME免疫组。结论C3d可增强多表位DNA疫苗的体液免疫应答水平。
- 程玉兴朱高红瞿素兰芸胡云章胡凝珠高承钢王东宝段骞
- 关键词：DNA疫苗多表位C3D体液免疫应答
- 用加速热稳定试验筛选甲型肝炎减毒活疫苗热稳定保护剂被引量：2
- 2001年
- 为筛选具有良好热稳定保护效果的甲肝减毒活疫苗 (H2 株 )保护剂 ,利用正交设计和加速热稳定试验 ,将不同配比的保护剂和液体疫苗混合后 ,封入安瓿 ,分别置 37℃和 45℃ ,不同时间取样 ,检测其感染性滴度 .结果表明无保护剂的对照疫苗在 45℃条件下感染性滴度仅能维持 2d不变 ,第 3天开始下降 ,至 4d已下降1.2 7logCCID50 ·mL-1;而有保护剂的 5批疫苗在 45℃条件下感染性滴度能维持 5d无显著变化 .在 37℃条件下无保护剂的对照疫苗感染性滴度仅能维持 7d无显著变化 ,10d显著变化 ,下降 1.0～ 1.1logCCID50 ·mL-1,而有保护剂的 5批疫苗在 37℃条件下感染性滴度能维持 10d无显著变化 .研究表明 0 .1mol·L-1MgSO4 ,w =5 %乳糖 ,0 .0 1mol·L-1精氨酸 ,0 .0 1mol·L-1甘氨酸组成的保护剂具有最佳保护效果 ,其热稳定保护效果明显优于现在使用的对照疫苗 .
- 胡凝珠柯华昕瞿素陈洪波王东宝段骞胡云章
- 关键词：甲型肝炎减毒活疫苗保护剂感染性滴度
- 狂犬病毒aG株核蛋白和糖蛋白双表达质粒的构建及其在真核细胞中的表达被引量：1
- 2006年
- 目的构建狂犬病毒aG株核蛋白(NP)和糖蛋白(GP)双表达重组质粒,在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)中表达核蛋白和糖蛋白。方法提取狂犬病毒RNA,应用RT-PCR方法扩增NP和GP基因,分别将其克隆到pIRES载体上,获得同时含有NP和GP基因的双顺反子重组质粒pING,并以脂质体介导法转染CHO-K1细胞,G418筛选,用ELISA和IFA检测NP和GP的表达。结果限制性内切酶分析表明重组质粒pING含有NP和GP基因片段,长度分别为1353bp和1575bp。应用ELISA和IFA方法,在转染细胞中均检测到NP和GP的表达。结论重组双表达质粒可在CHO细胞中同时表达NP和GP,为进一步开发重组狂犬病疫苗奠定了基础。
- 杨卉娟陈俊英孙明波张新文钱源段骞王东宝姜述德廖国阳李卫东
- 关键词：狂犬病毒糖蛋白核蛋白真核细胞
- 人胚肺二倍体细胞KMB_(17)凋亡的形态学发生
- 2000年
- 无血清培养是诱导细胞凋亡的常规方法 ,具有简便、快速的特点 .用光学显微镜、荧光显微镜及透射电镜观察了人胚肺二倍体成纤维细胞 (KMB1 7)在无血清培养过程中细胞凋亡的形态学发生过程 .结果 :无血清诱导后 1h ,光镜下可见致密单层的成纤维状细胞出现疏松状态 ;3h后 ,少数细胞(1%～ 5% )出现圆缩 ;6h后 ,成纤维细胞全部由长梭形收缩为圆形 ,体积缩小 .荧光及电镜下可将细胞凋亡从形态上分为两个阶段 ,第一阶段细胞出现典型的凋亡特征 ,细胞圆缩、出芽、核染色质凝缩、成块状或新月状分布于核膜边缘 ;第二阶段 ,在细胞凋亡晚期出现坏死症状 :电镜下整个细胞崩解成碎片 .结果表明 :无血清培养诱导的凋亡在凋亡的晚期由于营养过度缺乏易出现二次坏死现象 .首次报道用于生物制品生产的人胚肺二倍体细胞在无血清诱导下凋亡发生的形态学特征 .
- 邵聪文胡云章何继红杨净思王晓辉柯华昕梁燕瞿素段骞
- 关键词：人胚肺二倍体成纤维细胞细胞凋亡形态学
